Введение к работе
Актуальность темы. Повышение эффективности противоопухолевой химиотерапии в настоящее время развивается по разный направлениям. Вместе с поискои и синтезом новых оригинальных препаратов с более избирательным действием на опухолевые клетки важное значение имеет и исследования, связанные с оптимизацией методик применения противоопухолевых средств, уже зарекомендовавших себя в медицинской практике, путем совершенствования лекарственных форм, дозирования, схем и режимов введения. При этом все большее внимание уделяется изучение фармакокинетики препаратов, данные которой позволяют предложить рациональные методы использования известных лекарственных средств (Холодов Л.Е. и др.,1985; Фирсов А.А. и др., 1984)..
Кроме того, немаловажным является повышение качества лекарственных средств путем совершенствовг ля технологии их изготовления, методов анализа и стандартизации. Постоянно повышавшиеся требования к качеству, направленные на обеспечение эффективности и безопасности лекарственных средств, нашли отратээиие в Государственной Фармакопее хі-издания и в современных зарубежных фармакопеях.
Наибольшее практическое применение в онкологии нашли алкили-руешие агента, являющиеся самым многочисленным классом противоопухолевых соединения. К этому классу относятся производные ди-12-хлорзтилі-ашіт. сарколизин и асалин (дипептид сарколизина). Препараты используются в клинике с 60-х годов и хорош зарекомендовали себя при лечении лимфо- и ретикулог "ркомы, миеломноя болеэ-ш- семиномы яичка и других опухолевых заболеваниях (Блохин Н.К. и др.,1977,1984: Ларионо. Л.0.,1962; Переводчикова Ч.И.,1993).
Однако, несмотря па длительность применения препаратов в клинике (более 30 лет), до сих пор не были предприняты фармакокиноти-ческие исследования, Направленные на і еспечение рационального
- 2 - ' курса лечения и возможного снижения числа неблагоприятных побочных реакций. гіеді: известных методов количественного анализа этих препаратов отсутствуют достаточно надежные и эффективные .методы, позволяющие определять содержание легкогидролизуоасгося сарколиэи-на в присутствии продуктов его деградации и содержание рацемических смесей дипептидов в асалпне, различающихся Онологической активностью.
В настоящее время в НИИ ЭДиТО ОНЦ РАМН разработаны новые лекарственные формы этих препаратові лиофилизированныи порошок для внутривенных инъекций (с&рколиэин) и таблетки для перорального применения (асалин).
Высказанные положения определяет актуальность и практическую значимость изуения доклинической фармакокинетики сархоли-зина и асалина о новых лекарственных формах и совершенствования методов анализа и контроля качества препаратов с помошьо современных физико-химических методові высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭХХ1. тонкослойной хроматографии (ТСХ1. У*- . Н-'и H-flMP-спектроскопии. Учитывая принадлежность препаратов к одному массу соединения, близость их химической структуры, сходность механизма действия наряду с индивидуальной спецификой фармакологического действия, представляет научный и практический интерес прг ?дение их сравнительного физико-химического- и фариакокинетического анализа.
Цель исследования - разработка эффективных методик контроля качества сарколизина и асалина в порошке, в новых лекарственных формах и изучение доклинической фарыакокинетики препаратов. Основ' е задачи исследования.
разработка методик количественного анализа сарколизина и ас и-на, их возможных, примесей с помощью метода ВЭЖХ;
исследование стабильности сарколизина и асалина в лекарственных формах, растворах и биологических жидкостях с помощью ВЭЖХ:
изучение фармакокинетики сарколизина при однократном ретраорбн-тальном введении у мышея;
изучение фармакокинетики асалина с элементами ..йтаболизма при однократно., пероральном введении у ыышеп и крыс.
Научная новизна. Впервые разработана унифицированная методика ВЭЖХ анализа сарколизина в порошке и в сложной лекарственной форме для инъ?кция, продуктов его гидролиза и возможных технологических примесея. таких как этиловый эфир сарколизина. Получены и охарактеризованы образцы специфических примесея сарколизина. Метод ВЭЖХ впервые использован для изучения кинетики гидролиза сарколизина в растворах при различных температурах и устойчивости препарата в биологических жидкостях.
