Введение к работе
Актуальность темы: В настоящее время накоплено достаточное количество фактов, которые свидетельствуют о том, что длительный прием анаболических стероидов (АС) в больших дозах вызывает эффекты, сходные с алкогольной или наркотической зависимостью, а также маниакальные черты, включая раздражительность, агрессивность, эйфорию. Отмена препаратов нередко вызывает депрессию, которая приводит к суицилдным попыткам. Применение АС может чаще, чем других препаратов привести к жестокому поведению и агрессивности с грандиозными жестокими навязчивыми идеями (H.GJr. Pope, 1994 L. River, 1994).
По исследованиям, проведенным в 1996г. в Москве и Санкт-Петербурге, от 7 до 38% занимающихся в спортивных секциях пользуются различными стимуляторами. Это значит, что допинговая проблема актуальна и для нашей страны (Толпегин, 1996). Исходя из токсичности АС в 1976г. Международный Олимпийский комитет включил АС, также как псе фармакологически близкие соединения, в список веществ, подлежащих допинг-контролю (Допинг и .международный спорт, 1989).
В настоящее время имеются неоспоримые данные о том, что длительное применение АС нередко приводит к смертельному исходу. Морфологическая картина лри летальном исходе недостаточна характерна. Ка исследовании трупов отмвчают деградацию жизненно важных органов: сердечно-сосудистой системы, органов желулочно -кишечного тракта, цирроз печени с почти полным распадом. Статистика по данным смертельным случаям затруднена, так как причиной смерти зачастую называют не анаболики, а, например, инфаркт (Толпегин, 1996).
В судебно-химическои плане АС практически не изучены. Клинико- и химико-токсикологическое исследование биологических жидкостей и биотканей на присутствие АС при подозрении на употребление препаратов этой группы, как правило, не проводится ввиду отсутствия методики их изолирования, обнаружения и определения.
Учитывая широкое применение в медицине и спорте, наличие случаев отравления, в том числе и со смертельным исходом, а также отсутствие методических рекомендаций по исследованию биоматериала на присутствие анаболических стероидов, следует считать, что разработка методов выделения, очистки, обнаружения и количественного определения этих лекарственных препаратов в
органах трупов и биологических жидкостях является одной из актуальных проблем современной судебной химии.
Цель и задачи исследования. Целью исследований является разработка методов выделения метандростенолона и метиландростендиола из объектов биологического происхождения, обнаружения и количественного определения этих препаратов, пригодных для судебно-химнческих исследований.
Для реализации поставленной цели необходимо было решить следующие задачи:
разработать чувствительные методики идентификации метандростенолона и метиландростендиола при совместном присутствии с помощью различных хроматографических, фотометрических методов;
разработать чувствительные методики количественного определения метандростенолона и метиландростендиола с применением высокоэффективной тонкослойной хроматографии (ВЭТСХ), высокоэффективной жидкостной хроматогра-фии(ВЭЖХ), УФ-спектрофотометрии;
изучить пригодность разработанных методов обнаружения и количественного определения для анализа метандростенолона и метиландростендиола, выделенного из объектов биологического происхождения;
определить оптимальные условия жидкость-жидкостной экстракции метандростенолона и метиландростендиола из водных растворов;
провести сравнительную оценку методов выделения метандростенолона и метиландростендиола из объектов биологического происхождения;
изучить закономерность распределение метандростенолона и метиландростендиола в органах экспериментальных животных в условиях моделирования отравления этими препаратами;
изучить длительность сохраняемости метандростенолона и метиландростендиола в трупном материале при его гниении.
Научная новизна работы. Разработаны оригинальные методы изолирования метандростенолона и метиландростендиола из внутренних органов, позволяющие выделить до 70% метандростенолона и 42% метиландростендиола. Изучено влияние различных факторов на изолирование препаратов из крови и мочи и определены оптимальные условия изолирования. Проведено исследование влияния рН среды, природы органических растворителей в водной фазе на степень экстракции метандростенолона и метиландростендиола из водных растворов и вытяжек из объектов биологического происхождения. Разработанные методы разделе-
ния и идентификации метандростенолона и метиландростендиола, выделенных из биоматерила, пригодные для целей химико-токсикологического анализа, включающие в себя хроматографи-ческие и спектральные методы. Впервые применен метод ТСХ в сочетании с денситометрией для идентификации и количественного определения метандростенолона и метиландростендиола, выделенных из биоматериала. Изучено распределение метандростенолона и метиландросгендиола в органах крыс. Впервые изучена сохраняемость препаратов в трупном материале. Даны рекомендации судебно-медицинским экспертам по забору органов для исследования на содержание анаболических стероидов.
Практическое значение работы заключается в том, что разработаны методики выделения метандростенолона и метиландростендиола из биологического материала, методы их разделения, идентификации и количественного определения, которые могут использоваться в практике судебно-химических и судебно-токсикологических лабораторий для идентификации данных препаратов.
Данные по распределению и сохраняемости метандростенолона и метиландротендиола могут быть использованы для обоснованного отбора биологического материала с целью проведения судебно-химнческого исследования на анаболические стероиды.
Разработанная методика выделения, обнаружения и определения метандростенолона и метиландростендиола в биологическом материале внедрена в практику Судебно-медицинской экспертной службы Санкт-Петербурга, Ленинградского Областного Бюро судебно-медицинской экспертизы, 78 судебно-медицненкой лаборатории Ленинградского военного округа, в учебный процесс Санкт-Петербургской Государственной химико-фармацевтической академии на факультете повышения квалификации и на кафедре фармацевтической химии, в учебный процесс Санкт-Петербургского Государственного медицинского университета им. акад. И.И. Павлова на кафедре судебной медицины с основами правоведения.
Апробация работы. Основные результаты диссертационной работы доложены:
на конференции "Использование современных методов при проведении экспертных исследований" (Москва, 1995)
на Первой всероссийской конференции "Актуальные проблемы теоретической и прикладной токсикологии" (Санкт-Петербург, 1995)
- на межвузовской научно-практической конференции молодых
ученых и специалистов "Актуальные вопросы теории и практики
судебной медицины" (Санкт-Петербург, 1996)
на Международном научно-практическом семинаре "Пробоподготовка и исследование токсических веществ в биологических пробах инструментальными методами анализа"(Санкт -Петербург, 1996)
на Всероссийской научно-практической конференции "Актуальные проблемы создания новых лекарственных средств" (Санкт-Петербург, 1996)
- на расширенном заседании кафедр Санкт-Петербургской госу
дарственной химико-фармацевтической академии (1996).
Публикации. По теме диссертационной работы опубликовано 5 научных работ. Подготовлены методические рекомендации, принятые для апробации.
Объем и структура диссертации. Диссертация изложена иъ./? страницах машинописного текста и состоит из введения^глав, заключения, выводов, списка литературы, включающего 207 источников, из которых 86 иностранных и приложения.
