Введение к работе
Актуальность проблемы. Условно-патогенный микроб РзешЗтопаз aeruginosa является возбудителем тяжелых гнойно-септических осложнений у больных, пострадавших от ожогов или перенесших хирургические операции. В связи с часто встречающейся высокой устойчивостью штаммов P. aeruginosa к антибиотикам наиболее перспективными являются иммунологические методы борьбы с вызыаемой ими инфекцией, для. успешной разработки которых необходимо детальное изучение поверхностных типоспецифических О-антигенов - липополисаха-ридов (ЛПС). Важное значение имеет, в частности, создание на основе ЛПС классификационной схемы P. aeruginosa. Однако, предложенные к настоящему времени многочисленные серологические охемы включают различное число серогрупп и серотипов, во многих деталях противоречат друг другу, и ни одна из них не стала общепринятой.
Особые трудности вызывала классификация одной группы серологически родственных штаммов, пять из которых объединены в схема Ла-ни-Бергйна в серогруппу 02. Согласно другим классификационным схемам, штаммы этой группы образуют от двух до шести серотипов. Такие противоречия связаны с тем, что' 0-антигены этой группы штаммов имеют очень близкие, но не идентичные структуры. Тагам образом, химическое исследование О-антигенов P. aeruginosa является акту-алышм. Оно позволит связать тонкую структуру их полисахаридных цепей с серологической специфичностью штаммов и решить на молекулярном уровне вопросы классификации этого микроорганизма. Полученные датше будут полезными при создании искусственных антигенов с пониженной токсичностью и яротективных вакцин на их основе.
Цель работы. Целью настоящей работа было установление строения О-антигенных полисахаридов штаммоз P. aeruginosa, относящихся к сорогругтэ 02 класификационной схемы Лани-Бергана, и родственных штаммсв и создание на осново этих данных химической базы для единой классификации P. aeruginosa.
Научная новизна и практическая значимость. В результате проведенного исследования впервые установлены полные структуры повторяющееся звеньев трех О-специфическах полисахаридов (О-антигенов) и исправлено строение исследованных ранее четырех О-антигенов штаммов P. .aeruginosa, входящих в, серогруппу 02 классификации Лани-Бергана, и родственных штаммов. На основании этих данных на молекулярном уровне показана необходимость расширения этой серо-группы за счет включения в нее в качестве самостоятельных 0-серо-типов штамма 025 классификации Вокача и иммунотипа 7 классификационной схемы Фишера. В О-антигенах P. aeruginosa исследованной се-рогруппы впервые в природе идентифицированы необычные моносахариды,- относящиеся к новому классу аминосахаров, - З-ацетамидино-2-ацетамидо-2,3-дидозоксиуроновые кислоты с D-донко- и L-гудо-конфи-гурацией. Исправлено строение обнаруженного ранее D-дакко-изомера, для которого была ошибочно предложена бициклическая структура.
Для надежной идентификации ацетамидиновых производных диамино-уроновых кислот было впервые применено восстановительное дезамини-рование к масс-спектрометрия бомбардировки ускоренными атомами (БУА). Для подтверждения их строения осуществлен синтез модельного моносахарида, содержащего ацетомидиновую функцию, и проведен сравнительный анализ его химических и физико-химических свойств со свойствами найденных нами природных аналогов.
У ряда полисахаридов серогрупш 02 впервые в О-антигенах выявлена замаскированная регулярность, связанная с нестехиометричес-кой эпимеризацией по С5 производных диаминоуроновых кислот.
Апробация работы. Результаты работы были представлены на V Всесоюзном биохимическом съезде (Киов, 1986).
Публикации. Основной материал изложен в 10 публикациях- в отечественных и международных журналах.
-3-Объеы и структура диссертации. Диссертация состоит из введения, обзора литературы ("О-Специфические полисахариды грам-отрицатель-ных бактерий"), обсуждения полученных результатов, экспериментальной части, выводов и списка цитируемой литературы \2J 2.ссшок). Общий объем диссертации/SZ-CTp., включая2^табл. и рис.
