Введение к работе
Актуальность проблемы. Ферментативный метод образования гтидных связей имеет ряд преимуществ перед химическими: :рео- и региоселектиЕНость, возможность введения в реакции шокислот и пептидов с незащищенными боковыми функциональными тагами, проведение реакций в мягких условиях, легкость выделения >дуктов. Использование протеиназ в качестве катализаторов синтеза ітидов позволяет получать физиологически активные соединения, а [же различные субстраты, применяющиеся при исследовании логических объектов. Более глубокое понимание процессов, исходящих при конденсации пептидов под действием неолитических ферментов и изучение поведения ферментов в ходе ттеза весьма актуально, так как способствует расширению іможностей данного метода. С другой стороны, использование зтеиназ в пептидном синтезе открывает новые перспективы для гчения свойств самих ферментов.
Целью данной работы является развитие ферментативного пептидного ітеза под действием пепсина в водных растворах органических ;творителей, в органических растворителях с малым содержанием И и в системах, содержащих денатурирующие агенты - мочевину, фохлорид гуанидина и додецилсульфат натрия. В нашу задачу >дило изучение некоторых закономерностей процессов конденсации, >текаюших с участием этого фермента.
Научная новизна и практическая ценность работы. В зро-органической среде синтезирована серия пептидов с хорошими содами. Изучено поведение пепсина в реакциях конденсации пептидов таких условиях и показано, что при использовании больших ничеств фермента происходит его соосаждение в ходе реакции с разущимся осадком продукта. Показана возможность применения
.'.' ~.*h, распределенного на поверхности неорганического носителя, качестве катализатора образования пептидной связи з органически растворителях, и в зтих условиях получен ряд пептидов различно, длины. Исследована возможность применения пепсина в синтез, гидрофобных октз- и декапептидов з концентрированных раствора мочевины. Показана возможность синтеза пептидов з присутстви других денатурирующих агентов - гидрохлорида гуанидинз з додецилсульфата натрия.
Публикация и апробация работы. Материалы исследования по тем диссертации опубликованы в 6 статьях, а также были представлены н VII Всесоюзном симпозиуме по инженерной энзимологии (Москва, 1S91) Международной конференции "Протеиназы в пептидном синтезе (Богензее, 1991) и ш Симпозиуме по химии протеолитическр ферментов (Москва, 1993).
Структура и объем работы. Диссертация состоит ' из введения обзора литературы, посвященного специфичности пепсина в реакции гидролиза и синтеза пептидных связей, обсуждения результатов экспериментальной части, выводов и списка цитируемой литератур ( ссылки), диссертация содержит 29рисунков и 32 таблицы.
