Введение к работе
Актуальность проблемы. Клинический анализ крови является одним из наиболее распространённых клинико-лабораторных исследований в медицинской практике. Многие десятилетия при изучении гематологических показателей пользовались ручными методами. За последние 15-20 лет произошло существенное развитие технологии и аппаратуры для автоматического исследования клеток крови на принципе проточной цитометрии. Достигнут достаточно высокий уровень автоматизации этих исследований. Это касается всех стадий проведения анализа - от взятия исследуемой пробы до представления конечных результатов. В развитых странах мира автоматический анализ крови почти полностью вытеснил ручные и полуавтоматические методы. В нашей же стране доля ручного труда при выполнении клинического анализа крови остаётся ещё достаточно высокой. Использование счётчиков значительно облегчает труд работников лабораторий, повышает его производительность, а кроме того улучшает качество и точность анализов.
Преимуществами автоматического анализа крови являются: высокая производительность (до 100 и более проб в час), небольшой объём крови (12-50мкл), оценка более 20 показателей, вместо 10-12 при обычном анализе крови, графическое представление распределения клеток (гистограммы, скетограммы), высокая точность исследования, так как подсчёту подвергаются несколько тысяч клеток из одной пробы. Проточные счётчики используются при обследовании доноров (зарубежный опыт) и практически нет данных об их применении для оценки и стандартизации получаемых компонентов крови, что крайне необходимо для проведения современной компонентной терапии.
Цель настоящей работы оценить возможность использования современного проточного счётчика среднего класса «Cobas Micros 18 ОТ», в обследовании доноров и дать количественно-качественную характеристику цельной крови и получаемых из неё компонентов.
Основные задачи исследования.
-
Сравнительный анализ параметров крови доноров, полученных на гематологическом анализаторе «Cobas Micros 18 ОТ» и при световой микроскопии.
-
Количественно - качественная характеристика полученных клеточных компонентов крови с применением счётчика среднего класса «Cobas Micros 18 ОТ» и последующим анализом эритроцитов на сканирующем электронном микроскопе.
-
Оценка чистоты полученных компонентов крови (характеристика клеточных примесей) с использованием счётчика среднего класса «Cobas Micros 18 ОТ".
Научная новизна работы. Оценены результаты использования гематологического анализатора в службе крови. Получены данные:
обследования доноров крови, количественная и качественная характеристика цельной крови в мешке, чистоты фракций плазмы, концентрата эритроцитов, концентрата тромбоцитов. Дана морфофункциональная оценка эритроцитов при длительном хранении концентрата эритроцитов в растворах SAGM, Адсол и CPD.
Теоретическое н практическое значение. На основании проделанной работы даны практические рекомендации по использованию гематологического анализатора «Cobas Micros 18 ОТ" для обследования доноров крови, подсчёта гранулоцитов, эритроцитов, тромбоцитов при проведении современной компонентной терапии.
Реализация результатов исследования. Внедрение полученных результатов в практику осуществляется следующими путями:
-
Результаты исследований опубликованы в печатных изданиях, докладывались научных и научно-практических конференциях.
-
Проведено внедрение гематологического анализатора «Cobas Micros» на станциях переливания крови (7 ГКБ г.Москвы, ГНЦ РАМН).
3. Разработана «Инструкция по фракционированию
консервированной крови с использованием контейнеров Оптипэк,
полуавтоматических плазмоэкстракторов Оптипресс и аппаратов для
стерильного соединения трубок», утверждённая Министерством
здравоохранения РФ, от 29.06.1999г.
Положения выносимые на защиту.
-
Проведена апробация и разработаны рекомендации использования гематологического анализатора среднего класса для обследования доноров, а также для эффективного контроля за чистотой и качеством получаемых компонентов крови.
-
Получены данные, характеризующие эритроциты при длительном хранении концентрата эритроцитов в растворах SAGM, Адсол и CPD, свидетельствующие о достоверном снижении количества эритроцитов на 10-11% к 21-41 суткам хранения в растворе SAGM. Электронно-микроскопическое изучение эритроцитов, хранящихся в растворах SAGM, Адсол и CPD, показало однотипное изменение морфологии этих клеток - трансформация осуществлялась по пути диск-эхиноцит-сфера. Отличие заключалось в количественном соотношении различных форм эритроцитов в одни и те же сроки хранения и времени уменьшения дискоцитов. После помещения эритроцитов (на 28-42 сутки хранения) в свежую плазму, наблюдалось некоторое восстановление эхиноцитов в дискоциты, более эффективное в случае хранения клеток в растворе Адсол.
-
Количественная и качественная характеристика концентратов тромбоцитов зависит от метода их получения. Наилучшим является концентрат тромбоцитов, полученный на сепараторе крови, при котором средний выход тромбоцитов составляет 540±14х109, а примесь лейкоцитов 0,01±0,0015х109/л.
Апробация диссертации. Материалы диссертации докладывались и обсуждались на: V съезде специалистов по лабораторной диагностике (Москва, 1995г.); Конференции «Анализ изображения клеток системы крови: настоящее и будущее» (Москва, 1996г.); Симпозиуме «Национальные дни лабораторной медицины России» (Москва 1997г.); XVI Научно-практической конференции: "Морфометрия в диагностике болезней" (Москва, 1998г.).
Публикации. По теме диссертации опубликовано 18 научных работ.
Объём и структура работы. Диссертация изложена на 125 листах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, главы собственных данных, заключения, выводов, списка литературы. Работа содержит 16 таблиц и 32 рисунка.
