Введение к работе
1.1. Актуальность темы. Интенсификация животноводства невозможна без полноценного кормления животных. В связи с этим в последние годы значительно возросло использование а растениеводстве и кормопроизводстве минеральных удобрений, особенно азотсодержащих. По данным Ракнтова Н. Г. (1974), азотные соединения, внесенные в почву, создают предпосылки для увеличения концентрации сырого іпротеїта в кормах, и в то же время это сопровождается накоплением нитратов н их восстановленной формы — нитритов в почве, воде, продукции растениеводства, а в конечном итоге в организме животных и человека.
Вопрос об изучении влияния нитратов на организм животных стоит сегодня особо остро, так как установлено их многогранное отрицательное влияние на живые биологические объекты. Так, 'по данным Н. И. Петухова с соавт. (1972), Д. М. Вовк (1977) и др., под влиянием нитратов гемоглобин переходит в метгемоглобіні, что сопровождается нарушением окислительной способности крови и приводит к кислородному голоданию тканей организма. При эгом нарушаются обменные процессы (Н. Ф. Панько, 1986; Д. ЛІ Вовк с соавт., 1989; В. Н. Байматов, 1991, и др.) и угнетаются ферментные системы (Л. Я. Лейтис с соавт., 1969; 3. П. Скородинжип с соавт., 1979; С. В. Старченков с соавт., 1989; Л. А. Ефимов с соавт.. 1990).
Способность нитратов обусловливать развитие вторичных иммунодефицитных состояний в настоящее время изучена недостаточно. Однако в литературе имеются данные о неблагоприятном воздействии этих веществ на общую резистентность и устойчивость макроорганизмов к инфекционному началу. В. Т. Митченков (1972) отмечает изменение фагоцитарной реакции нейтрофилов и количества пропердина крови у белых крыс при скармливании нитрита натрия. Отрицательное воздействие нитратов на иммунную систему животных подтверждается исследованиями П. М. Дарьенко с соавт. (1980), И. М.
Карпуть с соавт. (1989), А. С. Козлюк с соавт. (1989), В. Т. Діигченкова (1990).
В то же время, как показывает практика, корма, содержащие незначительные количества нитратов, используются в животноводстве без учета последствий их длительного скармливания, хотя на кумулятивные свойства этих веществ указывают многие авторы (П. іМ. Дарьенко с соавт., 1980; И. М. Карпуть с соавт., 1989; В. А. Боев, 1991, и др.). В результате многие ветеринарные специалисты склонны 'рассматривать прорывы поствакцинадьного иммунитета у животных как _следствие. плохого-качества биопрепаратов или погрешностей "при 'Проведении иммунизации. Обращают на себя внимание факты прорыва (противорожисгого иммунитета у животных, содержащихся в сшецхозах, несмотря на широкое проведение вакцинальной профилактики. При этом вспышки рожи в отдельных хозяйствах регистрируют через 2—3 месяца после проведенной иммунизации. В данных случаях качество используемых вакцин не вызывает сомнения.
Учитывая приведенные сообщения, остро встает вопрос о необходимости более глубокого изучения влияния предельно допустимых доз нитратов на формирование тюствакцинально-го тротиворожисгого иммунитета.
1.2. Цель и задачи исследования. В нашей работе стави
лась цель изучить роль ПДД нитрата калия в формировании
поствакцинального противорожисгого иммунитета у лабора
торных животных и поросят.
Для решения этого вопроса поставлены следующие задали:
1. Изучить влияние ПДД нитрата калия на морфологию пммунокомпетентных органов у интактных и вакцинированных против рожи лабораторных животных и свиней. і 2. Изучить влияние нитратов на состояние клеточных и гуморальных факторов защиты животных при вакцинальной профилактике рожи.
-
Определить в эксперименте особенности расселения вакцинного и патогенного штаммов возбудителя рожи свиней на фоне .поступления в организм животных ПДД нитратов.
-
Определить напряженность и шродолжителыность пост-вакцинального цротиворожистого иммунитета у свиней на фоне скармливания ПДД нитрата калия при экспериментальном заражении.
1.3. Научная новизна. Изучено влияние ПДД цитрата ка
лия на морфологию пммунокомпетентных органов белых мы-
шей и поросят. Экспериментально доказано отрицательное воздействие длительного скармливания ПДД нитрата калия на .характер иммунологической перестройки у мышеи при введении депонированной вакцины против рожи свиней. Установлено иимунодепрессшзное действие длительного скармливания ПДД нитрата калия при формировании протпворожи-стого иммунитета у поросят, привитых депонированной вакциной против рожи свиней.
