Содержание к диссертации
Стр.
ВВЕДЕНИЕ 4
Глава I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 8
1.1. Краткий исторический очерк циркуляции
эпидемических вирусов гриппа А 8
1.2. Возможное значение вирусов гриппа птиц
в формировании эпидемических вариантов с
новой антигенной формулой 14
1.3. Биологические свойства вирусов гриппа
человека и птиц 28
СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
Глава 2. МАТЕШЛЫ И МЕТОДЫ 35
Экологическая характеристика мест сбора материала от диких птиц и общие данные о собранном материале для вирусологического исследования 35
Характеристика серологического материала.. 48
Методы выделения и идентификации
вирусов 49
Методы серологических исследований 50
Методы освобождения сывороток от яеспеци-фических ингибиторов 52
Метода изучения биологических и антигенных свойств вирусов птичьего и человеческого происхождения. 54
Методы изучения антигенных взаимосвязей вирусов гриппа птиц и человека 57
Статистическая обработка результатов..... 57
Глава 3. ЭПИДЕМИЧЕСКИЙ НАДЗОР ЗА ГРИППОМ В КАЗАХСКОЙ
ССР В ПЕРИОД I977-I98I гг 60
Глава 4. ИЗОЛЯЦИЯ ШТАММОВ ВИРУСА ГЙШПА А ОТ ДИКИХ
ПТИЦ В КАЗАХСКОЙ ССР 71
Стр.
Выделение и идентификация штаммов вируса гриппа 71
Идентификация штаммов, полученных в результате экспериментального заражения... 85
Глава 5. СЕРОЛОГИЧЕСКИЕ ДОКАЗАТЕЛЬСТВА ЦИРКУЛЯЦИИ
ВИРУСОВ ПИША А(НШ1) СРЕДИ ДИКИХ ПТИЦ ЮЖНОГО
И ЮГО-ВОСТОЧНОГО КАЗАХСТАНА 88
Глава 6. ШОЛОГИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА ВИНУ СОВ ГВШПА А(НШ)
И А(Н1ОД5), ВЫДЕЛЕННЫХ ОТ ДИКИХ ПТИЦ Г05
6.1. Характеристика штаммов вируса гриппа
А(Н1Н1) 105
Антигенная характеристика гемагглютинина вирусов гриппа A(hifi) П6
Характеристика штаммов вируса гриппа А(Н1ОТ5) 123
Получение вирусов-рекомбинантов и изучение
их биологических свойств 131
ОБСУЖДЕНИЕ 136
ВЫВОШ 145
ЛИТЕРАТУРА 147
Введение к работе
Актуальность проблемы. Грипп является одной из ведущих нозологических форм инфекционных заболеваний человека, причиняющих значительный вред здоровью населения и огромный экономический ущерб народному хозяйству. Эпидемии гриппа систематически повторяются через каждые 2-3 года, а примерно раз в 10-15 лет перерастают в пандемии, во время которых перебо-левают до четверти населения земного шара. Механизм этого явления в значительной степени остается невыясненным. По мнению А.А.Смо-родинцева (1969, 1975), В.Д.Белякова (1979), эпидемические штаммы вируса гриппа А резервируются в человеческой популяции путем непрерывной ограниченной циркуляции или длительного скрытного пер-систирования и периодически возвращаются к активной форме, приобретая возможность эпидемического распространения. Согласно другой концепции, получившей в последнее время наибольшее признание, эпидемические штаммы появляются в результате рекомбинации при участии генофонда вирусов гриппа млекопитающих и птиц, широко циркулирующих в природе в составе соответствующих вирусов-рекомбинан-тов (ЖданоЕ и др.,1978; Львов, 1979, 1982).
Рядом исследователей высказано предположение о существовании природных резервуаров вируса гриппа среди многих видов млекопитающих И ПТИЦ (Webster, 1972; Schild, 1978; Schortridge, Webster, 1979; Schortrdge, 1980 ). Следовательно, чрезвычайно важным является проведение постоянного вирусологического и серологического надзора над распространением вирусов гриппа среди людей, млекопитающих и птиц, обитающих в различных физико-географических районах земного шара.
