Введение к работе
Аюуальносгъисследования
Одной из актуальнейших проблем педиатрии является осложненное течение острых респираторньж вирусных инфекций с бронхообсгрукгивным синдромом. При отсутствии врожденной патологии причиной бронхообструкгивного синдрома является сочетание инфекционных и аллергических заболеваний, которые сопроюждаюгся превалированием Тп2-типа иммунного ответа [K.CBamesetal Д999,ВАЛопатина,2006] Наиболеегж;пространенное аллергическое заболевание - это БА. По данным эпидемиологических исследований 2003 года ею страдает до 10% детского населения [ДИалаболкин,2003].
В настоящее время все больше исследователей проявляют интерес к проблеме почечной патологии у детей, что объясняется вьіюкімудельньмвешмвструкіуребгаезнейи Несвоевременно распознанное заболевание и поздно начатое лечение часто лежат в основе прогрессирования патологического процесса и развития ХПН, вызывающих задержку роста и развития ребенка и гфиюдяшихкинвалидизации, шкращениюпродолжительностижизни Заболевания почек у взрослых нередко бывают продолжением болезни, начавшейся в детском возрасте [АВЛапаян, НДСавенкова, 1997; ААБаранов,2002;ААВялюва,2002]
Среди заболеваний почек у детей чаще всего встречаются ПН и ГН ПНхаракіфизуетсяскпонностьюкхроничесжяу^течениюивряде случаев приводит к формированию хронической почечной недостаточности. ГН имеет выраженный аутоиммунный компонент и, как правило, приводит к почечной недостаточности. В том и другом случае имеет место реакция воспаления, однако, принципы лечения различные[А.Караулов, 1999,S.Segeneretal ,2000].
Более 30 лет назад рядом авторов были проведены первые исследования по изучению роли БОФ при аутоиммунных процессах [Г А.Трубников, Д М.Никулина, В И Балашов и др, 1972-1975; ПППрошина, Д.М.Никулина, 1978, C.HW.Horne, 1986 и многие другие]. К настоящему времени установлено участие этих белков в механизмах реактивности организма Например, СРБ связан с системой комплемента [АВЛолевщиков, 2001], СБАГ обладает иммуносупрессивными свойствами [N A. Bersinger, 1990, Д М. Никулина,
1993]. Поэтому определение роли белков в патогенетическом механизме, а также определение их диагностической значимости представяяетособь1Йинтерес[В.ВДолгов, 1997,P.Kes,2000]
В последние годы центр тяжести изучения патогенеза аутоиммунных и юспалительных заболеваний заметно сместился в сторону определения различных регуляторных молекул иммунной системы - цитокинов [АЕВершигора, 1990; РМ^Хаитов, 1995; Н С.Черкасов, 2004] Доказано, что цитокиньї являются эндогенными индукторами синтезаБОФ |ДПНаза^
2004]. Однако не может быть однозначной оценки результатов определения различных цитокинов из-за существования взаимозамещаемости биологических эффектов этих регуляторов [В Ф.Чехун,2000;Н.М.Бережная,2006]
В случае развития ГН значительную роль играет нарушение баланса между процессами повреждения и восстановления клеток клубочка [ARKitehing, 2002; C.Stambe, 2003] В своих исследованиях Baker и соавт и Shimizu и соавт. показали, что активация апоптоза у больных нефритом подавляет воспалительные явления в клубочке и уменьшаетрискразвитиявозвратаГН
Следовательно, апоптоз является необходимым в организме механизмом для освобождения от чужеродных клеток и клеток, успевших выполнить свою функцию [В А Ткачук, 2002; Н HJБeяyшкинa,2004].MнoraeфaкropьIcpeдьIвocпaлитeльнoгo очага выступают индукторами апоптоза, в том числе TNFo, DR5, ИЛ и другие [Н.Е Сурнакова, 2006] Антивоспалительными свойствами обладаетЕА
Но до сих пор остаются не до юнца ясными молекулярные механизмы, определяющие течение и исход воспалительных заболеванийсаутоиммунньїмкомпонентом
Цель исследования
Установить клинико-диагаостическое и прогностическое значение белков, ассоциированньж с воспалением, и маркера готовности к адаптозу при заболеваниях почек и бронхолегочной системыу детей
Задачи исследования
В задачиисследованиявходило' 1. Определить уровень СРБ, МІР — 1(3, СБАГ в крови детей с различными воспалительными, в том числе заболеваниями легких и
почексаутоиммунньмюмпоненгом.
-
Определить уровень TNFa,IL4 в крови детей с различными юспалительньми, в том числе заболеваниями легких и почек с аутоиммунньжшмпонентом
-
Изучить содержание маркера апоптоза DR5 в крови детей с воспалительными, в том числе с аутоиммунным компонентом, заболеваниямилегкихипочек.
