Введение к работе
Актуальность исследования. Лептоспироз относится к наиболее значимым природно-очаговым зоонозам. Социально-экономический ущерб от лептоспироза значителен во многих странах мира [Покровский В.И. и соавт., 1989; Ананьина Ю.В., 2003; Seijo A. et al., 2000; Tse K.S. et a!., 2002; Basu D. et al., 2003; Gerke P., Rump L., 2003].
На территории России заболевание регистрируется практически во всех климатогеографических зонах. В Краснодарском крае заболеваемость леп-тоспирозом в последние годы превышает общероссийские показатели в 5-19 раз и составляет от 6,6 до 29,6 на 100 тыс. населения [Лебедев В.В. и соавт., 2001; Калашников И.А. и соавт., 2003; Мезенцев В.М., 2003]. Широко распространенный на Северном Кавказе иктерогеморрагический вид инфекции характеризуется наиболее тяжелым течением, частым развитием осложнений и полиорганной недостаточностью [Лебедев В.В., Лучшее В.И., 1999; Городин В.Н., 1998,2003; Anselmo М. et al., 2000].
Несмотря на многочисленные исследования, посвященные лептоспиро-зу, некоторые аспекты патогенеза заболевания остаются недостаточно изученными. Тяжелое течение болезни сопровождается значительными гомео-статическими нарушениями. Причинная взаимосвязь дисфункции органов и систем с развитием выраженного эндотоксикоза, вероятнее всего, находится на клеточном и субклеточном уровнях.
Состояние клеточных мембран является важным фактором поддержания гомеостаза и регуляции происходящих в клетках биохимических и физиологических процессов [Колмаков В.Н., Радченко В.Г.,1982; Drummen G.P. et al., 2004; Venkataraman S. et al., 2004]. Одним из универсальных триггер-ных механизмов повреждения органов и тканей принято считать перекисное окисление липидов (ПОЛ), состояние которого определяется активностью прооксидантных и антиоксидантных систем. Усиление липопероксидации клеточных мембран является результатом дискоординации их взаимодействия [Шувалова Е.П. с соавт., 1996; Loscalzo J., 2003; Zoroglu S. et al., 2004; AbdulhadiN.H.,2004].
Общие признаки строения и принципы функционирования биологических мембран клеток различных органов и систем присущи эритроцитарной мембране. В эритроцитах отчетливо представлена ферментная система антирадикальной защиты. В эту ферментную систему, вовлекающую в метаболизм 02 и его различные радикалы, входят несколько НАД- и НАДФ-содержащих дегидрогеназ, глютатион, супероксиддисмутаза и ката-лаза и другие [Сторожук П.Г., 1997, 2000; Rokicki W. et al., 2003; Ozcan M.E. etal, 2004].
Изменения структуры и функциональной активности эритроцитов напрямую связаны с мембранотоксическим действием экзо- и эндогенных токсических субстанций [Авдеева М.Г., Беляк Г.М., 1996; Мойсова Д.Л. с соавт., 1998; Городин В.Н., Лебедев В.В., 2000].
На сегодняшний день не существует единого мнения об уровне ферментной активности АОС и её влиянии на процессы ПОЛ при различных патологических состояниях. Малоисследованными остаются изменения метаболизма эритроцитов у больных лептоспирозом. Не изучалась при лептоспирозе активность ферментов эритроцитов, участвующих в антирадикальной защите и инициации процессов оксигенации гемоглобина.
До настоящего времени практически отсутствует комплексный подход в исследовании компонентов АОС эритроцитов и их оценка у больных лептоспирозом в динамике заболевания. Поэтому изучение состояния компонентов АОС эритроцитов представляет теоретический и практический интерес, так как это позволит расширить патобиохимическую картину лептоспироза на уровне клетки, оценить тяжесть патологического процесса в различные периоды заболевания, прогнозировать его исход.
Цель исследования:
Выявить изменения показателей антиоксидантной системы крови у больных лептоспирозом для объективной оценки тяжести патологического процесса и прогнозирования исходов заболевания.
Задачи исследования:
-
Изучить современную клинико-лабораторную картину лептоспироза при различных клинических формах и степенях тяжести заболевания.