В настоящее время известно, что все новые варианты эпидемических вирусов гриппа возникают в странах Юго-Восточной Азии
- 5 -(Китай, Гонконг, Сингапур, Австралия и др.). В 1977 г. в Китае после 20-летнего отсутствия среди людей вновь было отмечено появление вируса A(H1N1), в последующем подучившего широкое распространение в различных странах и континентах мира. Е СССР эпидемия гриппа A(H1N1), начавшись в Хабаровске, уже через две недели охватила многие города Казахстана и Средней Азии. Раннее появление эпидемии в этих районах дало основание предполагать,что Казахстан и Средняя Азия явились вторым самостоятельным очагом, из которого началось распространение эпидемии по стране (Карпухин и др.,1978, 1979; Иванников, Исмагулов, 1983). Казахстан располагается в южной части СССР, через ее территорию проходят пути массовых миграций птиц из стран Юго-Восточной Азии в Сибирь и европейскую часть СССР. В связи с этим изучение циркуляции вирусов гриппа среди населения и диких птиц в условиях Казахстана является весьма актуальной задачей.
Цель и задачи работы. Учитывая изложенное выше, цель данной работы заключалась в комплексном изучении циркуляции вирусов гриппа А среди людей и в популяции диких птиц южного и юго-восточного Казахстана. Исхода из этого, были поставлены следующие задачи:
провести анализ заболеваемости гриппом и острыми респираторными вирусными инфекциями среди населения г.Алма-Аты, Алма-Атинской, Талды-Курганской и Джамбулской областей;
выделить вирусы гриппа А от людей, диких птиц и определить типовую принадлежность изолированных штаммов;
изучить в сравнительном аспекте биологические свойства вирусов гриппа птичьего и человеческого происхождений;
получить серологические доказательства циркуляции вирусов гриппа А среди людей и в популяции диких птиц;
- получить экспериментальным путем рекомбинанты вирусов
гриппа человека и птиц и изучить их биологические свойства.
Научная новизна
впервые в СССР от диких птиц в течение одного сезона на одной и той же территории выделены вирусы гриппа с антигенными формулами AfalOU5 ) И A(H1N1);
установлено, что по ряду биологических свойств и антигенным характеристикам вирусы A(H1N1) птичьего происхождения близкородственны эпидемическим вирусам гриппа 1977-1978 и 1950 гг. выделений и существенно отличаются от вирусов, циркулировавших в 1956 г.;
впервые в экспериментальных условиях путем межвидовой рекомбинации вирусов гриппа человека и птиц получены рекомбинанты с антигенной формулой А(нюиі).
Практическая ценность работы
вирусы гриппа серотипа А(нш), изолированные от диких птиц, использованы в учреждениях АН СССР и АМН СССР при изучении возможности персистенции генов эпидемических вирусов в природных популяциях, а также при получении клеточных гибридом, продуцирующих моноклональные антитела к поверхностным и внутренним компонентам вириона вируса гриппа;
штамм А/озерная чайка/Казахстая/470/79 (H1N1) депонирован в Государственную коллекцию вирусов Института вирусологии им, Д.И.Ивановского АМН СССР для использования его в качестве гриппозного диагностикума. Номер депозита - 1816.
штамм А/травник/Казахстан/760/79 использован при моделировании процессов рекомбинации вирусов гриппа человека и птиц;
высокорепродударующиеся рекомбинанты могут применяться для изучения молекулярно-биологичеоких основ антигенной изменчи-
вости и для идентификации вирусов гриппа, выделенных из природных биоценозов.
Основные положения, выносимые на защиту.
Эпидемические актуальные вирусы гриппа А(нш ) интродупи-руются в популяции диких птиц и одновременно циркулируют среди водно-околоводных, синантропяых видов птиц и населения Южного и Юго-Восточного Казахстана.
По антигенной структуре ГА и НА и важнейшим биологическим свойствам штаммы вируса А(НШ), выделенные от диких птиц, проявляли близкое родство с человеческими вариантами вируса гриппа 1950 и 1977-1978 гг. и существенно отличались от вирусов, циркулировавших в 1956 г.
Апробация работы. Материалы работы были доложены на Советско-Американском симпозиуме по гриппу и ОРЗ (Алма-Ата, 1980), на Ш съезде гигиенистов, эпидемиологов, микробиологов и инфекционистов Казахстана (Алма-Ата, 1980), на научной конференции молодых вирусологов г.Алма-Аты (1981), на научной конференции, посвященной 25-летию Института микробиологии и вирусологии АН КазССР (1982), на I конференции вирусологов Казахстана, посвященной памяти Х.Ж.Жуматова (Алма-Ата, 1982), на научной конференции отделов респираторных вирусов и экологии вирусов Института вирусологии им. Д.И.Ивановского (Москва, 1983).
Публикация работ. По материалам диссертации опубликовано 16 работ.
Структура и объем диссертации, диссертация состоит из введения, 6 глав, обсуждения и выводов. Работа изложена на 182 страницах машинописного текста, иллюстрирована 29 таблицами, 8 рисунками и 5 фотографиями.
Указатель литературы содержит 324 источника, из них 147 -иностранных.
