Введение к работе
-3-.
АКТУАЛЬНОСТЬ ПРОБЛЕМЫ. Первые свидетельства иммунотрофизма появились еще в 20-х годах, когда в работах Carel было показано, что периферические лейкоциты, лейкоцитарные экстракты и лейкоцитарные супернатанты способны стимулировать рост фибробластов in vitro. С тех пор было получено множество экспериментальных данных, что лимфоидная система способна не только удалять чужеродные антигены, но и контролировать развитие своих тканей. Интерес к изучению взаимодействия лимфоидной системы с эпителиальным покровом кишечника обуславливается тесной функциональной и морфологической интеграцией этих систем. Эта связь обеспечивает сохранение целостности эпителия, защиту от вирусной и бактериальной инфекции (Lycke М., Holmgren J., 1986; James S.P., 1985), способствует индукции толерантности к пищевым антигенам (Stephen Н., et al., 1990; Mowat А.М.,1987). Однако в ответ на антигенную стимуляцию Т-клетки выделяют и энтеро-патогенные лимфокины, которые не только координируют иммунные функции, но также изменяют нормальную физиологию слизистой кишечника, включая клеточное обновление эпителия (Mowat AM., et al., 1983). На основании имеющихся к настоящему времени данных можно заключить, что "иммунотрофическая" или "морфогене-тическая" способность лимфоцитов является их изначальным свойством.
В работах Апарович Г.Г. и Труфакина В.А. показано уменьшение митотическо-го индекса и числа клоногенных клеток кишечника после внутривенного введения ти-моцитов у голодающих мышей. В то же время, введение тимоцитов вызывало усиление дистрофических изменений слизистой кишечника. Антитимоцитарная сыворотка снижала количество клоногенных клеток и, наоборот, сыворотка против общей популяции лимфоцитов увеличивала количество клоногенных клеток и снижала количество энтероцитов в митозе (Апарович Г.Г. и Труфакина ВА, 1982; 1984). В работе Шмакова А.Н. (Шмаков А.Н. 1987) выявлено, что тимоциты ингибировали митотичес-кую активность эпителия тонкой кишки и увеличивали время общего обновления эпителия кишечника; Т-клетки вызывали локальное снижение индекса метки в крип-тальной колонке; тимэктомия приводила к уменьшению количества быстро проли-ферирующих энтероцитов; введение тимэктомированным животным спленоцитов вызвало увеличение синтеза ДНК в эпителии средней зоны крипты, а введение тимоцитов повышало пролиферативную активности эпителия. Однако не было проведено изучения этих взаимоотношений в условиях культивирования in vitro, когда многообразие воздействий на систему эпителий - лимфоцит было бы ограничено до
минимума Это позволило бы локализовать активные факторы иммунной системы для выяснения причинно - следственных связей лимфоэпителиальных взаимоотношений.
Учитывая вышеизложенное, целью настоящей работы было изучение морфо-функциональных особенностей эксплантатов кишечника мыши в условиях органного культивирования in vitro совместно с лимфоцитами. Для достижения данной цели были поставлены следующие задачи:
-
Установить сроки адаптации и оптимальную продолжительность органного культивирования эксплантата тонкой кишки мыши in vitro.
-
Изучить изменение пролиферации и структуры слизистой оболочки эксплантатов кишечника мыши при совместном органном культивировании in vitro с различными популяциями нэактивированных лимфоцитов.
-
Изучить изменение пролиферации и структуры слизистой оболочки эксплантатов кишечника мыши при совместном органном культивировании in vitro с лимфоцитами, у которых блокирован синтез ДНК, РНК, белка.
-
Изучить изменение пролиферации и структуры слизистой оболочки эксплантатов кишечника мыши при совместном ерганном культивировании in vitro с лимфоцитами, обработанными Т-гхтигином.
-
Изучить изменение пролиферации и структуры слизистой оболочки кишечника мышей при парентеральном введении Т-активина.
НАУЧНАЯ И ПРАКТИЧЕСКАЯ ЦЕННОСТЬ РАБОТЫ. Впервые описаны изменения биосинтеза ДНК в эпителии и морфология эксплантатов тонкой кишки мыши, под влиянием лимфоцитов в условиях органного культивирования тонкой кишки in vitro. Полученные данные расширяют представление о функции иммунокомпетент-ных клеток, влияющих на пролиферацию и диффоренцировку нелимфоидных клеток, в частности, клеток эпителия тонкой кишки. Показано, что Т-активин способен модулировать влияние лимфоидных клеток на включение 3Н-тимидина эксплантатами тонкой кишки мыши in vitro. Применение Т-активина in vivo выявило, что он нормализует измененную голоданием пролиферацию эпителия тонкой кишки. Это позволяет рассматривать Т-активин, как препарат, нормализующий физиологические процессы в эпителии желудочно - кишечного тракта.
ОСНОВНЫЕ ПОЛОЖЕНИЯ, ВЫНОСИМЫЕ НА ЗАЩИТУ. 1. Зрелые лимфоидные клетки уменьшают включение 3Н-тимидина в эксплантаты тонкой кишки мыши при их совместном культивировании in vitro.
2. Т-активин является модулятором эффектов лимфоцитов на включение 'Н-тики-
дина эксплантатами тонкой кишки мыши при совместном культивировании эксплантатов и лимфоцитов in vitro.
АПРОБАЦИЯ. Полученные результаты доложены и обсуждены на заседании кафедры гистологии и эмбриологии Новосибирского медицинского института 24 января 1996 года.
ПУБЛИКАЦИИ. По теме диссертации опубликогано 9 печатных работ.
ОБЪЕМ И СТРУКТУРА ДИССЕРТАЦИИ. Диссертация изложена ка 175 страницах. Состоит из следующих разделов: введения, обзора литературы (3 главы), собстзенных данных (4 главы), обсуждения, выводов, раздела "Внедрение в практику". Иллюстрирована 24 фотографиями и 29 графиками. Список литературы включает 31 отечественный и 176 иностранных источников. Весь материал, представленный в диссертации, получен, обработан и проанализирован лично азтором. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.
