Введение к работе
Актуальность проблемы. Система гемостаза выполняет в организме ряд жизненно важных функций - поддерживает кровь в жидком состоянии, препятствует тромбообразованию и блокаде микроциркуляции в органах, предотвращает кровоточивость и обеспечивает купирование уже развившихся геморрагии, несет ограничительную и защитную функцию, препятствуя распространению из очагов поражения микрофлоры, а также гетеро- и аутотоксинов (Кузник Б.И., Скипетров В.П., 1974; Гаврилов O.K., 1982; Мачабели М.С., 1983, Баркаган З.С., 1987). Нарушения в этой системе предопределяют развитие геморрагии, тромбогеморрагий, ишемических изменений в органах, создают предрасположенность к тромбозам. Все эти нарушения, как известно, являются промежуточным звеном патогенеза многих заболеваний, характеризующихся повреждением внутренней выстилки сосудов, нарушением взаимодействия эндотелия с клетками крови и плазменными ферментными системами, сдвигами реологии крови.
Независимо от этиопатогенеза тромбоэмболических осложнений одним из средств их предупреждения и коррекции являются антикоагулянты, введением которых достигается либо угнетение синтеза прокоагулян-тов (антибиотики, цитостатики), либо ограничение пострибосомального формирования прокоагулянтов (антивитамины К). Эти группы антикоагулянтов (антикоагулянты непрямого действия) используются для создания медленно развивающейся стабильной гипокоагулемии. Однако, практическая медицина нуждается, как правило, в быстром эффекте, который обеспечивается антикоагулянтами прямого действия. Среди них чаще других применяется гепарин, отличающийся сильным, но кратковременным эффектом (Кудряшов Б.А., 1984). Хотя гепарин и является средством выбора, он отличается рядом недостатков. К важнейшим из них можно отнести способность вызывать агрегацию тромбоцитов (Bertele V. et al, 1983; Cimo P.I.. et al., 1979) и тромбоцитопению (Ansell J., Deykin D., 1980; Borg J.L., 1986). Известны данные и о существовании гепарино-резистентности (Баркаган З.С. и соавт., 1982, 1988). Нередко отмечают-
ся тромбоэмболические осложнения после отмены гепарина, связанные с так называемым "эффектом бумеранга" (Nordon et al., 1981).
Исследования в области поиска естественных или создания новых синтетических средств направленного воздействия на гемостаз не прекращаются уже много лет. В этом плане активно изучаются ингибиторы тромбина (Markwardt, 1974), активаторы фибринолиза и фибринолитики (Терешин И.М., Гринберг Г.Е., 1981; Андреенко Г.В., 1981), исследуются иммобилизированные ферменты и комплексные препараты (Мамедов Я.Д. и соавт., 1981). Не остались в стороне и растения, как источники веществ, модифицирующих гемостаз, среди которых найдены как активаторы (Турова А.Д., Сапожникрва Э.Н., 1983), так и ингибиторы свертывания крови (Колхир В.К., Соколов С.Я., 1982, Wong et al., 1984). Вместе с тем большинство проведенных исследований посвящены поиску средств фармакологической коррекции гемостаза, влияние которых реализуется через ограничение тромбиногенеза либо дезагрегацию тромбоцитов.
В последние годы показано, что регулирующим воздействиям может подвергаться взаимодействие сформировавшегося тромбина с фибриногеном и , что особенно важно, неферментативный процесс самосборки фибрина, т.е. этап, не имеющий альтернативного пути, с помощью воздействия на который можно предотвратить образование тромба на конечной стадии этого процесса (Чирятьев Е.А., 1990; Бышевский А.Ш., 1991).
Показано, что, в известной мере, таким действием обладают корот-коцепочечные пептиды, в частности, выделенные из плазминового гидро-лизата фибриногена или фибрина (Takasi, Suzuki, 1979), из тканей человека и животных (Бышевский А.Ш. и соавт., 1990) или синтезированные в лабораторных условиях (Vincente et al, 1984), но все они оказались либс недостаточно эффективными, либо высокотоксичными.
Работы, выполненные в лаборатории кафедры биохимии Тюменского медицинского института, свидетельствует о том, что некоторые растения,
в частности, медуница мягчайшая, могут явиться источником фармакологически активных средств, ограничивающих коагуляционные превращения фибриногена (Герберт И.Я., 1990; Дементьева И.А., 1991). Однако, остается актуальным изучение более широкого ассортимента растений, содержащих подобные вещества, на базе которых возможно создание принципиально новых средств коррекции гемостаза. В предварительных экспериментах растение нонея темная представилась перспективным объектом для таких исследований.
Цель работы. Экспериментальное изучение возможностей получения и основных фармакологических свойств экстракта из нонеи темной, обладающего, по предварительным данным, антикоагулянтной активностью.
Задачи исследования. 1). Выделение антикоагулянта в виде однородного вещества и изучение его химической природы 2). Изучение проти-восвертывающей активности экстракта при однократном и длительном введении лабораторным животным; 3). Изучение токсичности экстракта в острых и субхронических опытах.
Научная новизна. Впервые из травы нонеи темной выделен антикоагулянт прямого действия в виде однородного вещества, установлена его химическая природа, основные параметры и фармакологические свойства.
Практическая значимость. 1). Получен прямой антикоагулянт длительного действия с известным механизмом действия, который можно использовать как инструмент в практике работы гематологических лабораторий; 2). Получены данные, которые обосновывают целесообразность и необходимость дальнейшего исследования полученного антикоагулянта из травы нонеи темной по схеме, предусмотренной Фармакологическим Комитетом для доклинических испытаний антикоагулянтов прямого действия.
Апробация и публикации. Основные положения диссертации доложены на проблемной комиссии "Фармация" Тюменской медицинской академии, 1-м съезде Российского научного общества фармакологов, меж-
дународной выставке "Здоровье - 96", опубликованы в материалах названных конференций и конференции "Актуальные вопросы теоретической и клинической медицины" (Тюмень, 1994).
По теме диссертации опубликовано 5 печатных работ.
Объем и структура работы. Материалы работы, включая указатель литературы, изложены на 135 страницах машинописного текста. В тексте работы содержится 8 рисунков и 34 таблицы. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, главы с описанием материалов и методов исследований, главы (содержащей 7 разделов), в которой изложены результаты собственных исследований, заключения и выводов. Указатель литературы представлен 146 отечественными и 128 иностранными авторами.
