Введение к работе
Актуальность темы.
Саркомы мягких тканей и костей составляют 12% от всех злокачественных опухолей детского возраста. Несмотря на достижения последнего десятилетия в области лечения сарком у детей, прогноз при распространенных стадиях опухолевого процесса остается неблагоприятным и общая выживаемость больных не превышает 25-30%. До сих пор остаются не изученными иммунологические факторы прогноза при солидных опухолях у детей. Особое место в этих исследованиях занимает изучение иммунной системы костного мозга. В последние годы доказано, что костный мозг играет важную роль в канцерогенезе и метастазировании. Иммунные клетки костного мозга могут выполнять защитную противоопухолевую функцию. Показано, что зрелые Т-лимфоциты костного мозга способны сдерживать в течение длительного времени развитие костномозговых метастазов из диссеминированных опухолевых клеток. Напротив, присутствие выраженной пропорции Т-регуляторных клеток (CD4+ CD25+) ассоциируется с развитием метастазов при саркоме Юинга.
Возможности использования клеток костного мозга с лечебной целью при саркомах были впервые продемонстрированы в экспериментальных работах Г.И. Дейчман и соавторов (1982). Введение суспензии клеток нормального костного мозга хомячкам с метастатическими опухолями приводило к уменьшению количества и размера легочных метастазов или к их полной редукции. Дальнейшие исследования проведены на собаках: выявлена регрессия легочных метастазов при введении клеток костного мозга животным при остеосаркоме и увеличение общей выживаемости животных. Н.Н. Трапезников и соавторы (1993) провели клиническое исследование у 24 больных остеосаркомой, которым после радикальной операции, была выполнена трансфузия суспензии клеток аллогенного костного мозга. Период наблюдения за пациентами составил 8 лет. Более чем у 50% пациентов не выявлено метастазов через 4 года наблюдения. В этих работах сделано предположение, что клетки естественной резистентности играют роль эффекторов противоопухолевого иммунитета. В последние годы открыта важная роль TCR-лимфоцитов, естественных киллерных клеток (NK-клеток), а также некоторых особых субпопуляций лимфоцитов (например, CD57+ клеток) в противоопухолевом иммунитете. Анализ этих субпопуляций в костном мозге детей с саркомами мягких тканей и костей не проводился.
В литературе встречаются лишь единичные работы по сравнительной характеристике иммунокомпетентных клеток костного мозга здоровых детей и детей с солидными опухолями. Углубленный анализ лимфоцитарных субпопуляций костного мозга при саркомах у детей представляет несомненно актуальную задачу, так как в перспективе может быть использован для разработки и совершенствования иммунотерапевтических подходов у этих больных.
Цель исследования
Целью работы является изучение клинически значимых особенностей субпопуляционного состава зрелых лимфоцитов костного мозга у детей больных рабдомиосаркомой и опухолями семейства саркомы Юинга (ОССЮ).
Задачи исследования
1. Изучение субпопуляционного состава иммунокомпетентных клеток костного мозга у детей с мелкоклеточными опухолями (рабдомиосаркома, семейство опухолей саркомы Юинга) и в группе детей, у которых в ходе комплексного обследования была исключена злокачественная опухоль, – группа сравнения.
2. Сопоставление субпопуляционного состава лимфоцитов костного мозга при рабдомиосаркоме с результатами, полученными в группе сравнения.
3. Сопоставление субпопуляционного состава лимфоцитов костного мозга при
ОССЮ с результатами, полученными в группе сравнения.
4. Сравнительная характеристика субпопуляций лимфоцитов костного мозга при рабдомиосаркоме и опухолях семейства саркомы Юинга у детей.
5. Выявление корреляций между уровнями иммунокомпетентных клеток костного мозга при рабдомиосаркоме у детей с клиническими проявлениями и известными факторами риска при этой опухоли.
6. Выявление корреляций между уровнями иммунокомпетентных клеток костного мозга при ОССЮ у детей с клиническими проявлениями и известными факторами риска.
Научная новизна
Впервые проведен анализ субпопуляций зрелых лимфоцитов костного мозга у детей больных рабдомиомаркомой, опухолями семейства саркомы Юинга, а также у детей, не имеющих онкологической патологии. Установлено, что субпопуляционный состав клеток костного мозга при рабдомиосаркоме у детей отличается от состава этих клеток у детей, не имеющих злокачественных опухолей, повышением уровней активированных Т-цитотоксических клеток (CD3+CD8+HLA-DR+), повышением процентного содержания зрелых Т-клеток, а также снижением в два раза Т-хелперных клеток (CD4+), экспрессирующих молекулу адгезии CD62L (Leu8).
В работе впервые показано, что субпопуляционный состав лимфоцитов костного мозга больных опухолями семейства саркомы Юинга отличается от такового у детей, не имеющих онкологической патологии, следующими признаками:
-повышением уровня зрелых Т-цитотоксических лимфоцитов (CD3+CD28+);
-снижением уровня зрелых Т-хелперных клеток (CD3+CD4+);
-более низкими уровнями иммунорегуляторного индекса CD4/CD8;
-повышением уровня Т-цитотоксических лимфоцитов (CD3+CD8+HLA-DR+);
-снижением общего уровня CD62L+ Т-клеток и уровня Т-хелперныхCD62L+ Т-клеток (CD3+CD4+ CD62L+);
-повышением уровня СD3+CD8+CD57+ лимфоцитов.
Уровни Т-цитотоксических лимфоцитов (CD3+CD8+) являются достоверно более высокими при саркоме Юинга в сравнении с рабдомиосаркомой, напротив, содержание TCR-лимфоцитов более высокое при рабдомиосаркоме.
Субпопуляционный состав лимфоцитов костного мозга больных рабдомиосаркомой взаимосвязан с факторами прогноза. При распространенных стадиях рабдомиосаркомы по сравнению с локализованными опухолями у детей выявлено повышение уровня CD62L-позитивных зрелых Т-лимфоцитов, снижение NK-клеток и T-лимфоцитов. При ОССЮ установлено снижение количества активированных (CD38+) Т-цитотоксических клеток и T-лимфоцитов у пациентов группы высокого риска.
Научно-практическая значимость
Выявлена диагностическая и прогностическая значимость TCR-лимфоцитов при распространенных стадиях рабдомиосаркомы и при поражении осевого скелета ОССЮ у детей, что может служить основанием для привлечения в клиническую практику стимуляторов TCR-лимфоцитов – бисфосфонатов - у пациентов с метастазами рабдомиосаркомы, а также у больных ОССЮ с поражением осевого скелета, независимо от наличия метастазов. Отмечено снижение Т-цитотоксических клеток при нарастании опухолевой массы (более 100 см3) при ОССЮ у детей. Рекомендовано исследование субпопуляций лимфоцитов костного мозга при солидных опухолях у детей с целью оценки и разработки методов иммунокоррекции.
Апробация диссертации
Диссертация апробирована на совместной научной конференции с участием поликлинического отделения, отдела общей онкологии, отдела химиотерапии гемобластозов НИИ ДОГ ФГБУ «РОНЦ им. Н.Н. Блохина» РАМН, группой гемоцитологии клинико-диагностической лаборатории централизованного клинико-лабораторного отдела, лабораторией иммунологии гемопоэза, лабораторией иммунологии опухолей НИИ КО ФГБУ «РОНЦ им. Н.Н.Блохина» РАМН 15 марта 2012.
Объем и структура диссертации
Похожие диссертации на Клиническое значение исследования субпопуляций лимфоцитов костного мозга при саркомах у детей