1.4. Практическая ценность работы. Полученные данные
расширяют имеющиеся сведения о влиянии нитратов на жи
вые объекты. Выявлены закономерности угнетающего дейст
вия длительного поступления в организм ПДД нитрата калия
на формирование поетвакциналышго противорожнетого им
мунитета. Предложено учитывать содержание ПДД нитратов
в кормах животных при проведении плановых профилактиче
ских прививок свшюлоголовья против рожи.
-
Апробация работы. Материалы работы доложены на научных конференциях молодым ученых «Новые методы диагностики, способы 'профилактики и лечения незаразных болезней животных» (Воронеж, 1990) н конференции 'Профессорско-преподавательского состава и аспирантов ветеринарного факультета Воронежского государственного аграрного университета им. К. Д. Глинки в 1992 г.
-
Публикация результатов исследований. Основные положения диссертации опубликованы в 4 научных статьях.
-
Объем работы. Диссертация изложена на 147 страницах машинописного текста и состоит из введения, краткого обзора литературы, результатов собственных исследований, обсуждения'полученных данных, выводов и предложений. Работа содержит 5 таблиц и иллюстрирована 34 рисунками. Описок литературы включает 213 наименований, из них 47 иностранных авторов.
Работа выполнена в период с 1989 по 1992 г. в лаборатории кафедры эпизоотологии и микробиологии Воронежского государственного аграрного университета им. К- Д. Глинки и в колхозе «Знамя коммунизма» Новоусманского района Воронежской области.
Экспериментальная часть работы проведена на 452 белых мышах и 42 'Поросятах в возрасте от 1,5 до 5 месяцев.
В процессе работы были использованы методы: эпизоого-логнческий, токсикологический, бактериологический, клинический, патологоанатомический, гистологический, гистоиммуно-логическнй, серологический.
Для іпроведения опытов использовали:
-
Химически чистый нитрат калия, ГОСТ 4217—65.
-
Депонированную вакцину против рожи свиней Гожуль-ской биофабрики серий 68 и 71.
-
Вакцинный из матрикса Конева и вирулентный 1329 штаммы бактерий рожи, полученные из ВГНКИ ветеринарных препаратов. _ . ... -. — --
Прививку мышей проводили подкожно смывом 24-часовой агаровой культуры бактерий рожи вакцинного штамма в дозе 100 тыс. микробных клеток (в объеме 0,2 мл). Депонированную противорожнстую вакцину для свиней применяли двукратно с интервалом между инъекциями 12 дней в дозах при первой прививке — 0,3 мл, при второй — 0,5 мл.
Нитрат калия мыши получали в дозе 14 мг на животное в сутки, поросята — 100 мг на голову в сутки с кормами.
Заражение мышей осуществляли подкожно шатогенным штаммом 1329 ВГНКИ возбудителя рожи свиней в дозе 50 тыс. микробных «леток (а объеме 0,2 мл), а свиней — вну-трикожно в дозах от 25 тыс. до 2,5 млн. микробных клеток (їв объеме 0,1 мл) по методу В. В. Тилга (1960).
Паренхиматозные органы у мышей отбирали после умерщвления путем обескровливания, лимфатические узлы у свиней — экетирпировали. Образцы крови от свиней получали путем ампутации кончика хвоста.
Для выявления поствакцинальных противорожнстых антител в сыворотке крови использовали «пробу роста».
Бактериологическое исследование осуществляли путем посева патологического материала на МПБ и МПА.
Степень бактериальной обсемененности органов изучали при (помощи РИФ с применением сухих рожистых люминесци-рующих сывороток.
Морфологические изменения органов изучали после фиксации материала в 10% нейтральном формалине с последующей заливкой в 'парафин. Гнстосрезы окрашивали гематоксилин-эозином. Для выявления жиров срезы готовили на замораживающем микротоме и окрашивали Суданом III и су-даном IV.
При определении общей плазмоцитарной реакции материал фиксировали по Карнуа с последующей заливкой в пара-
фин. Гистоерезы окрашивали азур II-эозииом по Романовскому. Учет клеток плазмоцигарного ряда проводили по методике О. Л. Симаковой и Д. Д. Бутьянова с соавт. (1970), пользуясь при этом номенклатурой, принятой в 1960 году па Парижском конгрессе (Л. Fagraus, 1960) и дополненной М. П. Покровской с соапг. (1965).
Определение ангителосиптезпрующих клеток проводили прямым методом, а антигенсодержащих клеток — по непрямому методу Кунса (Л. X. Куне, 1971) в реакции иммуно-флюорееценции.
