Введение к работе
Актуальность проблемы. Изучение структуры активного центра РНК-полимеразы - ключевого фермента в процессе реализации генетической информации - является важной задачей биоорганической химии. Тем не менее, информация о топографии комплекса РНК-полимеразы с промотором к настоящему времени получена лишь на субьединичном уровне. Следовательно, разработка методов более детального изучения структуры этого комплекса является актуальной задачей.
Цель работы заключалась в изучении функциональной топографии РНК-полимеразы E.ooli методом высокоселективного аффинного мечения при помощи реакционноспособных производных оли-гонуклеотидов-затравок.
Научная новизна. В работе проведено аффинное мечение РНК-полимеразы E.ooli различными произзодшши олигонуклеоти-дов-затравок. Установлена природа модифицированных аминокислот. Предложена модель "коридора выхода продукта" РНК-полимеразы. Предложен механизм процесса отщепления а-субъединицы от минимального фермента.
Практическая ценность. Получена информация о структуре активного центра РНК-полимеразы - одного из ввжнейших ферментов матричного биосинтеза.
Публикации и апробация работы. По материалам диссертации опубликовано 5 статей. Результаты работы докладывались на vffl-ом Советско-Французском симпозиуме по молекулярной биологии, Москва, І98Є г., и на xvffl конференции Ф2Б0, Любляна, 1987 г.
Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 98 страницах машинописного текста, содержит 6 таблиц, 19 рисунков и фотографий, состоит из введения, обзора литературы, результатов и обсуждения, экспериментальной части, выводов и списка литературы (98 ссылок).
