Введение к работе
-'
Проблема естественной резистентности к чуме издавна привлекала к себе внимание исследователей.Не утратила она своей актуальности и в наши дни ( Исин Ж.М.,І985їДятлов А.И.,1989 ).Это обусловлено наличием на территории нашей страны и за рубежом природных очагов этой инфекции,а также существованием животных одного вида»имею-щих различную чувствительность к возбудителю' чумы ( Леви М.И. с соавт.,!963}Дятлов А.И.,1989 ).
В настоящее время считается установленным,что.в защите организма от инфекционного агента значительную роль'играет клеточный иммунитет ( Пальцкн А.А.,1988{Маянский А.Н.,Маянский Д.Н.,1989 ), в том числе и при чуме ( Коробкова Г.И.,I960 ).
Рядом авторов отмечена зависимость состояния естественного иммунитета от вирулентности чумного микроба-( Акимович В.В.,Доб-роцветова Т.Я.,I960 ),сезона года ( Апарин Г.П. с соаьт.,1962 ) и целого ряда других факторов.
Исследования механизмов естественного иммунитета при чуме получают дальнейшее развитие в связи с применением новых методов и приемов ( Мареев В.И.,1983|Исин Ж.М.,1985 ).В последние годы появились работы,свидетельствующие об участии полиморфноядерных лейкоцитов ( ПМЯЛ ) в реализации неспецифической защиты.Выявлены значительные изменения метаболизма ПМЯЛ при различных патологических состояниях и заболеваниях С Нагоев Б.С.,І9735І986;Ма.зииг Ю.А.,Старосельская И,Я.,1981 ).С помощью цитоэнзимохимических методов исследования достигнуты определенные успехи в установлении функциональной и метаболической зависимости гранул ІМШ в процессе их жизнедеятельности ( Пигаревский В.Е.,І9785*Маянский А.Н.,Маянский Д.Н., 1989 ).Известно,что активность микробицкдных систем обеспечивается
содержимым азурофильных.и специфических гранул нейтрофилов.в частности кислой и щелочной фосфатазаыи,миелопероксидазой»неферментныт ми катионными белками,лактофериноы,лизоцимом и другими ( Пигаревс. кий В.Е.,1978 ).Состояние цитохимического спектра ШЯЛ отражает р( активные изменения в организые(поэтому оказывается полезным для суждения о глубине и динамике патологических процессов.
При инфекционных заболеваниях весьма ценным представляется изучение внутриклеточных изменений высокоспециализированных клето: периферической крови - ПШІ, основной функцией которых является фа> гоцитоз ( Бахов Н.И. с соавт.а1987,1988 ). В этих условиях нейтро филы выделяют в кровь вещества,обладающие бактерицидными и антитоксическими свойствами ( Нагоев Е.С.,1986 ).
Вышеизложенное позволяет заключить,что изучение механизмов естественной защиты при-чуме с применением цитоэнзимохимических методов позволит глубже проникнуть в процессы изменений'энзимати-ческих и неферментных'систем ІШШ периферической крови в динамике инфекционного процесса и определить значимость этих изменений з с щем иммунном ответе организма ирпрежде всего^в осуществлении фаге цитарной реакции.
Полученные результаты будут способствовать раскрытию механи: мов естественной резистентности на клеточном и ферментативном ур< нлх в эксперименте на лабораторных животных и у грызунов - носиті лей чумы в природных очагах этой инфекции.С помощью разработанны тестов ыоото будет прижизненно судить об уровне естественной реэ: тентности к чуме определенного видаподвида,популяции грызунов и даже отдельной особи.
ЦЕЛЬ НАСТОЯЩЕГО ИССЛЕДОВАНИЯ: выявить некоторые ферыентатив ные механизмы естественного иммунитета у животных с различной
- 5 - . чувствительностью к возбудителю чумы и определить степень участия основных бактерицидных систем ПМЯЛ в защите ыа'кроорганизма на различных этапах течения чумного инфекционного процесса. ОСНОВНЫЕ ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ:
-
Провести сравнение показателей содержания биологически активных веществ и ферментов.играющих ключевую роль в бактерицидных системах ПМЯЛ как в норме,так и в различные периоды течения чумного инфекционного процесса у жизотных с различной чувствительностью к этой инфекции.
-
Определить зависимость, содержания биологически активных веществ и активности ферментов,играющих основную роль в бактерицидных системах 1ХМЯЛ,от дозы заражения и стадии течения чумного инфекционного процесса,а также характер и тяжесть течения болезни от содержания бактерицидных веществ у интактньк животных.
