Введение к работе
1.1. Актуальность темы. Национальный проект «Развитие
агропромышленного комплекса» и ведомственная целевая программа
«Развитие свиноводства в Российской Федерации на период 2006-2010 годов
и до 2015 года» наряду с использованием передовых энергосберегающих,
ресурсосберегающих и экологически безопасных технологий
предусматривает внедрение эффективных селекционно-генетических и
биологических методов совершенствования лучших отечественных и
зарубежных пород и линий свиней Признавая ведущую роль традиционных
методов разведения, следует отметить, что использование только
классической селекции уже не может обеспечить должного уровня
эффективности селекционно-племенной работы (Эрнст Л К, 2005)
Маркирование признаков на уровне генотипа в дополнение к традиционным
классическим методам селекции позволяет значительно повысить
эффективность селекционно-племенной работы и достигнуть желаемого
результата уже в течение нескольких генераций (Глазко ВИ и др, 2001,
Зиновьева и др, 2005)
Генетическая экспертиза происхождения племенных животных в РФ является обязательным условием для ведения селекционной работы (Федеральный закон от 3 августа 1995 г № 123-ФЗ "О племенном животноводстве") В настоящее время одним из методов генетического контроля происхождения животных, и в частности свиней, является иммуногенетическое тестирование (Амерханов X А и др, 2006) Однако применяемые сегодня в большинстве лабораторий методики тестирования по эритроцитарным антигенам характеризуются большой трудоемкостью, относительно низкой производительностью и визуальной оценкой результатов реакций Таким образом, для повышения производительности, точности и достоверности иммуногенетическои экспертизы происхождения животных актуальным является усовершенствование методических приемов определения групп крови свиней на основе использования современных полуавтоматических инструментальных методов анализа
1.2. Цель її задачи исследований. Целью исследований явилась
разработка высокопроизводительной системы генетического контроля
происхождения свиней, основанной на выполнении полуавтоматического
анализа групп крови с применением мультисканирования
Для достижения цели работы были поставлены и решены следующие задачи
разработать усовершенствованный режим подготовки суспензии эритроцитов "МИКРО", основанный на использовании микропробирок и настольной микроцентрифуги,
разработать методику раскапывания и автоматического
смешивания диагностикумов (реагентов, иммуноспецифических
сывороток) и суспензии эритроцитов "МУЛЬТИ-ДРОП" в 96-ти луночном формате,
создать режим "МУЛЬТИСКАНИРОВАНИЕ" для автоматической визуализации результатов с применением планшетного фотометра,
определить критерии для автоматической обработки результатов анализа,
провести экспериментальную апробацию системы для тестирования свиней различных пород,
провести патентные исследования и изучить патентоспособность разработки
1 3. Научная новизна исследований состоит в том, что впервые разработана система определения групп крови свиней, основанная на полуавтоматическом инструментальном определении групп крови в 96-луночном формате Предложены способы подготовки суспензии эритроцитов, раскапывания и постановки реакций Разработан алгоритм анализа результатов реакций агглютинации и гемолиза с применением планшетного фотометра и персонального компьютера Получено положительное решение о выдаче патента РФ
1.4. Практическая значимость результатов работы заключается в
том, что предложенная усовершенствованная система позволяет повысить
производительность и точность метода, снизить трудоемкость и добиться
существенной экономии реагентов и, как следствие, снизить материальные и
временные затраты
1.5. Основные положения, выносимые на защиту.
Новый режим подготовки суспензии эритроцитов «МИКРО», позволяющий вне зависимости от исходных образцов крови свиней инструментально получать рабочую суспензию эритроцитов
Усовершенствованная методика постановки реакций в 96-луночном планшетном формате «МУЛЬТИ-ДРОП», позволяющая сократить временные и материальные затраты
Новый режим «МУЛЬТИСКАНИРОВАНИЕ», позволяющий осуществлять автоматическое «чтение» реакций агглютинации и гемолиза
Алгоритм для автоматической идентификации результатов иммуногенетического тестирования
Положительное решение о выдачи патента РФ
1.6. Аппобашш работы. Основные положения диссертационной
работы были доложены на III международной научно-практической
конференции «Современные технологические и селекционные аспекты
развития животноводства России», ВИЖ, 2005 г , на международной научно-
практической конференции, посвященной 100-летию со дня рождения акад
МН Лущихина «Биотехнология в мире животных и растений», 2005,
Бишкек, Киргизия, в рамках проведения школ-практикумов «Методы
исследований в биотехнологии сельскохозяйственных животных», ВИЖ,
2004, 2005 гг, на научных конференциях Центра биотехнологии и молекулярной диагностики ВИЖ, 2005,2006
1.7. Публикации. По материалам диссертации опубликовано 5
научных статей, в том числе 1 статья в журнале, рекомендованном ВАК
(Свиноводство, 2007, № 2) Получено положительное решение о выдаче
патента РФ
1.8. Структура и объем работы. Диссертационная работа написана на
108 страницах, состоит из следующих разделов введение, обзор литературы,
материал и методы исследований, результаты и обсуждение исследований,
заключение, приложение, выводы, практические предложения, список
литературы Работа включает 39 таблиц и 8 рисунков Список литературы
включает 124 источника, в том числе 30 источников на иностранных языках
