Содержание к диссертации
стр.
ВВЕДЕНИЕ 4
Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 8
1.1 .Биологическая роль железа и его обмен в организме 8
-
Этиопатогенез и основные проявления железодефицитной . -анемии
-
Моделирование железодефицитной анемии 19
-
Принципы терапии железодефицитной анемии 24
-
Арабиногалактан лиственницы - перспективная полимерная матрица для иммобилизации лекарственных 28 средств
-
Синтез и свойства ферроарабиногалактана (феррогала) 31 Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ 33
-
Распределение животных по сериям 33
-
Экспериментальные модели анемических синдромов 35
-
Анемия, вызванная введением десферала 35
-
Алиментарная анемия 35 2.2.3 Комбинированная анемия 36 2.2.4. Гемолитическая анемия 37
2.3. Лабораторные методы исследования 37
-
Определение содержания гемоглобина 37
-
Определение количества эритроцитов в периферической „„
крови
-
Подсчет цветового показателя 39
-
Определение железа сыворотки крови 39
-
Определение содержания железа в органах и тканях 39
2.4. Биохимические методы исследования
А. Определение содержания гидроперекисей липидов 40
Б. Определение концентрации малонового альдегида
-
Гистологические методы исследования 41 2.5.1. Морфометрические методы исследования 41
-
Используемые вещества дозы и схемы введения 42
-
Методы статистической обработки результатов 42
Глава 3. ЗАКОНОМЕРНОСТИ ИЗМЕНЕНИЙ
ПОКАЗАТЕЛЕЙ КРАСНОЙ КРОВИ, МЕТАБОЛИЗМА
ЖЕЛЕЗА И СТРУКТУРЫ ОРГАНОВ-МИШЕНЕЙ ПРИ 43
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫХ ЖЕЛЕЗОДЕФИЦИТНЫХ
АНЕМИЯХ И СРАВНИТЕЛЬНЫЙ АНАЛИЗ МЕТОДОВ ИХ КОРРЕКЦИИ
-
Закономерности изменений показателей красной крови, метаболизма железа и структуры органов-мишеней при .~ десфераловой анемии и сравнительный анализ методов их коррекции
-
Закономерности изменений показателей красной крови, метаболизма железа и структуры органов-мишеней при _. алиментарной анемии и сравнительный анализ методов их коррекции
-
Закономерности изменений показателей красной крови, метаболизма железа и структуры органов-мишеней при 66 комбинированной анемии и введении феррогала
Глава 4. МЕХАНИЗМЫ ИЗМЕНЕНИЙ ПОКАЗАТЕЛЕЙ
КРАСНОЙ КРОВИ И АКТИВНОСТИ ПРОЦЕССОВ
СВОБОДНОРАДИКАЛЬНОГО ОКИСЛЕНИЯ ПРИ 74
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ ГЕМОЛИТИЧЕСКОЙ
АНЕМИИ И ВВЕДЕНИИ АРАБИНОГАЛАКТАНА
ЗАКЛЮЧЕНИЕ 85
ВЫВОДЫ 94
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ 95
Введение к работе
Актуальность
Биологическая потребность в железе обусловлена его ролью в процессах кроветворения, дыхания и окислительно-восстановительных реакциях (Идельсон Л.И., 1970; Алексеев Г.А., 1983; Гольдберг В.Е., Дыгай A.M., Новицкий В.В. 1992; Гришин А.В., 1996 и др.). Недостаток железа у человека проявляется двумя основными синдромами - клеточного (тканевого) дефицита железа и железодефицитной анемии (Колошейнова Т.И., 1989; Брусен-цов Н.А., 1996 и др.). Последняя является самой распространенной формой малокровия, составляющей около 80 % всех анемий (Крякунов К.Н., 1997; Пугина С.А., 1998 и др.). По данным ВОЗ число людей с дефицитом железа во всем мире достигает 200 млн. человек. В России около 10 % женщин детородного возраста страдают данной патологией, а у 30 % из них наблюдается скрытый дефицит железа (Петров В.Н., 1973; Дворецкий Л.И., 2000 и др.).
Существуют различные методы воспроизведения экспериментального малокровия, позволяющие исследовать механизмы развития анемических синдромов, однако все они не лишены недостатков, поэтому разработка новых и совершенствование известных моделей анемий продолжает оставаться насущной задачей современной патофизиологии. Актуальной проблемой является также изыскание наиболее эффективных патогенетически обоснованных принципов коррекции железодефицитных состояний (Старинова Т.Т., 1974; Гольдберг Е.Д., 1986; Пушкарев В.П., 1991; Зубцов Ю.Н., Литвинова Е.В., 1997; de Oliveira J.E., Ventura S., 1997; Annibale В., Severi С, 2001).
