Введение к работе
Актуальность темы
Домперидон, являясь антидопаминергическим препаратом периферического действия, в настоящее время широко используется в РФ при нарушениях моторики желудочно-кишечного тракта. Являясь производным бензимидазола, молекула домперидона липофильна, обладает большой конформационной вариабельностью и имеет большое сродство к транспортному белку Р-гликопротеину [El Ela A., 2004; А.С. Логинов 1996; А.А. Шептулин, 1996].
P-гликопротеин играет важнейшую роль в фармакокинетике ЛС. Он препятствует проникновению, распределению ЛС и способствует их выведению из клетки. Если активность Р-гликопротеина в тканях снижена, то концентрация ЛС в организме может увеличиться, что приведет к развитию побочных эффектов. Известно, что активность Р-гликопротеина зависит от генетических особенностей, влияя тем самым на фармакокинетику ЛС, в том числе домперидона [El Ela A., 2004; Tsujikawa K, 2003; Faassen F., 2003].
Одним из самых распространенных и перспективных методов для изучения фармакокинетики ЛС является метод высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ). Метод ВЭЖХ имеет ряд существенных преимуществ по сравнению с другими: отсутствие ограничений по термоустойчивости и летучести анализируемого препарата, возможность работы с водными растворами, возможность собирать разделённые фракции для их последующей идентификации, анализировать большое количество проб, а также высокая чувствительность, точность, скорость, и экономичность анализа.
Таким образом, исследование применения метода ВЭЖХ в изучение фармакокинетики домперидона у лиц с различным генотипом Р-гликопротеина представляется актуальным.
Цель и задачи исследования
Целью исследования является исследование применения метода высокоэффективной жидкостной хроматографии в изучении фармакокинетики домперидона у лиц с различным генотипом.
Для достижения поставленной цели необходимо было решить следующие задачи:
Изучить хроматографическое поведение домперидона и обосновать условия его определения в плазме крови методом высокоэффективной жидкостной хроматографии.
Разработать методику экстракции домперидона из плазмы крови.
Изучить фармакокинетику домперидона после его однократного перорального приёма.
Провести генотипирование гена MDR1, кодирующего Р-гликопротеин, методом ПЦР у лиц московской популяции из этнической группы русских.
Сопоставить результаты фармакокинетического исследования домперидона после его однократного приёма у лиц с различным генотипом гена MDR1.
Научная новизна
Изучены хроматографические свойства домперидона методом ВЭЖХ.
Определены фармакокинетические параметры домперидона в плазме крови после однократного перорального приёма.
Изучено распределение ТТ, СТ и СС генотипов по полимофному маркеру С3435Т гена MDR1, кодирующего Р-гликопротеин, у лиц московской популяции из этнической группы русских.
Впервые проведено сопоставление результатов фенотипирования и генотипирования Р-гликопротеина у лиц московской популяции из этнической группы русских.
Практическая значимость
Разработана оригинальная доступная методика определения домперидона в плазме крови методом ВЭЖХ, характеризующаяся быстротой анализа, чувствительностью, высокой точностью и воспроизводимостью результатов измерений.
Показана необходимость оценки активности Р-гликопротеина у лиц с различным генотипом гена MDR1 путем генотипирования (методом полимеразной цепной реакции) или определения концентрации домперидона в плазме крови (методом высокоэффективной жидкостной хроматографии) при назначении лекарственных средств-субстратов Р-гликопротеина.
Методика количественного определения домперидона методом ВЭЖХ в плазме крови используется при проведении фармакокинетических исследований в Филиале «Клиническая фармакология» НЦ БМТ РАМН.
Апробация работы
Апробация работы проведена на кафедре фармацевтической химии с курсом токсикологической химии ММА имени И.М.Сеченова.
Результаты работы доложены на XIII конгрессе «Человек и лекарство» (Москва, 2006); на Всероссийской конференции Государственного регулирования в сфере обращения лекарственных средств и медицинских изделий– «ФармМедОбращение – 2006» (Москва, 2006); на эллективах кафедры фармацевтической химии с курсом токсикологической химии и кафедры клинической фармакологии и пропедевтики внутренних болезней ММА им. И.М. Сеченова (Москва, 2006).
Публикация результатов исследования
По результатам проведенных исследований опубликовано 3 печатных работ.
Связь исследования с проблемным планом фармацевтических наук
Диссертационная работа выполнена в рамках комплексной темы кафедры фармацевтической химии с курсом токсикологической химии фармацевтического факультета ММА им. И.М.Сеченова «Совершенствование контроля качества лекарственных средств» (№ государственной регистрации 01.200.110545).
Основные положения, выносимые на защиту
-
Разработанная методика определения домперидона в плазме крови с помощью метода ВЭЖХ.
-
Результаты фармакокинетического исследования домперидона, проведённого на 36-и здоровых испытуемых московской популяции из этнической группы русских после однократного перорального приёма домперидона в дозе 20 мг.
-
Результаты определения частоты появления полиморфизма С3435Т гена MDR1, кодирующего выработку Р-гликопротеина у 103 человек московской популяции из этнической группы русских, проведенного методом ПЦР-ПДРФ, и результаты сопоставления с распределением генотипов у группы из 36 индивидуумов, участвующих в фармакокинетическом исследовании домперидона.
-
Сопоставление результатов фармакокинетического и фармакогенетического исследований Р-гликопротеина у лиц московской популяции из этнической группы русских.
Объем и структура диссертации
Диссертация изложена на 100 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, экспериментальной части, выводов, списка литературы, из 124 названий (113 из которых зарубежные) и приложения. Работа иллюстрирована 19 рисунками и 20 таблицами.
