Введение к работе
Актуальность исследования
Одной из актуальнейших проблем педиатрии является осложненное течение острых респираторных вирусных инфекции с бронхообструктивным синдромом. При отсутствии врожденной патологии причиной бронхообструтоивного синдрома является сочетание инфекционных и аллергических заболеваний, которые сопровождаются превалированием Тп2-типа иммунного ответа [K.C.Barnesetal, 1999,ВАЛопатина,2006] Наиболеераспгюстраненное аллергическое заболевание—это БА По данным эгщдемиологических исследований 2003 года ею страдает до 10% детсюго населения ИИІалаболкин,2003].
В настоящее время все больше исследователей проявляют интерес к проблеме почечной патологии у детей, что объясняется вькшимуцельньмвегомвс Несвоевременно распознанное заболевание и поздно начатое лечение часто лежат в основе прогрессирования патологического процесса и развития ХПН, вьвывающих задержку роста и развития ребенка и гфиюдяшихкинвалидизации, сокращению продолжительности жизни Заболевания почек у взрослых нередко бывают продолжением болезни, начавшейся в детском возрасте [АВЛапаян, НДСавенкова, 1997; ААБаранов,2002;ААВялшва,2002]
Среди заболеваний почеку детей чаще всего встречаются ПН и ГН ПН характеризуется склонностью кхроническому течению и в ряде случаев приводит к формированию хронической почечной недостаточности. ГН имеет выраженный аутоиммунный компонент и, как правило, приводит к почечной недостаточности. В том и другом случае имеет место реакция воспаления, однако, гфинципы лечения различные [АВ.Караушв, 1999, S.Segereretal ,2000].
Более 30 лет назад рядом авторов были проведены первые исследования по изучению роли БОФ при аутоиммунных процессах [Г АТрубников, Д М.Никулина, В И Балашов и др, 1972-1975; ПППрошина, Д.М.Никулина, 1978, C.HW.Horne, 1986 и многие другие]. К настоящему времени установлено участие этих белков в механизмах реактивности организма Например, СРБ связан с системой комплемента [АВЛолевщиков, 2001], СБАГ обладает иммуносупрессивными свойствами [N A Bersinger, 1990, Д М. Никулина,1993]. Поэтому определение роли белков в патогенетическом механизме, а также определение их диагаостической значимости представішетособьшинтерес [В.В Долгов, 1997,Р. Kes,2000]
В последние годы центр тяжести изучения патогенеза аутоиммунных и воспалительных заболеваний заметно сместился в сторону определения гжшичньгх регуляторных молекул иммунной системы - цитокинов [А.Е.Вершигора, 1990; РМ.Хаитов, 1995; Н С.Черкасов, 2004] Доказано, что цитокиньї являются эндогенными ивдукторамисинтезаБОФ [П 2004]. Однако не может быть однозначной оценки результатов определения различных цитокинов из-за существования взаимозамещаемости биологических эффектов этих регуляторов [В Ф.Чехун,2000;Н.МБережная,2006]
В случае развития ГН значительную роль играет нарушение баланса между процессами повреждения и юсстановления клеток клубочка [A.R.ICitchmg, 2002; C.Stambe, 2003] В своих исследованиях Baker и соавт и Shirnrzu и соавх показали, что активация апоптоза у больных нефритом подавляет юспалительные явления в клубочке и уменьшаетрискгжзвитиявозвратаГН
Следовательно, апогггоз является необходимым в организме механизмом для освобождения от чужеродных клеток и клеток, успевших выполнить свою функцию [В А Ткачук, 2002; Н Н.Белушкина,2004]. Многаефакторьісредьіюспалительного очага выступают индукторами апоптоза, в том числе TNFa, DR5, НЛ и другие [НЕ Сурнакова, 2006] Антиюспалительными свойствами обладаетГЫ.
Но до сих пор остаются не до юнца ясными молекулярные механизмы, определяющие течение и исход воспалительных заболег анийсаутоиммунньгмкомпонентом
Цель исследования
Установить ютйнггко-диагностическое и прогностическое значение белков, ассоыцированньк с воспалением, и маркера готовности к апоптозу при заболеваниях почек и бронхолегочной системыудетей
Задачи исследования
Взадачиисследованиявходшкг 1. Определить уровень СРБ, МГР - 1(3, СБАГ в крови детей с различными юспалительньБУги, в том числе заболеваниями легких и почексаутоиммунным компонентом.
2 Определить уровень TNFa, TLA в крови детей с различными восшлитеяьными, в том числе заболеваниями легких и почек с аутоиммунным компонентом
3 Изучить содержание маркера апошоза DR5 в крови детей с воспалительными, в том числе с аутоиммунным юмгонентом, заболеваниямилегкихипочек.
4 Провести корреляционный анализ для установления заюномерностей продукции и диагностического значения изучаемых белков
5 Разработать новые диагаостические и прогностические ашDpитмьIг ocнoвeбeлюввocпшeнияиDR5дrayкнзашioйпатолoraи
Научная новизна исследования
Впервые было проведено комплексное изучение молекул, отражающих разные звенья патогенеза заболеваний с аутоиммунным компонентом у детей Установлена зависимость продукции маркера апоптозаи белков воспаления от выраженности заботеванияихарактера всюпалительногоііроцесса.
Впервые изученыDR5 иМПМР приуказанньїхзаболеванияху детей
Впервые показана юрреляционкая взаимосвязь СРБ, МІР-1)3, TNFa, СБАГ и DR5 между собой с учетом патогенеза и разработаны новые диагностические критерии заболеваний с аутоиммунным компонешомудетей
Практическая значимость исследования
І мунохимическиетестьітанзученн и DR5) могут быть использованы в качестве дополнительных лабораторных критериев при уточнении диагноза, оценке тяжести и прогнозе исхода заболеваний почек и легких у детей, а также при профилаклтгческих обследованиях для гфедупреждения развития заггущеннькформзаболеваний.
Все перечисленное, в свою очередь, составит основу эшном]тчесюйэф( ктивностиисю
Предложенные рекомендации могут найти применение в коинико-лабораторной практике как спегхиализированньк стационаров, тжиЛПУобщегопрофиля. Основные положения, выносимые на защиту
1. БОФ, TNFa, IL4 и DR5 отражают разные звенья патогенеза у детей с различными воспалительными, в том числе с аутоиммунным компонентом, заболеваниями почек. БОФ, вероятно, больше связаны с непосредственными процессами изменения клеток-мишеней очага юспаленвд,Т№а,1Ъ4иВ1 2 Пгюдукция БОФ (СРБ, МІР-1(3, СБАГ) зависит от выраженности и характера воспалительного процесса Концентрация СРБ и МПЧР максимально возрастает при банальном воспалении - в группе ПН Частота выявления СБАГ превалирует при Ш и ТИН, что подгвфждаетформальностьеговклкнениявгруїіг 3. Синтез DR5, TNFaHlL4 преобладаетв сяучаяхзаболеваний с аутоиммунным и аллергическим компонентами как в группе бронхолегочньгх, так и нефрологаческих нозологии. Их максимальные значения отмечены в группе ГН и БА средней тяжести, а минимальные значения получены в груїтпах сравнения - ПН и БР В группе ГН между ОК5,ТКГаи1Ъ4определетдс 4. Достоверное снижение продукции DR5,1L4 и TNFa при тяжелом течении БА по сравнению с их показателями при БА средней тяжести отражает изменения могх)0-функционального звена и иммунного ответа и расценивается как неблагоприятаьш критерий развитиязаболевания.
5. Мониторинговое определение всех пяти показателей воспаления отражает на момент анализа активность определенного патогенетического звена и его изменение под воздействием применяемых терапегтгческих методов, что положено в основу формирования диагностических и пгх)гностических алгоритмов использования Личное участие автора в получении результатов исследования
Клиническое исследование с анкетированием лиц юнтрольной и основной групп, обработка лабораторного материала, получение тест-системы на СБАГ и постановка реакций с ее использованием, анализ, обобщение и статистическая обработка результатов проведены лично авгоромработьт.
Апробация работы
Материалы диссертации доложены на заседаниях кафедры биологической химии с курсом клинической лабораторной диагностики и конференциях ГОУ ВПО АГМА, на международных научных конференциях молодых ученых «Белки - маркеры патологических состояний» (Астрахань - Москва, 1999, 2003гг), на научно-практичес-кой конференции молодых учёных с международным участием «Современные достижения фундаментальньк наук в решении актуальных проблем медицины» (Астрахань-Москва, 2004г.), на научно-практической юнференции с международным участием Достижения фундаментальных наук в решении актуальных проблем меддциньг (Астрахань-Волгоград-Москва, 2006), были представлены на ХХУШ и ХХХП Meeting of the international society for oncodevelopmentalbiology andmedicine(ISOBM) (Мюнхен,Германггя,20МиХельсинки,Ф]шот
По теме диссертации оітубликовано 10 научных статей, 2 из них в ВАК рецензируемых изданиях Оформлена заявка на изобретение.
Внедрение результатов исследования: результаты диссегяации включены в учебный план кафедр биологической химии с курсом клинической лабораторной диагностики и педиатрии лечебного факультета Астраханской государственной медицинской академии
Структура и объем работы
Диссертация изложена на 134 страницах, состоит из введения, обзора литературы, глав «Материалы и методы исследования», «Собственные исследования», «Обсуждение полученных результатов», выводов, практических рекомендаций, списка литературы.
Иллюстративный материал представлен 24 таблицами и 26 рисунками Библиография включает в себя 170 отечественных и 114 зарубежныхавторов
Работа выполнена по плану НИР ГОУ ВПО «Астраханская госуцарственная медицинская академия» на кафедрах биологической химии с курсом клинической лабораторной диагностики, педиатрии лечебного факультета, госпитальной педиатрии ГОУ ВПО АІМАпри поддержке грантов ФЦП «Интеграция науки высшего образования России», 2000 - 2004 гг, а также Фонда содействия развитию малых.
