Введение к работе
1.1. Актуальность темы
Известно, что сыворотка крови млекопитающих, обогащая ростовыми, адгезивными и протективными факторами питательные среды, используемыми для культивирования большинства клеточных культур, нестандартна и ее применение связано с постоянным риском контаминации клеток микоплазмами, вирусами и прионами. Получение сублиний перевиваемых клеток, способных к росту в бессывороточных средах или средах с минимальным ее содержанием, является актуальной проблемой биотехнологии.
Цереброспинальная жидкость крупного рогатого скота, имея в своем составе небольшое количество белка, особенно высокомолекулярных фракций, содержит большой набор биологически активных веществ. К ним относятся гормоны, вырабатываемые структурными образованиями головного мозга, а также синтезируемые периферическими эндокринными железами и другими субстанциями. Кроме гормонов центральной нервной системы в цереброспинальной жидкости обнаруживаются метаболиты мозга (эндорфины, энкефали-ны, либерины, простагландины, медиаторы), микро-, макроэлементы, глюкоза и другие вещества (Атанова, 1953,1955; Кассиль, 1963; Фридман, 1967,1971; Ткач с соавт., 1978;1986; Зенкин с соавт., 1995; Пильгаев, 1999; Леткин, 2000; Лабинов, 2000; Калязина, 2002; Сегесо, 1970). Цереброспинальная жидкость, в отличие от сыворотки крови животных более стабильна и консервативна по биохимическому составу. В связи с этим открываются определенные перспективы по снижению содержания сыворотки крови в ростовой среде и заменой ее цереброспинальной жидкостью в качестве ростостимулирующего компонента.
В доступной литературе встречаются лишь единичные работы (Ткач с соавт., 1985; Fedoroff, 1960) по исследованию цереброспинальной жидкости как компонента питательных сред для перевиваемых культур клеток, что в основном и предопределило наш научный и практический интерес.
1.2. Цель и задачи исследований
Целью настоящей работы явилось изучение возможности применения цереброспинальной жидкости крупного рогатого скота как компонента питательных сред, используемых в биотехнологии для культивирования клеток. Для достижения поставленной цели решались следующие конкретные задачи:
проведение сравнительной оценки состава сыворотки крови и цереброспинальной жидкости крупного рогатого скота;
получение перевиваемой линии клеток, адаптированной к росту в питательной среде с цереброспинальной жидкостью крупного рогатого скота;
проведение биохимической оценки ростовой питательной среды с цереброспинальной жидкостью;
изучение биологических характеристик перевиваемой линии клеток,
адаптированн';" к росту в питательной среде с церебрееяияазтмтой жидкостью
крупного рогатого скота; ^ национа
СПетервурГ ^л s-
СПетервурГ
ОЭ »00^«
4 оценка влияния цереброспинальной жидкости крупного рогатого скота на клонообразование перевиваемой линии клеток.
1.3. Научная новизна
Впервые изучено влияние цереброспинальной жидкости крупного рогатого скота на биологические свойства сублинии перевиваемых клеток CV-1 (ВНИИВВиМ). Новыми являются данные о биохимических параметрах ростовой питательной среды ИГЛА MEM, содержащей цереброспинальную жидкость и сыворотку крови крупного рогатого скота. Показана эффективность клонообразования перевиваемой линии клеток РК-15/В5 при добавлении в ростовую питательную среду цереброспинальной жидкости крупного рогатого скота.
1.4. Практическая значимость работы
Полученные в результате настоящих исследований данные показывают перспективность использования цереброспинальной жидкости крупного рогатого скота в биотехнологии перевиваемых линий клеток. Результаты исследований представляют интерес для специалистов, занимающихся конструированием ростовых питательных сред для культур клеток, а также разработкой ди-агностикумов и вакцинных препаратов.
Материалы настоящих исследований могут быть использованы в учебном процессе на биологическом, ветеринарном и медицинском факультетах, а также при написании учебников, учебных пособий и монографий.