Современные методы лечения, обеспечивающие компенсацию дефицита железа, имеют ряд изъянов. Они требуют длительного приема препаратов в избыточном количестве из-за их низкой усвояемости, что нередко сопровождается побочными явлениями (Якимова Е.Г. 1997; Хайров Х.С., 1998; Castro Pazos М., 1996; Нои С.С, Wu S.C., 1999). Для устранения нежелательных последствий используют комплексы солей железа с углеводами, напри- мер с мальтозой (феррум Лек), глюкозой (феррлицит) и др. Однако и при этом могут проявляться негативные эффекты, обусловленные оксидативным стрессом и лизосомотропным действием препаратов (Короленко Т.А., 1983; Поспелова Т.И. и др., 1992; Breymann С, 1996). Кроме того, при применении известных лекарственных препаратов не всегда происходит заполнение органов-депо железом, следовательно, не обеспечивается воздействие на ведущее звено патогенеза анемии, сохраняется прелатентный или латентный дефицит железа. Существенный интерес представляет поиск и апробация таких приемов патогенетической терапии, которые позволяют осуществлять адресную доставку лекарств к клеткам - мишеням (Платэ Н.А., Васильев А.Е., 1986; Jo-sephson L., Groman E.V., Jung С, Lewis J.M., 1994).
В соответствии с вышеизложенным целью работы явилось усовершенствование экспериментальных моделей железодефицитных анемий, раскрытие закономерностей и механизмов нарушений в системе эритроцитов и метаболизме железа, сравнительный анализ различных патогенетически обоснованных принципов коррекции изучаемых форм патологии.
Для реализации поставленной цели последовательно решались следующие задачи:
Разработать новые и усовершенствовать известные экспериментальные модели анемических состояний.
Раскрыть закономерности и механизмы нарушений в системе эритроцитов и метаболизме железа при экспериментальных железодефицитных анемиях.
Провести сравнительный анализ эффективности различных способов коррекции искусственного дефицита железа.
Экспериментально обосновать гипотезу о наличии реципрокных взаимоотношений между клетками органов, депонирующих железо, и арабинога-лактаном, являющимся матрицей нового железосодержащего соединения - феррогала.
5. Исследовать саногенетический эффект арабиногалактана при экспериментальной гемолитической анемии.
Научная новизна исследования
Впервые разработаны модели алиментарной и комбинированной анемии с помощью диеты, предложенного нами состава. Выявлено, что в патогенезе анемии, вызванной длительным пищевым феррумдефицитом, ключевую роль играет истощение запасных фондов железа.
Впервые патогенетически обоснована эффективность применения фер-рогала при железодефицитных анемиях.
Получена новая информация в пользу гипотезы о наличии реципрок-ных отношений между клетками системы крови и арабиногалактаном -матрицей феррогала.
Приоритетными являются данные о том, что одним из важных саноге-нетических эффетов арабиногалактана является его антиоксидантная активность.
Теоретическая и практическая значимость
Разработана методика воспроизведения железодефицитной анемии с помощью безжелезистой диеты на основе доступного пищевого сырья. Выявлены особенности патогенеза экспериментальных анемий, характеризующиеся различной выраженностью дефицита депонированного железа, и зависимость эффективности терапии от степени истощения органов-депо ионами этого металла.
Впервые продемонстрирована возможность коррекции нарушений системы эритроцитов и метаболизма железа феррогалом, имеющим арабинога-лактановую основу, афинную к рецепторам клеток системы крови. Показано, что саногенетический эффект арабиногалактана при гемолитической анемии обусловлено его антиоксидантной активностью.
Получено положительное решение о выдаче патента на изобретение «Средство, обладающее противоанемической и иммуномодуляторной активностью», заявка № 2001120324/14 (021568) приоритет от 20.07.2001.
Положения, выносимые на защит}'
Ведущим звеном патогенеза экспериментальных железодефицитных анемий, вызванных длительной безжелезистой диетой и ее сочетанием с кро-вопотерей, является глубокое истощение запасных фондов железа, неподдающееся в достаточной степени коррекции железосодержащими препаратами.
Подтверждена гипотеза о возможности существования реципрокных отношений между арабиногалактаном, являющимся матрицей феррогала, и клетками системы крови, что и определяет антианемическую активность этого соединения.
Одним из важных саногенетических эффектов арабиногалактана при гемолитической анемии является его антиоксидантная активность.
Структура и объем диссертации
Диссертация изложена на 128 страницах, написана по традиционному плану, включает 4 главы и список литературы из 271 научных работ, в том числе 137 зарубежных авторов. Результаты представлены в виде 8 таблиц, 42 рисунков (графики, диаграммы и микрофотографии). Полученные данные обработаны статистически с применением критерия Стьюдента.
Апробация работы и публикации
Материалы диссертации представлены на III съезде патофизиологов в Санкт-Петербурге (2000 г.), международной конференции «Поиск и внедрение новых лекарственных препаратов и организация форм фармацевтической деятельности» (Иркутск, 2001 г.), конференции «Интеграция фундаментальной науки и высшей школы в устойчивом развитии Сибири» (Иркутск, 2001 г.); итоговой научной конференции ИГМУ с международным участием (Иркутск, 2002г.), заседании Иркутского городского общества патофизиологов (2002, 2003гг.).
По теме исследования опубликовано 10 работ, из них 1 - патент на изобретение, 1 - принята к печати.
Полученные результаты внедрены в учебный процесс на кафедре патологической физиологии и ИГМУ.
