Введение к работе
Актуальность.
Бешенство остается актуальной проблемой в глобальном смысле, являясь одной из самых опасных болезней человека и животных.
В настоящее время многие страны Европы смогли значительно улучшить эпизоотическую ситуацию по бешенству и даже полностью искоренить данную болезнь на своих территориях, в чем не малую роль играла планомерно организованная работа по проведению кампаний оральной вакцинации диких плотоядных.
Не смотря на то, что в мире существует немало коммерческих анитрабических вакцин для оральной иммунизации, по-прежнему существуют сомнения в их безопасности, а порой и эффективности, и, как результат, продолжается поиск и разработка новых более совершенных по этим показателям препаратов. Так эксперты ВОЗ постоянно указывают на необходимость совершенствования имеющихся и разработки новых более безопасных антирабических препаратов.
В России в настоящее время применяются оральные антирабические вакцины, изготовленные с применением аттенуированных штаммов вируса бешенства ТС-80 и РВ-97. Данные штаммы имеют остаточную вирулентность для некоторых видов млекопитающих и теоретически могут представлять опасность, особенно при неправильном их применении в природе в больших количествах.
Многообещающим, на наш взгляд, является применение штаммов нового поколения, таких как рекомбинантные и генетически модифицированные. Данные штаммы не способны вызывать заболевание бешенством ввиду отсутствия генетической информации, необходимой для репродукции вирионов, либо по причине искусственно произведенных изменений в структуре вирусной РНК, в результате которых утрачивается вирулентность для животных. Поэтому для нас представляло особый интерес изучение иммунобиологических свойств штамма «ERA G333» полученного Др. Руппрехтом и Др. Ву в Центре по контролю болезней, Атланта, США (CDC) методом обратной генетики путем замены аргинина на глютаминовую кислоту в позиции 333 эктодомена гликопротеина исходного штамма ERA (Evelyn-Rokitincky-Abelseth) вируса бешенства.
Цель и задачи исследований. Основной целью работы являлось изучение иммунобиологических свойств генетически модифицированного штамма ERA G333 вируса бешенства с целью его дальнейшего использования при производстве оральной антирабической вакцины.
Для достижения поставленной цели необходимо было решить следующие задачи:
-
Изучить чувствительность различных культур клеток при репродукции штамма ERA G333;
-
Определить оптимальные параметры культивирования штамма ERA G333 в монослое и суспензии клеток;
-
Определить степень патогенности штамма ERA G333 для различных видов животных;
-
Изучить генетическую стабильность штамма ERA G333;
-
Изучить антигенные и иммуногенные свойства штамма ERA G333;
-
Определить термостабильность штамма ERA G333.
Научная новизна работы. Научная новизна состоит в том, что в результате проведенных исследований:
Отработаны оптимальные параметры промышленного культивирования штамма ERA G333 в монослое и суспензии клеток;
Изучена патогенность штамма ERA G333 для различных видов животных;
Изучена генетическая стабильность штамма ERA G333;
Изучены антигенные и иммуногенные свойства штамма ERA G333;
Изучена термостабильность штамма ERA G333.
Практическая значимость работы. Показана высокая иммуногенность и безвредность штамма ERA G333 для лабораторных, домашних и диких животных.
Полученные результаты проведенных исследований использованы при разработке следующих нормативно-технических документов:
«Методические указания по освежению, консервированию и хранению штамма ERA G333 вируса бешенства»
Апробация работы. Результаты основных исследований доложены и обсуждены на заседании технологической методической комиссии ОАО «Покровский завод биопрепаратов» в 2010 г., подтверждены комиссионно (акт от 15.04.2008 г.). Результаты, полученные в ходе подготовки диссертации доложены и опубликованы в материалах научных конференций: THE XVI INTERNATIONAL CONFERENCE ON RABIES IN THE AMERICAS, RITA, 2005 Ottawa, Canada; THE XVII INTERNATIONAL CONFERENCE ON RABIES IN THE AMERICAS, RITA, 2006 Brasilia, Brazil; Towards the Elimination of Rabies in Eurasia Joint OIE/WHO/EU International Conference, Paris, May 2007; THE XIX INTERNATIONAL CONFERENCE ON RABIES IN THE AMERICAS, RITA, 2008 Atlanta, USA, Centers for Disease Control and Prevention.
Личный вклад соискателя. Экспериментальные исследования и обобщение результатов по теме диссертации выполнены автором самостоятельно.
Благодарности. Автор выражает благодарность за помощь в выполнении отдельных фрагментов диссертации сотрудникам ФГУП «Щелковский биокомбинат»: И.Ю. Литенковой, М.Ю. Кожушко, Е.В. Маслову.
Основные положения, выносимые на защиту:
иммунобиологические свойства (безвредность, антигенность, иммуногенность, термостабильность) штамма ERA G333 вируса бешенства.
Структура и объем диссертации.
