Введение к работе
Актуальность проблемы. В настоящее время в связи с ухудшением экологической обстановки, широким применением иммуносупрессив-ной терапии, а также вследствие распространения различных иммуно-дефицитов инфекционной природы и, в первую очередь, СПИДа, резко увеличилось число заболеваний, вызываемых вирусом простого герпеса. При этом участились случаи развития тяжелых форм герпетической инфекции, сопровождающихся тяжелыми осложнениями, представляющими нередко угрозу для жизни больного. По данным ВОЗ инфекции, обусловленные ВПГ, как причина летальных исходов при вирусных заболеваниях, занимают второе место (15.8%) после гриппа (35.8Z) (Билл. ВОЗ, 1985, 1991).
Традиционные способы лечения герпетических инфекция включают применение различных химиопрепаратов, влиящих на репродукцию вируса, а также использование таких иммунобиологических препаратов, как интерферон и его индукторы, противогерпетические вакцины, различные иммуномодуляторы.
В последние годы в литературе появились данные о целесообразности использования для лечения, и, что особенно важно, для профилактики герпесвирусных заболеваний таких иммунобиологических препаратов, как иммуноглобулины человека. Ухе показан протектив-ный эффект препаратов иммуноглобулинов человека при профилактике и лечении инфекций, вызываемых представителями сем. Herpesviridae - вирусом ветряной оспы-герпеса зостер и цитомзгаловирусами. При этом эффективными оказались.,, как препараты иммуноглобулинов направленного действия, обогащенные соответствующими вирусспецифи-ческими антителами, так и препараты нормальных иммуноглобулинов человека, предназначенные для внутривенного применения, позволяющего вводить пациентам требуемые количества соответствующих специфических антител. (Dituro I.G. et al., 1986; Goebell U. et al., 1987; Stienmuller D.R. et al., 1990; Ucimar W. et al., 1990).
В последние годы были получены предварительные данные о положительном действии внутривенно вводимых препаратов нормальных иммуноглобулинов человека при лечении инфекций, вызываемых ЕПГ (Habich Н., 1985; Erlich К. et al, 198?; Raiznann H.L., Faster
G.S., 1988). Полагают, что более эффективным будет применение препарата специфического противогерпетического иммуноглобулина, обогащенного антителами к ЕПГ {Kohl S. et al, 1989; Протас 11. и др., 1991), Однако в настоящее время промышленный выпуск подобного препарата не налахен. Это определяет научную и практическую значимость работы, посвященной разработке теоретических и экспе-рименальных основ промышленного получения препарата противогерпетического иммуноглобулина человека.
Дзль и задачи исследования. Целью работы явилась разработка физико-химических и иммунологических основ ' получения препарата противогерпетического иммуноглобулина человека.
Основные задачи исследования.
-
Широкомасштабное исследование распределения герпесспеци-фических антител в различных винах сырья, используемого для производства препаратов иммуноглобулина человека.
-
Выбор наиболее перспективных видов сырья.
-
Разработка оптимальных способов выделения противогерпети-чеекгас иммуноглобулинов из отобранного сырья.
-
Характеристика полученных препаратов иммуноглобулинов.
-
Изучение влияния препарата противогерпетического иммуноглобулина на аффинность герпесспецифичеких антител у больных с герпетическими инфекциями.
Научная новизна. Установлены закономерности распределения герпесспецифичеких антител в популяции населения России. Показано, что около 855 населения имеют повышенное содержание антител к ПГ.
Проанализировано содерхание антител к БИТ в различных видах сырья, используеного для производства препаратов иммуноглобулинов человека: в пулированных донорских и плацентарных сыворотках крови и в сыворотках крови индивидуальных доноров.
Экспериментально обосновало получение препарата противогерпетического иммуноглобулина человека на основе предварительно отобранных сывороток крови индивидуальных доноров с наиболее высоким содержанием антител к ВПГ.
Показана возможность использования в качестве дополнительного источника герпесспецифических иммуноглобулинов балластной
фракции III метода Кона. Экспериментально обосновано получение препаратов иммуноглобулина из балластной фракции III, обогащенного 3 и 4 подклассами IGG.
Исследовано содержание антител к ВПГ в коммерческих препаратах нормальных иммуноглобулинов человека. Показано, что около 7% серия препаратов иммуноглобулинов характеризуется повышенным в 3 - 6 раз содержанием антител к ВПГ.
Проведено изучение аффинности герпесспецифических антител у больных, с различными формами герпетических инфекции и у'здоровых людей. Исследовано влияние препарата противогерпетического иммуноглобулина на аффинность антител к ВПГ у лиц с герпетическими заболеваниями.
Практическая значимость. На основе предварительно отобранных сывороток крови индивидуальных доноров получен препарат протизо-герпетического иммуноглобулина, специфическая активность которого в 4 раза превышает противогерпетическую активность препаратов нормальных иммуноглобулинов. На полученный препарат составлена Временная фармакопейная статья и разработан проект программы Государственных испытаний клинической эффективности, которые утверждены Ученым Советом МНИИЗМ им.Г.Н.Габричевского.
Разработан способ получения препарата иммуноглобулина из балластной фракции III метода Кока. На данный способ оформлена заявка на авторское свидетельство. (Приоритетная справка N5045574).
Для профилактики и лечения герпетических инфекций предложено использовать коммерческие препараты нормальных иммуноглобулинов, содержание антител к ВПГ в которых в 3-6 раз превышает средние значения титров антител к ВПГ.
Апробация работы. Диссертация апробирована на заседании секции Ученого Совета "Иммунология и медицинская биотехнология" МЯИ-ИЭМ им. Г.Н.Габричевского 30 марта 1993 года. Результаты исследований были доложены на конференциях мологых ученых МНИИЭМ им. Г.Н.Габричевского в 1988, 1991 гг., на конференции "Заболевания, обусловленнкз вирусом простого герпеса" кафедры кожных болезней ММА им. И.М.Сеченова и проблемной комиссии "Герпесзирусные инфекции" АМН СССР в феврале 1991 г.
Публикации. По теме диссертации опубликовано 4 печатные ра
боты. :
Основные положения, выносимые на зашиту:
1. Выявлены закономерности распределения герпесспеїшфических антител в различных видах сырья, используемого для производства препаратов иммуноглобулина человека.
3. Способ получения препарата противогерпетического иммуноглобулина человека.
-
Способ выделения иммуноглобулинов из фракции III метода Кона.
-
Для профилактики и лечения инфекций, вызываемых ВПГ, предложено использовать предварительно отобранные коммерческие препараты нормальных иммуноглобулинов, содержание герпесспецкфк-чеких антител которых в 3-6 раз превышает средние значения титров антител к ВПГ, установленные для препаратов нормальных иммуноглобулинов человека.
5.Результаты определения аффинности герпесспецифических антител в сыворотках крови больных с герпетическими инфекциями и здоровых доноров.
Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на 4Щ страницах машинописного текста, включает 12 таблиц,-/2 рисунков, 1 график. Диссертация состоит из введения, 3 глав обзора литературы, Ъ глав собственных исследований, заключения, выводов и списка цитируемой литературы. Список литературы включает Zi.% источников как отечественных, так и иностраншх авторов.