-
Изучить степень участия биологически активных веществ и ферментов в фагоцитозе чумнмх микробов,особенно в его заключительной стадии и дать оценку фагоцитарному процессу ПМЯЛ крови живот-ных,иыеющих различную чувствительность к возбудителю чумы.
-
Выявить особенности гистоморфологических изменений в органах и тканях экспериментальных животных с различной чувствительностью к чуме,зараженных вирулентным штаммом чумного микроба в различные сроки течения инфекционного процесса.
-
Разработать методические подходы к оценке естественной резистентности грызунов с различной чувствительностью к возбудителю чумы с помощью цитоэнзимохимических показателей.
НАУЧНАЯ НОВИЗНА И ПРАКТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ.Впервые проведено исследование по изучению динамики ряда цитоэнзимохимических показателей в ПМЯЛ периферической крови у животных с' различной чувст-
вительностью к возбудителю чумы на разных стадиях инфекционного процесса.Выявлена зависимость тяжести течения инфекционного процесса от содержания в ПШЯ периферической крови биологически активных белков и активности ферментов,являющихся ключевыми факторами их бактерицидных систем.Определено участие некоторых белков и ферментов в реализации естественной резистентности к чумной инфекции.Проведено сравнительное исследование патоморфологии инфекционного процессе у животных с различной чувствительностью к чуме на разных этапах развития заболевания.Получены новые данные,подтверждающие незавершенный характер фагоцитоза при чуме и впервые получены результаты,доказывающке наличие бактерицидного действия биологически активных веществ ПВДЛ периферической крови с помощи экстрацеллюлярного воздействия на чумной микроб.
По результатам проведенных исследований составлены "Методические рекомендации по определению состояния естественного иммунитета к чуме у полуденных песчанок по уровню содержания катион-ьых белков и активности миелоперонсидазн в полиморфноядернцх лейкоцитах периферической крови",утверкденяые Ученым советом Научно-исследовательского противочумного института Кавказа и Закавказья 15 июня 1990 г. ( протокол № ) и "Методические рекомендации по определению состояния естественного иммунитета к чуме у горных сусликов ло уровню содержания катионных белков и активности миелопероксидазы в полиморфноядерных лейкоцитах периферической кров утвержденные Ученым советом того же института 29 мая 1991 г.( пр токол КЗ ).
Методические рекомендации реализованы в исследовательской практике Научно-исследовательского противочумного института Кавказа 'и Закавк83ья,Кабардинской ПЧС,Дагестснской ПЧС,Усальскоп ДО
а также в учебном процессе при чтении лекций по иммунологии чумы iia курсах специализации врачей по особо опасным инфекциям в Сред- . неазиатском научно-исследовательском противочумном институте.
При проведении экспериментов оформлено авторское свидетельство № 1302627 "Способ выявления лизосомных катионных белков в ней-трофильных гранулоцитах крови" и 4 рационализаторских предложения.
АПРОБАЦИЯ РАБОТЫ.Основные фрагменты диссертации доложены и
обсуждены: ч
-
На межлабораторных научных конференциях Научно-исследовательского противочумного института Кавказа и Закавказья ( 1989 -1991 r.J.
-
На заседании Ставропольского краевого отделения Всесоюзного научного общества патологоанатомов ( 1991 г. ).
-
На межреспубликанской научной конференции "Современные аспекты профилактики зоонозньк инфекций" ( Ставрополь,І99Ї г. ).
Диссертационная работа апробирована на межлабораторной научной конференции Научно-исследовательского противочумного института Кавказа и Закавказья 18 февраля 1992 года.
ПУБЛИКАЦИИ.Материалы диссертации отражены в 10 опубликованных статьях и тезисах.
ОБЪЕМ И СТРУКТУРА даССЕРГАЦИИ.Диссертация состоит из оглавления) введения, обзора литературы,изложения материалов и методов исследования,глав собственных исследований,заключения,выводов и списка литературы,включающего 176 работ отечественных авторов и 95 работ зарубежных.Общий объем диссертации 142 страницы.Материалы исследований иллюстрированы 24 таблицами,4 рисунками и 13 микрофотографиями.
_ 8 -
-
Катиокные белки и миелопероксидаза полиморфноядерных лейкоцитов периферической крови являются одними из основных факторов способствующих реализации естественной защиты макроорганизма от возбудителя чумы.
-
Естественная резистентность к возбудителю чумы у исследуе мых животных обеспечивается высоким исходньм содержанием основных бактерицидных факторов полиморфноядерных лейкоцитов - катионными белками и миелопероксидазой.Одним из основных механизмов реализации функции защиты является экстрацеллюлярное воздействие бактеру цидньк веществ полиморфноядерных лейкоцитов на возбудителя чумы.
