Введение к работе
Актуальность темы. В настоящее время все большее значение приобретают лекарственные средства растительного происхождения. Одними из наиболее перспективных и часто используемых являются лекарственные растения, содержащие природные фенольные соединения, в том числе, флавоноиды.
Введение в медицинскую практику новых видов лекарственных растений, стандартизация уже используемого растительного сырья и фитопрепаратов невозможны без знания их химического состава. "Традиционные" методы фитохимических исследований длительны и трудоемки, так как требуют препаративного выделения анализируемых компонентов методами колоночной хроматографии при нормальном давлении или препаративной бумажной хроматографии, а для дальнейшей хроматографической или спектральной идентификации необходимо применение стандартных образцов заведомо известных соединений. Однако, такие методы разделения и анализа веществ как газожидкостная (ГЖХ) и высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ) позволяют упростить и ускорить анализ сложных смесей при наличии достаточно полных баз данных наиболее воспроизводимых аналитических параметров веществ.
Цель и задачи исследования. Целью данной работы являлась разработка подходов к идентификации природных фенольных соединений в ВЭЖХ без использования стандартов и создание соответствующего информационного обеспечения.
Для достижения поставленной цели необходимо решение следующих задач:
- выбор наиболее воспроизводимых аналитических параметров, характеризующих хроматографическое поведение веществ в ВЭЖХ и оценка их информативности;
- выбор минимально' необходимой степени стандартизации условий проведения хроматографического анализа;
- поиск дополнительных (спектральных) аналитических параметров, повышающих надежность и однозначность идентификации веществ, и характеристика ими фенольных соединений природного происхождения;
- характеристика выбранными параметрами максимально возможного числа фенольных соединений природного происхождения и создание базы данных по аналитическим параметрам этих соединений в ВЭЖХ;
- характеристика возможностей и особенностей практического применения предлагаемых подходов к идентификации на конкретных примерах.
Научная новизна. Выполненные исследования развивают концепцию представления хроматографических данных по удерживанию соединений в обращенно-фазовой ВЭЖХ в
4 форме индексов удерживания - параметров, обладающих наибольшей межлабораторной воспроизводимостью.
В качестве дополнительных аналитических параметров фенольных соединений в ВЭЖХ впервые предложены и использованы относительные оптические плотности при разных фиксированных длинах волн, являющиеся простыми и удобными в определении характеристиками не только индивидуальных веществ, но и соединений с одинаковыми хромофорами в составе молекул.
На примере фенольных соединений различных классов предложена концепция формирования баз аналитических параметров в обращенно-фазовой ВЭЖХ, предполагающая усреднение всех независимых значений этих параметров (индексов удерживания и относительных оптических плотностей), определяемых как экспериментально, так и на основе имеющихся в литературе данных.
Теоретическая и практическая значимость. Показаны преимущества использования индексов удерживания, позволяющих идентифицировать компоненты различных смесей без препаративного выделения входящих в их состав веществ и без использования стандартных образцов анализируемых соединений.
Предложенный подход к интерпретации УФ-спектральных данных в ВЭЖХ является отличным от общепринятых и не был использован ранее для характеристики органических соединений по типам хромофоров, присутствующих в молекуле, т.е., для групповой идеіггификации.
Определенные впервые инкременты индексов удерживания структурных преобразований в молекулах (для реакций ацетшшрования и метилирования соединений с активными атомами водорода) характеризуют взаимосвязь вариаций структуры соединений и их параметров удерживания в обращенно-фазовой ВЭЖХ, изучение и характеристика которых является одной из важнейших теоретических проблем. Полученные результаты позволяют подойти к решению задач оценки параметров удерживания соединений, отсутствующих в базах данных, т.е. имеют непосредственное практическое применение.
Возможности использования предложенных подходов рассмотрены на примерах нескольких растительных объектов, исследование состава которых представляет различные по степени сложности аналитические задачи. Впервые предложен метод стандартизации многокомпонентных смесей фяавоноидов по суммарному содержанию гликозидов, основанный на результатах элементного анализа образцов до и после полного кислотного гидролиза.
Апробация работы. Основные результаты исследований доложены на VII Всероссийском симпозиуме по молекулярной жидкостной хроматографии (Москва, 1996), Втором
І.
гаучном конгрессе "Традиционная медицина: теоретические и практические аспекты" Чебоксары, 1996), Всероссийской научной конференции "Актуальные проблемы создания ювых лекарственных средств" (С.-Петербург, 1996), Международной конференции по «алитической химии (Москва, 1997), 21-ом Международном симпозиуме по :ысокоэффективному жидкофазному разделению и родственным методам (Бирмингем, 997).
Диссертационная работа выполнена в соответствии с научным направлением Академии 'Разработка и совершенствование методов анализа лекарственных средств" и темой ектора аналитических методов НИЛ "Разработка новых методов идентификации и :оличествешюго определения природных и синтетических биологически активных іеществ и лекарственных препаратов".
Публикации. По результатам проведенных исследований опубликовано 12 работ.
Объем и структура диссертации. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, тисания материалов и методов исследования, четырех глав, содержащих результаты ісследований и их обсуждение, выводов и списка литературы. Работа изложена на 150 ^границах машинописного текста, содержит 33 таблицы, 12 рисунков, 2 схемы и приложение. Список литературы включает 200 источников.
![Стандартизация и контроль качества лекарственных средств группы фторхинолонов методами хроматографии и ИК-спектроскопии [Электронный ресурс]](/i/i/4375/184827.png "Стандартизация и контроль качества лекарственных средств группы фторхинолонов методами хроматографии и ИК-спектроскопии [Электронный ресурс] Коновалов Андрей Александрович")