-
Изучить активность ферментативных и уровень неферментативных компонентов АОС эритроцитов: каталазы интактных эритроцитов и их гемо-лизата, супероксиддисмутазы, сукцинатдегидрогеназы, глюкозо-6-фос-фатдегидрогеназы, SH-rpynn - и дать их сравнительную оценку в различные периоды и при различных формах заболевания у больных лептоспирозом.
-
Установить гасящую способность сыворотки крови люминола индуцированной пероксидом водорода по максимальной вспышке хемилюминес-ценции у больных лептоспирозом.
-
Определить информативность показателей АОС крови в оценке тяжести патологического процесса, прогноза течения заболевания.
Новизна исследования.
Впервые проведено комплексное лабораторное обследование больных лептоспирозом с изучением активности ферментативных и уровня неферментативных компонентов АОС эритроцитов: каталазы интактных эритроцитов и их гемолизата, супероксиддисмутазы, сукцинатдегидрогеназы, глюко-зо-6-фосфатдегидрогеназы, SH-групп. Впервые изучена при лептоспирозе общая антиоксидантная емкость сыворотки крови по максимальной вспышке хемилюминесценции люминола, индуцированной пероксидом водорода. Установлена зависимость изученных показателей от периода и степени тяжести заболевания.
Практическая значимость.
Дана современная характеристика иктерогеморрагического лептоспироза в зависимости от форм и степени тяжести заболевания. Для различных периодов лептоспироза определены характерные изменения АОС эритроци-
тов и сыворотки крови. Внедрена методика оценки тяжести течения и прогнозирования исходов лептоспироза по определению каталазы интактных эритроцитов и их гемолизата, супероксиддисмутазы, сукцинатдегидрогеназы, глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы, SH-rpynn, а также уровня гасящей способности сыворотки по максимальной вспышке хемилюминесценции. Основные положения, выносимые на защиту:
-
У больных иктерогеморрагическим лептоспирозом регистрируются характерные изменения в антиоксидантной системе (АОС) эритроцитов, направленность и выраженность которых зависит от формы, степени тяжести и периода заболевания.
-
Определение активности Г-6-ФДГ, СДГ, каталазы, содержания SH-rpynn в эритроцитах в начальный период и разгар лептоспироза позволяет дать объективную оценку тяжести состояния больных и прогнозировать исход заболевания. В периоде ранней реконвалесценции у больных лептоспирозом отмечается позитивная динамика исследуемых показателей, но отсутствует их полное восстановление даже при нормализации общепринятых клинико-лабораторных показателей, что свидетельствует о незавершенности инфекционного процесса.
-
У больных с тяжелым и среднетяжелым течением иктерогеморрагическо-го лептоспироза отмечается снижение способности плазменных факторов антирадикальной защиты гасить хемилюминесценцию люминола, индуцированную пероксидом водорода.
Внедрение результатов работы.
Исследование основных показателей АОС внедрены в клиниках Кубанской государственной медицинской академии, используются в работе реанимационного отделения Краевого лептоспирозного центра (городская клиническая инфекционная больница г. Краснодара) и других инфекционных стационарах Краснодарского края.
Отдельные положения диссертации включены в лекции и практические занятия курсантов кафедры инфекционных болезней и эпидемиологии ФПК и ПСС КГМА.
Апробация диссертационного материала.
Основные положения работы доложены на заседаниях Ассоциации инфекционистов и эпидемиологов Кубани (2001-2004 гг.); на Всероссийских научно-практических конференциях «Современные технологии диагностики и терапии инфекционных болезней» (1999), «Актуальные вопросы инфекционной патологии и современные методы лечения» (1999), «Инфекционные болезни на рубеже XXI века» (2000); VI Российско-итальянской научной конференции «Инфекционные болезни: диагностика, лечение, профилактика» (2000); IX, XI Международных конференциях «Новые информационные технологии в медицине, биологии, фармакологии и экологии» (2001, 2003); X Всероссийской научно-практической конференции по лептоспирозу (2003); VI съезде инфекционистов (2003); V съезде иммунологов и аллергологов СНГ (2003).
Публикации.
По материалам диссертации опубликовано 26 печатных работ. Объем и структура диссертации.
Диссертация изложена на 167 страницах, состоит из введения, 4 глав, включая обзор литературы, заключения, выводов, практических рекомендаций, иллюстрирована 27 таблицами, 32 рисунками. Библиографический указатель включает 333 источника, в том числе 220 отечественных и ИЗ зарубежных авторов.