-
Провести корреляционный анализ для установления заюномерностей продукции и диагностического значения изучаемых белков
-
Разработать новые диагностические и прогностические алгоритмьгігаосногебелшввоажпшшиВІ^
Научная новизна исследования
Впервые было проведено комплексное изучение молекул, отражающих разные звенья патогенеза заболеваний с аутоиммунным компонентом у детей Установлена зависимость продукции маркера шогпозаибелшвюспшеїшяотгьтражешоотізаб всюпалительногоггроцесса
Впервые изучены DR5 и МІР-1Р при указанных заболеваниях у детей
Впервые показана корреляционная взаимосвязь СРБ, М1Р-1|3, TNFa, СБАГ и DR5 между собой с учетом патогенеза и разработаны новые диагностические критерии заболеваний с аутоиммунным юмпоненгому детей
Практическая значимость исследования
І^імунохимическиетестьітизученньгебежи и DR5) могут быть использованы в качестве дополнительных лабораторных критериев при уточнении диагноза, оценке тяжести и прогнозе исхода заболеваний почек и легких у детей, а также при ггрофилактических обследованиях для предупреждения развития запущенньгх(|юрмзаболеваний.
Все перечисленное, в свою очередь, составит основу эшномтесюйэффектишосшисгользовагти^
Предложенные рекомендации могут найти применение в кішникг>лабораторнойпракгиге такиЛПУобщегопрофиля.
Основные положения, выносимые на защиту
1. BOO,TNFa, IL4hDR5 отражают разные звенья патогенезау детей с различными гюспалительными, в том числе с аутоиммунным шмпонентом, заболеваниями почек. БОФ, вероятно, больше связаны с непосредственными процессами изменения клеток-мишеней очага юспаления,таБа,1Ь4иВК5сучасше
2 Продукция БОФ (СРБ, МГР-ір, СБАГ) зависит от выгдаженности и характера воспалительного процесса Концентрация СРБ и MP-ip максимально возрастает при банальном воспалении - в группе ПН. Частота выявления СБАГ превалирует при ГН иТИН, что подтвфждаегформальностьеговклкнениявгрзтіпуБОФ.
З.СинтезБК5,ТЫБаиП14преобладаетвсзгучаяхз аутоиммунным и аллергическим компонентами как в группе бронхолегочных, так и нефрологических нозологии. Их максимальные значения отмечены в группе ГН и БА средней тяжести, а минимальные значения получены в группах сравнения - ПН и БР В группе ГНмежду DR5,TNFaиП14oпrJeдeлeнaдocтовфнaяпp!ЯмaяEзaимocвязь
4. Достоверное снижение продукции DR5, IL4 и TNFa при
тяжелом течении БА по сравнению с их показателями при БА средней
тяжести отражает изменения морфоч^ункционального звена и
иммунного ответа и расценивается как неблагоприятный критерий
разтжиязаболевания.
5. Мониторинговое определение всех пяти показателей
воспаления отражает на момент анализа активность определенного
патогенетического звена и его изменение под воздействием
применяемьк терапевтических методов, что положено в основу
формирования диагностических и прошостических алгоритмов
испс^гьзог^ашмиммунохимическихтестовнабелкивсюпаленияиВК5.
Личное участие автора в получении результатов исследования
Клиническое исследование с анкетированием лиц контрольной и основной групп, обработка лабораторного материала, получение тест-системы на СБАГ и постановка реакций с ее использованием, анализ, обобщение и статистическая обработка результатов проведены лично авгоромработы.
Апробацію работы
Материалы диссертации доложены на заседаниях кафедры биологической химии с курсом клинической лабораторной диагностики и конференциях ГОУ ВПО АГМА, на международных научных конференциях молодых ученых «Белки - маркеры патологических состояний» (Астрахань - Москва, 1999, 2003гг), на научно-практичес-кой конференции молодых учёных с международным участием «Современные достижения фундаментальных наук в решении актуальных проблем медицины» (Астрахань-Москва, 2004г.), на научно-практической конференции с международным участием «Достижения фундаментальных наук в решении актуальных проблем медицины» (Астрахань-Волгоград-Москва, 2006), были представлены на ХХУШ и ХХХП Meeting of the mtemauonalsoaetyforcmcodevelopmmMbiologyandmedicme(ISOBM) (Мюнхен,Германия,20ШиХельсинки,Финляндия,2004).
По теме диссертации опублиювано 10 научных статей, 2 из них в ВАК рецензируемых изданиях Оформлена заявка на изобретение.
Внедрение результатов исследования: результаты диссертации включены в учебный план кафедр биологической химии с курсом клинической лабораторной диагностики и педиатрии лечебного факультета Астраханской государственной медицинсюй академии
Структура и объем работы
Диссертация изложенана 134 страницах, состоит из введения, обзора литературы, глав «Материалы и методы исследования», «Собственные исследования», «Обсуждение полученных результатов», выводов, практических рекомендаций, списка литературы.
Иллюстративный материал представлен 24 таблицами и 26 рисунками Библиография включает в себя 170 отечественных и 114 зарубежныхавторов
Работа выполнена по плану НИР ГОУ ВПО «Астраханская государственная медицинская академия» на кафедрах биологической химии с курсом клинической лабораторной диагностики, педиатрии лечебного факультета, госпитальнойпедиатрииГОУВПОАІІУІАпри поддержке грантов ФЦП «Интеграция науки высшего образования России», 2000 - 2004 гг, а также Фонда содействия развитию малых формпредприятийвнаучнсьтехничесюйсфере,2002-2003гг
