Введение к работе
Актуальность темы: Экономические трудности в период кризисов в стране значительно влияют на лекарственное обеспечение населения. Дефицит лекарственных препаратов и их высокая стоимость настоятельно требуют, с одной стороны, поиска новых доступных источников лечебно-профилактических средств, с другой, - совмещения их терапевтической активности с пищевыми свойствами в качестве добавок.
Среди потенциальных источников таких препаратов наше внимание привлек трепанг японский - Stichopus japonicus Selenka, широко распространенный в Дальневосточном регионе, являющийся весьма прибыльным объектом морского промысла и издавна пользующийся огромной популярностью у населения Азиатско-Тихоокеанского региона, особенно в Японии. Он используется не только как деликатесный продукт в гастрономических целях, но и как стимулятор жизненных сил организма человека. Поэтому неслучайно трепанг был образно назван "морским женьшенем".
Однако, будучи довольно хорошо изученным по содержанию химически дифференцированных, как правило, очищенных веществ и их биологическому действию, например, в отношении содержащихся в нем (Еляков Г.В. с соавт., 1968; Еляков Г.В., Стоник В.А., 1986 и др.) и его микрофлоре (Шульгина Л.В., Мотавкина Н.С., Сыч Г.С, 1984) гликозидов, трепанг японский оказался неоправданно обойденным в нативном и полунативном состоянии. Неисследованными оказались простейшие комплексные экстракты из этого морского животного. Это и определило нель и задачи наших научных поисков.
Цель настоящей работы заключалась в получении комплексных экстрактов из трепанга японского и оценке механизмов их действия на микробы, инфекционный процесс и защитные силы макроорганизма.
Для достижения указанной цели были поставлены и решены следующие конкретные задачи:
-
Приготовление комплексных экстрактов из трепанга японского - химического (водно-этанольная вытяжка) и термического (выварочные воды), проверка их токсичности.
-
Изучение антимикробного действия комплексных экстрактов из трепанга японского на микроорганизмы разных таксономических групп - бактерии, гри-
бы, вирусы.
3. Проверка биостимулирующего влияния комплексных термических и хи
мических экстрактов из трепанга японского на факторы общей неспецифй-
ческой реактивности в эксперименте при естественном вскармливании ими жи
вотных в виде пищевых добавок и введении парентеральным путем:
на клеточно-фагоцитарную защиту организма мышей от инфекции и ее качественно-количественную характеристику;
на гуморальные неспецифические факторы резистентности организма подопытных животных к инфекции (лизоцим, бета-лизины, комплемент).
-
Исследование особенностей действия комплексных экстрактов из трепанга японского на факторы специфического прививочного иммунитета у мышей (клеточность, число антитело- и розеткообразующих клеток селезенки, уровень специфических антител - гемагглютининов).
-
Выяснение влияния комплексных экстрактов из трепанга японского на развитие аллергии - гиперчувствительность немедленного типа у морских свинок и гиперчувствительность замедленного типа у мышей.
-
Проследить влияние комплексных экстрактов из трепанга японского на процесс элиминации патогенных микроорганизмов и выживаемости животных при экспериментальной сальмонеллезной инфекции у мышей.
Научная новизна и теоретическая ценность работы заключалась в сути комплексно проведенных экспериментов.
Впервые выявлены и оценены механизмы исцеляющего действия комплексных экстрактов из трепанга как биостимулятора жизнестойкости макроорганизма при инфекционном процессе.
Впервые установлена возможность энтеральной стимуляции разнообразных защитных сил организма - клеточных и гуморальных, естественных неспецифических и искусственных специфических в ходе иммунизации.
Впервые экспериментально доказаны перспективы использования трепанга японского как пищевых добавок биостимулирующего назначения при инфекционном процессе.
Впервые дана комплексная характеристика антимикробного действия термических и химических экстрактов из трепанга японского по отношению к разным группам микроорганизмов и показана их эффективность в условиях пря-
мого контакта возбудителей сальмонеллеза с макроорганизмом за счет его очищения от инфекции.
Впервые установлено тормозящее действие комплексных экстрактов из трепанга японского на гиперчувствительность немедленного типа и стимулирующее - на гиперчувствительность замедленного типа в процессе развития аллергии.
