Введение к работе
Актуальность теми. Сетчатая пятнистость ячменя, возбудителем кото-торой; является несовершенный гриб Drechslera teres, считается од-;вім и'з"самнх вредоносных заболеваний ячменя. Борьба с этой Солоз-їью-осложняется чрезвичайной изменчивостью этого патогена,приводя-цей к возникновению новых рас гриба и, соответственно, к потери устойчивости сортов ячменя. В связи с этим, изучение механизмов из-ленчивости D.teres представляет собой не только теоретический, но і практический интерес. Поскольку в жизненном цикле гриба паразити-шской является несовершенная стадия - D.teres, а половой процесс ттруднен ив природе встречается крайне редко, мокно предположить эещающую роль мутаций и соматической гибридизации в изменчивости ітого гриба. Предварительные исследования по гетерокариозу D.teres [Коновалова и др.,1981) позголяют сделать вывод о наличии у этого риба вегетативной несовместимости. В связи с этим, возникла необ-лдимость поиск? новых методов проведения генетического анализа риба D.teres. Нам представляется, что метод слияния протопластов, :ироко применяемый для гибридизации грибов, во многом облегчит ра-оту по изучению наследования и изменчивости наиболее важных при-наков этого патогена, таких как вирулентность и агрессивность, ез знания причин появления которых немыслим научно-обоснованный одход к созданию устойчивых к возбудителю сортов ячменя. ель и задачи работы, основной целью данного исследования было зученмо изменчивости гриба D.teres при соматической гибридизации: олученио гибридных штаммов с использованием генетически маркиро-анных линий и анализ наследования морфологических и физиолого-био-имичсских свойств патогена. В нашей работе были поставлены следу-иие задачи:
).Изучить летальное и мутагенное действие УФ-лучей и химического
утагена 6-гидроксиламинопурина (ГАП). t»
).Получить коллекцию маркированных штаммов гриба.
).Разработать методы получения, регенерации и слияния протоплас-
зв гриба. . ,
(.Получить гибридные штаммы гриба методом анастомозировакия гиф слияния протопластов.
I.Провести генетический анализ соматических гибридов, полученных
результате анастомозов гиф и слияния протопластов,
і.Изучить паразитические свойства индуцированных мутантов к гиб-
[дных штаммов гриба. ' '
4 Цаучная новизна. Впервые изучено летальное и мутагенное действие УФ-лучей и ГАП на грибе D.teres и получена коллекция морфологичор-ких и ауксотрофных мутантов. При получении гетерокарионов D.teres обнаружена вегетативная несовместимость, выражающаяся в неспособности некоторых'штаммов гриба формировать гетерокарионы при совместном росте на минимальной среде. Впервые разработан метод получения, регенерации и слияния протопластов, которий значительно облегчает соматическую гибридизацию .у этого гриба и способствует преодолению вегетативной несовместимости. Впервые методами соматической гибридизации получены гибридные штаммы и проанализированы их генетические свойства. Проведено испытание вирулентности индуцированных мутантов и гибридов, получешшх в результате слияния гиф и слияния протопластов.
Практическая ценность и. теоретическое значение работы. Проведенные исследования показали широкую вариабельность гриба D.teres. Установлено, что вамшм фактором изменчивости является мутационный процесс. Гетерокариоз и парасексуалышй процесс также вносят значительный вклад в изменчивость' этого гриба, т.к. в результате пересортировки ядер при бесполом размножении многоядерного'мицелия могут возникать новые формы. Отработанные методы получения, регенерации и слияния протопластов могут быть использованы при работе с другими представителями p.Drechslera. Показана возможность использования слияния протопластов для преодоления барьеров вегетативной несовместимости у D.teres и конструирования штаммов для использованш в фитоиммунологических работах при создании болезнеустойчивых сортов.
Апробация работы. Результаты исследований доложены на конференции молодых ученых ВИЗР (1980), на микологической секции ВБО (1983), на 3-ей Всесоюзной конференции "Грибы в биогеоценозах" (Ташкент, 1985), на семинарах лаборатории электронной микроскопии ВНИИСХМ (1989 - 1990г).
Объем работы. Диссертация изложена на Л5"-5"страницах машинописного текста и состоит из введения,'обзора литературы, раздела "Материалы и метода", 4-х глав, содержащих результаты экспериментальной работы, заключения и выводов. В работе Я9 таблиц, 7- рисунков. Список литературы включает Л9? наименований.