Разработана методика ВЭЖХ анализа асалина и его рацемических смесей.
Изучена фармакокинетика неизмененного сарколизина у мысея , и выведение его <. мочоя. Предпринято "іирокое доклиническое изучение фармакокинетики Н-асалина с элементами метаболизма у животных. Проведено математическое иоделирование <рармакокинетических процессов.
Практическая значимость. Предлогена методика ВЭЖХ для количественного определения сарколизина, продуктов его деградации, технологических примесея в пороске, лекарственных формах, биологической материале. Методика иояет быть использована для изучения стабильности, "инетики гидролиза и фармакокинетики препарата. Методика апробирована в лабораториях НИИ ЭДиТО ОНЦ РАМП, в виде Дополнения и Пояснительной записки вошла в проект ВТС на "Г-'рколизин-лио по 0,02г для инъекция". Материалы по изучения стабильности препарата f растзоре-концентрата примяты к' ксполь-о-ванио при разработке лабораторио-технологического регламента по производству лмосііилигировшінсго сарколизина для инъекция.
Методика анализа асали'на методом Ю^Х, позволявшая оппегол^т1-
соотношения его рацемических смесей в порошке, таблетках и биологическом материале, апробирована а лабораториях НИН ЭДиТО ОНЦ РАМН.
Результаты фармакокинетических исследования вклочены о документацио, предегавляеиуо в армакологическия Коыитет ЦЗ РФ с цельо разрешения проведения і фазы клинических испытания.
Связь исследований с проблемным "лано:. фармацевтических наук. диссертация виполнена в соответствии с планом научно-исследовательских работ НМЛ им. И.U.Сеченова и проблемоя "вариация" Научного Совета №ю РАМН "Фармакология н .фармация" по специальности 13.00.02 "фармацевтическая химия и фармакогнозия", номер госрегне-трации 01060048673 н планои научко-ксследовательекмх работ НИН ЭДмТО ОНЦ РАМН, номер госрегистрации 01910001729 и 01910001lJ2.
Апробация работы. Результаты исследование дологэны на ш Всесоюзном совекаикм по проблеме "Скзкологически активные соединения, меченные радиоактивными и стабильным» изотопами" (Зол-Огород. 1991 ), на Межреспубликанской научной конференции "Проблем стандартизации а контроля качества лекарственных средств" (Москва. 19911, на ш Всесоозноя конференции по фармакокинетике (Шскоа, 19911, на і t it научно-практической и иаучно-иетодическоя конференциях молодых ученых Казау~тана с участием деятелей науки стран СНГ и дальнего зарубежья (Москва, 1992,19931, на эаседаннях Ученого Совь.а НИН ЭДиТО ОНЦ РАМН (Москва, апрель, нонь-19931. Работа доложена на межлабораторных собраниях НИИ ЭДиТО ОНЦ РАМН (иосква. 1992,19931 и на межхафедральноя конференции фармацевтического факультета MVA им. И.М.Сеченова (^осква, 199311
Публикации. По материалам диссертации опубликовано в работ.
IU завиту выносятся результаты экспериментальных исследования и их теоретическое обоснование
- методики идентификации и количественного определения сарколкэи-на, продуктов его гидролиза и технологических примесеп в порояж*-.
- з -лекарственных формах и биологическом материале с пом чиыо ВЗЖХ;
методики количественного определения асалина и его рацемических смесей з порошке, таблетках, биологическом материке методой ВЭЖХ;
результаты изучения кинетики гидролиза сарколизина в растворах и в биологических ямдкостях;
результаты изучения доклинической фармакокинетики неизмененного сарколизина у мыиея при однократной ретраорбитальнои введении и
Н-асалина у крыс и мышэй при однократном пероральном .введении. Структура и объем диссертации. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, 4-х глав экспериментальной части, выводов, списка литературы и приложения. Работа изложена на 193 страницах машинописного теїсста, содержит 43 рисунка, 29 таблиц. Библиография включает 223 наименования, з том числе 126 иностранных.