Практическая значимость настоящей работы определяется научной новизной полученных результатов и решением ряда задач прикладного значения:
доказательством всестороннего влияния комплексных экстрактов из трепанга японского на разные механизмы защитной реактивности макроорганизма, что определяет разнообразие показаний для их практического применения;
установлением простоты биостимуляции защитных сил организма через энтеральные пути введения комплексных экстрактов из трепанга японского и перспективы их использования как пищевых добавок;
доказательством избирательности антимикробного эффекта экстрактов и преимущественного действия в отношении определенных видов кишечной группы, что определяет возможность и целесообразность их применения в лечебно-профилактических целях без нарушения гомеостатического равновесия между- нормальными обитателями кишечника и без формирования дисбактери-оза;
обнаружением широкого диапазона антимикробного действия комплексных экстрактов из трепанга японского в отношении разных таксономических групп, что определяет целесообразность их употребления в качестве лечебно-профилактических добавок при диетическом питании инфекционных больных;
немаловажное значение имеет и возможность организации безотходного производства переработки трепанга. Совокупность элементов научной новизны полученных наблюдений и их практической ценности может обеспечить в этом направлении ощутимый медико-социальный и экономический эффект.
Апробация материалов диссертации проведена в ряде докладов и опубликованных сообщений на региональных конференциях молодых ученых (Владивосток, 1995, 1996, 1997), ХШ республиканской конференции с международным участием по проблеме "Факторы клеточного и гуморального иммунитета при физиологических и патологических состояниях" (Челябинск, 199 ).
Они отражены в пяти публикациях и двух работах, отосланных на депонирование в ВИНИТИ. Кроме того, полученные достижения защищены тремя авторскими удостоверениями на рационализаторские предложения (Удостов. БРИЗ ВГМУ № 2279, № 2280 от 09.01.97 г., № 2285 от 13 .01.97 г.) и 1 заявкой на изобретение. Обзорные материалы по литературе внедрены в учебный процесс кафедр микробиологии, вирусологии, иммунологии Владивостокского и Дальневосточного (г. Хабаровск) Государственных медицинских Университетов, Благовещенской и Читинской медицинских Академий Российской Федерации.
Структура диссертации традиционна. Она состоит из введения, 1 главы обзора литературы с привлечением 297 источников (220-отечественных, 77-иностранных), 7 глав собственных исследований, заключения, общих выводов, рекомендаций для внедрения результатов работы в науку и практику, указателя литературы.
Текст диссертационной работы изложен на 234 страницах машинописи, проиллюстрирован 35 таблицами, 9 рисунками, 4 рабочими схемами, 2 приложениями.
Положения, выносимые на защиту
-
Комплексные экстракты (водно-этанольный и термический - выварочные воды) из трепанга японского обладают широким диапазоном антимикробной активности, лишая жизнеспособности различные виды грибов, вирусов и некоторые виды бактерий, принадлежащие к разным таксономическим группам. Избирательность антимикробного эффекта исключает их использование для создания питательных сред узкого целевого назначения, но определяет возможность их широкого применения.
-
Комплексные экстракты из трепанга японского при энтеральном и парентеральном использовании на мышах вызывают антимикробный эффект, стимуляцию неспецифических клеточных (фагоцитоз) и гуморальных (лизопим, комплемент, бета-лизины) факторов резистентности к инфекции, специфические иммунологические сдвиги, обеспечивая на модели экспериментального сальмонеллеза Salm. typhimurium у мышей их выживаемость и элиминацию возбудителей из организма.
-
Комплексные химические и термические экстракты из трепанга япон-
ского в условиях иммунного ответа у мышей усиливают накопление и дифференциацию иммунокомпетентных клеток в селезенке, стимулируют созревание антитело- и розеткообразующих клеток, ускоряют синтез специфических антител. Они обладают ингибирующим действием по отношению к развитию аллергии немедленного типа и умеренно стимулируют замедленный гиперергический эффект, что особенно важно при инфекционном процессе.
4. Совокупность антимикробных функций комплексных экстрактов из трепанга японского с их биостимулирующим действием и иммунокоррегирующим эффектом может быть применена для обогащения диетического питания и лечебно-профилактических целей по отношению к больным с инфекционной патологией, не вызывая угнетения нормальной кишечной микрофлоры.
