Введение к работе
1. Актуальность темы. Реовирусный теносиновит птиц - контагиозное заболевание, характеризующееся хромотой, связанной с воспалением сухожилий и суставов конечностей, высокой ранней смертностью, замедленным ростом, снижением яйценоскости и выводимости цыплят. Оно зарегистрировано во многих странах мира, включая Австрию, Аргентину, Бразилию, Францию, Нидерланды, Великобританию. Исследования, проводимые во ВНИВИП и ВНИИЗЖ за период 1990-1998 г., свидетельствуют о широком распространении реовирусных заболевании среди птиц в хозяйствах РФ.
Экономические потери в промышленном птицеводстве значительны и связаны с гибелью птицы (до 6%), повышенной выбраковкой (до 50%), низкими приростами живой массы, снижением категорийности мяса, уменьшением яйценоскости на 6-20%, увеличением риска возникновения других инфекций (Jones R.C.et.al.1989, Meanger J. et.al., 1997). В племенных хозяйствах отмечают снижение половой активности петухов, что является причиной уменьшения оплодотворяемости и выводимости инкубационных яиц (van der Heide L, 1975). Кроме того, реовирус обладает иммунодепрессивным действием, что приводит к увеличению восприимчивости к инфекциям. Реовирусный теносиновит провоцирует и обостряет основное заболевание, обуславливая в дальнейшем его скрытое течение без явных клинических признаков. У переболевшей птицы отмечают авитаминоз, замедленный рост, плохое оперение, искривление костей и аномалии скелета, остеопороз, повышенную раннюю смертность, атрофию бурсы, снижение уровня расплода, иммунодепрессию (Монтиэль Э., 1999).
Общие ветеринарно-санитарные мероприятия не обеспечивают в полной мере оздоровления птицеводческих хозяйств от реовирусного теносиновита. В Российской Федерации основным способом борьбы с данной инфекцией является выбраковка и убой пораженной птицы, что в условиях промышленного птицеводства является нецелесообразным.
В странах с развитым птицеводством широко применяются как живые, так и инактивированные вакцины. Однако в нашей стране такие вакцины отсутствовали. В с^язи с появлением в России в 90-х гг. очагов заболевания,
возникла необходимость в создании отечественных препаратов для
специфической профилактики реовирусного заболевания.
Цель и задачи исследований. Целью работы является разработка
технологии изготовления живой вакцины против реовирусного теносиновита
кур.
Для достижения поставленной цели необходимо было решить
следующие задачи:
—отработать—оптимальные условия культивирования штамма S1133
реовирусного теносиновита (изучить влияние питательных сред, сывороток, рН
поддерживающей среды, дозы заражения, времени культивирования, возраста
культуры, посевной концентрации клеток);
определить оптимальный состав защитной среды для живой вакцины против реовирусного теносиновита при лиофилизации;
изучить стабильность лабораторных образцов вакцины в процессе хранения при разных температурных режимах;
подобрать оптимальный разбавитель лиофилизированных препаратов;
изучить иммуногенные свойства и эффективность живой вакцины против реовирусного теносиновита из штамма S1133 в лабораторных и промышленных условиях;
разработать нормативно-техническую документацию на живую вакцину против реовирусного теносиновита птиц.
Научная новизна. Впервые в России разработаны и обоснованы технологические параметры получения отечественной живой вакцины против реовирусного теносиновита птиц из штамма S1133.
Отработаны оптимальные параметры культивирования реовируса штамма S1133 на культуре ФЭК, обеспечивающие получение высокоактивной суспензии с титром не менее 8,0 ІдТЦД5о/мл.
Отработан режим лиофилизации и подобрана защитная среда.
Изучена стабильность иммунобиологических свойств вакцины в процессе хранения при различных температурах.
Изучена динамика формирования иммунитета после одно- и двукратной вакцинации.
Изучена иммуногенная активность живой вакцины против реовирусного теносиновита в лабораторных условиях и установлена высокая противоэпизоотическая эффективность в производственных условиях.
Практическая значимость работы. Разработана промышленная технология изготовления живой вакцины против реовирусного теоносиновита кур из штамма S1133, на основе которой осуществляется промышленное производство вакцины во ВНИИЗЖ.
Разработана нормативно-техническая документация на изготовление, контроль и применение вакцины, одобренная ученым советом ВНИИЗЖ и утвержденная Департаментом ветеринарии Минсельхоза РФ на постоянный срок действия, включающая в себя:
Промышленный регламент на производство вакцины против реовирусного
теносиновита птиц живой сухой.
Технические условия (ТУ) на вакцину против реовирусного теносиновита кур живую сухую 9384-043-00495527-00.
Наставление по применению вакцины живой сухой против реовирусного теносиновита птиц.
Основные положения, выносимые на защиту:
обоснование параметров получения и применения отечественной вакцины против реовирусного теносиновита (выбор культуры, параметры культивирования, состав защитной среды, разбавитель лиофилизированных препаратов);
иммуногенная активность живой вакцины против реовирусного теносиновита птиц в лабораторных условиях;
сохраняемость иммунобиологических свойств живой вакцины в процессе хранения при различных температурных режимах;
технологический регламент изготовления и контроля живой вакцины;
иммуногенная активность живой вакцины в производственных условиях.
Апробация работы. Основные положения диссертации доложены на
конференции "Научные основы производства ветеринарных биологических препаратов" (Щелково, 2000г.),'на конференции "Молодых ученых" (ВНИИЗЖ, 2000г.), на заседаниях ученого совета ВНИИЗЖ в 1997-2000гг.
Публикации научных исследований. По теме диссертации опубликовано 9 научных работ.
Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 113 листах машинописного текста и включает: введение, обзор литературы, результаты собственных исследований, обсуждение результатов, выводы, практические предложения и список использованной литературы (190 источников, в т.ч. 170 иностранных). Работа иллюстрирована 18 таблицами, 6 рисунками.
