Введение к работе
Актуальность проблемы:
Одной из наиболее распространенных инфекций, передаваемых половым путем (ИППП), является гонококковая инфекция. Ежегодно в мире регистрируется около 60 миллионов случаев, а в России за 2003 год было зарегистрировано 117 572 случая этого заболевания (Госсанэпиднадзор РФ, 2003).
В диагностике гонореи ведущими остаются бактериоскопический и бактериологический методы, однако не всегда и не везде проводится культуральная диагностика гонореи, что создает дополнительные трудности в разработке системы контроля за распространением этой инфекции. Существенным недостатком в микробиологической диагностике гонореи является отсутствие регионального мониторинга чувствительности N.gonorrhoeae к применяемым антибиотикам и их штаммовой идентификации. Это приводит к увеличению процента мультирезистентных штаммов возбудителя, к изменению их биологических свойств, как следствие возрастает количество рецидивов и неуспехов при использовании общепринятых методов лечения гонореи (Кубанова А.А., 2003).
В настоящее время для лечения гонококковой инфекции применяются различные антимикробные препараты (АМП), и хотя эффективность существующих методов лечения остается высокой, чувствительность гонококка к наиболее активно применяемым антибиотикам значительно снизилась. Еще с середины 70-х годов появились сообщения о выделении штаммов гонококка, устойчивых к пенициллину, тетрациклину, а сначала 90-х - и к фторхинолонам (Гивенталь Н.И., 1979, Беднова В.Н., Зинурова Р.С., 1983, Tanaka М, 1993, Trees D.L, 1994, Ison С.А.,1998). Однако в России проводились лишь единичные исследования по изучению чувствительности гонококков к АМП (Борисен-ко К.К., 1995, Страчунский Л.С., 1998, Сехин СВ., 2000, КолиеваГ.Л., 2002).
Сегодня в мире разработана и применяется система серо-и генотипирова-ния штаммов, основанная на биологических и иммунологических характеристиках возбудителя (Fox К.К., Knapp J.S., 1999), что является одним из перспективных направлений. Штаммовое типирование и проведение системного монито-
ринга за резистентностью гонококка к АМП позволит оценить эпидемиологическую картину распространения гонококковой инфекции и разработать стандартные методы её диагностики, определяющие требования по проведению лабораторных процедур, а также разработать методы лечения гонореи с учетом регионального уровня чувствительности N.gonorrhoeae (Кубанова А.А., 2002). В отечественной практике подобных нормативных документов, основанных на доказательствах, до настоящего времени не было, что определяет актуальность, научную новизну и практическую значимость настоящего исследования.
Учитывая вышеизложенное, было целесообразно провести оценку уровня резистентности N. gonorrhoeae к АМП на территории Российской Федерации, с применением клинико-лабораторньж и молекулярно-биологических подходов в исследовании.
Цель исследования: Разработать методические подходы к лечению гонококковой инфекции с учетом данных регионального микробиологического мониторинга резистентности и характера генных мутаций гонококка, выделенного от больных гонореей в различных регионах РФ. Задачи исследования:
Разработать систему сбора и доставки клинического и биологического материала для исследования на гонококковую инфекцию из регионов Российской Федерации. Усовершенствовать методы выделения и сохранения чистой культуры N. gonorrhoeae;
Изучить уровень резистентности N. gonorrhoeae к различным АМП, применяемым для лечения гонококковой инфекции на территории РФ;
Сопоставить клинико-микробиологические результаты лечения гонококковой инфекции антибактериальными препаратами с результатами лабораторных исследований по определению к ним чувствительности N.gonorrhoeae;
Провести сравнительное типирование штаммов N. gonorrhoeae, полученных от больньж из различных регионов РФ, а также определить характер генных мутаций, ассоциированных с устойчивостью к различным АМП;
5. На основании полученных данных разработать принципы адекватного лечения больных гонококковой инфекцией антибактериальными препаратами в различных регионах РФ. Научная новизна:
Впервые получены сравнительные данные по изучению частоты выявления резистентных к АМП штаммов N. gonorrhoeae в различных регионах РФ;
Впервые проведены сравнительные исследования по серо- и генотипиро-ванию штаммов N.gonorrhoeae, выделенньж от больных гонореей из различных регионов РФ;
Впервые разработаны принципы адекватной терапии гонококковой инфекции антибактериальными препаратами основанные на данных регионального исследования антибиотикорезистентности штаммов возбудителя гонореи. Практическая значимость:
разработана и внедрена в практическую деятельность отдела микробиологии ФГУ ЦНИКВИ и лабораторий, принимавших участие в региональном мониторинге антибиотикорезистентности гонококка, учетно-отчетная форма (паспорт на штамм N.gonorrhoeae) и создана компьютерная база данных штаммов N.gonorrhoeae;
разработаны и внедрены в практическую деятельность бактериологических лабораторий, принимавших участие в региональном мониторинге за анти-биотикорезистентностью гонококка, схемы - инструкции по забору и транспортированию клинического материала, по выделению и сохранению чистой культуры N.gonorrhoeae с использованием как отечественных, так и зарубежных питательных сред, а также по определению чувствительности гонококка к АМП;
разработаны и внедрены в практическую деятельность учреждений участвующих в мониторинге практические рекомендации по лечению больньж гонококковой инфекцией антибактериальными препаратами, с учетом уровня резистентности возбудителя в различных регионах РФ;
полученные результаты генотипирования, собранные в ходе проведения регионального мониторинга штаммов гонококка, могут в дальнейшем быть
применены в молекулярной эпидемиологии для установления происхождения и путей передачи возбудителя. Точное определение серовара позволит прогнозировать возможность трансформации в диссеминированную форму заболевания, а также позволит сделать правильный выбор антибактериальных препаратов для лечения гонореи. Внедрение результатов исследования в практику:
Результаты проведенных исследований нашли отражение в практической деятельности НКДО ФГУ ЦНИКВИ г. Москвы, ККВД г. Хабаровска и Уральского НИИ дерматовенерологии и иммунологии.
Апробация работы: Основные положения диссертации доложены и обсуждены на: Научно - практической конференция ФГУ ЦНИКВИ, - Москва, - апрель 2003г.; 14 Международном конгрессе в Праге, посвященном проблемам клинической микробиологии, - Прага, 3 мая 2003 г; Научном семинаре но проблемам ЗППП в CDC, - Атланта, январь 2005г.
В завершенном виде диссертационная работа обсуждена и одобрена на заседании Апробационной комиссии ФГУ ЦНИКВИ,- Москва, 22 февраля 2005 г. Публикации: По теме диссертации опубликовано 7 научных работ. Положения, выносимые на защиту:
Разработана и внедрена в практику отечественного здравоохранения система мониторирования антибиотикорезистентности N. gonorrhoeae на территории РФ.
Изучен уровень антибиотикорезистентности штаммов N. gonorrhoeae на территории РФ.
3. Сопоставление клинико-микробиологических результатов лечения гоно
кокковой инфекции антибактериальными препаратами с результатами лабора
торных исследований по определению чувствительности к ним N.gonorrhoeae
позволило обнаружить взаимосвязь между эффективностью проведенной тера
пии и профилем резистентности гонококка к АМП.
4. При проведении типирования выделенных штаммов N. gonorrhoeae уста
новлен характер генных мутаций гонококка, обеспечивающих его антибиотико-
резистентность.
5. Разработаны практические рекомендации по лечению больных гонокок
ковой инфекцией антибактериальными препаратами с учетом профиля рези
стентности гонококка к АМП в различных регионах РФ.
Структура и объем диссертации:
