Введение к работе
Актуальность проблемы. Рак предстательной железы (РПЖ) занимает третье после рака легких и кожи место по частоте заболеваемости и четвертое (после рака легких, опухолей желудка и мочевыводящей системы) по онкологической смертности у мужчин. В частности, в Санкт-Петербурге РПЖ занимает второе место по заболеваемости среди всех злокачественных опухолей у мужчин, а в динамике показателей смертности - первое. В динамике за 10 лет с 2000 по 2010 годы заболеваемость РПЖ растет, и в 2010 году она составила 15,6 на 100 тыс. мужского населения, тогда как в 2000 году это показатель был равен 9,8 (Чиссов В.П., Старинский В.В., Петрова Г.В. 2009). РПЖ является заболеванием сложной этиологии, молекулярно-биологические механизмы происхождения которого еще недостаточно изучены на сегодняшний день. На его возникновение и течение сильно влияют как факторы генетической предрасположенности, так и факторы окружающей среды. Предстательная железа является резервуаром для инфекции различной этиологии, в том числе и вирусной. Несмотря на длительный период с момента формулирования вирусной теории канцерогенеза отечественным ученым Зильбером Л.А. (1968), роль вирусов в этиологии и развитии онкологических заболеваний остается не до конца выясненной.
Многие вирусы, инфицирующие человеческие ткани, обладают онкогенным и онкомодулирующим эффектами. Значительная доля таких вирусов относится к семействам Herpesviridae и Papovaviridae. В данном контексте изучение инфицированности ткани ПЖ вирусами этих семейств позволит дать оценку их возможному вкладу в процесс канцерогенеза предстательной железы, а также послужить основой для разработки новых прогностических и терапевтических подходов.
В качестве представителей указанных выше вирусных семейств для изучения инфицированности ткани ПЖ были выбраны цитомегаловирус
человека (HCMV), вирус Эппштейна-Барр (EBV), вирус герпеса человека 8-го типа (HHV8) и папилломавирусы (HPV) человека 16-го и 18-го типов.
Папилломавирус человека является наиболее широко изученным патогеном в исследованиях по определению возможной инфекционной природы РПЖ. Это связано с тем, что HPV является главным этиологическим агентом в возникновении рака шейки матки, а также ряда злокачественных новообразований аногенитальной локализации: вульвы, влагалища, ануса и полового члена (Guiliano et al., 2008).
Некоторые вирусы семейства Herpesviridae представляют интерес в качестве возможных инициаторов карциногенеза ПЖ. Одним из них является HCMV. Этот вирус, как и HPV, является инфекционным агентом, передающимся половым путем и, как следствие, может проникать в ткань ПЖ. Показано, что он обладает рядом онкогенных свойств in vitro: усиливает мутагенез, ускоряет прохождение клеток по клеточному циклу, увеличивает клеточную инвазивность (Samanta et al., 2003). В отличие от EBV и HHV8, HCMV ранее не был ассоциирован ни с одним злокачественным новообразованием в человеческом организме, но в последнее время HCMV рассматривается в качестве онкомодулятора, в том числе и процессов малигнизации при РПЖ.
Тот факт, что HHV8 является этиологическим агентом саркомы Капоши, а также факт его обнаружения в ткани ПЖ (Monini et al., 1996) побудили ряд исследователей к изучению возможной роли этого вируса в карциногенезе ПЖ. Однако, экспериментальные данные, которые были получены различными группами исследователей, работавших в этом направлении, имеют противоречивый характер и нуждаются в подтверждении.
Вирус Эппштейна-Барр (EBV) - этиологический агент лимфомы Беркитта, был впервые обнаружен Grinstein с соавторами в клетках карциномы простаты. Авторами было показано его наличие в фокусах интраэпителиальной неоплазии ПЖ, что позволяет предполагать его
определённую роль в развитии РПЖ. В связи с этим EBV был также включен в исследование.
Таким образом, результаты данного диссертационного исследования могут внести определенную ясность в во многом противоречивую картину взаимодействия вирусов с тканью ПЖ и их участия в инициации и развитии онкологического процесса и дополнить данные представленные другими исследователями ранее.
Цель исследования:
Целью настоящей работы является изучение инфицированности ткани предстательной железы вирусами семейства Herpesviridae (CMV, EBV, HHV-8) и папилломавирусом (HPV) у больных раком предстательной железы на ранних стадиях развития процесса.
Задачи, решаемые в работе:
-
Оценить инфицированность ткани ПЖ вирусами HCMV, EBV, HHV8 и HPV двумя независимыми методами - ПЦР и in situ гибридизацией.
-
Оценить распределение вирусов в опухолевых и прилегающих условно нормальных клетках предстательной железы.
-
Оценить распределение вирусов в клетках эпителия и стромы предстательной железы.
-
Сравнить инфицированность различными типами вирусов в зависимости от стадии РПЖ.
Научная новизна работы
Впервые на архивных образцах ткани ПЖ было проведено комплексное сравнение данных по инфицированности ПЖ четырьмя различными вирусами при помощи двух независимых методов - ПЦР и гибридизации in situ. Было выявлено некоторое отличие данных, полученных двумя этими методами, что свидетельствует о необходимости использования нескольких диагностических методик для получения более точных результатов
исследования. Методом гибридизации in situ было выявлено наличие вирусных ДНК не только в клетках железистого эпителия, но и в стромальных клетках. Апробация работы.
Результаты работы доложены на17 и 19 Международной конференциях «СПИД, рак и общественное здоровье», (г. С.-Петербург, 2008, 2010 ), 6 и 7 Российских конференциях по фундаментальной онкологии «Петровские чтения» (Санкт-Петербург, 2010, 2011); 7 съезде онкологов России (Москва, 2009 ); VII Всероссийской научно-практической конференции с международным участием «Молекулярная диагностика - 2010» (Москва, 2010). Публикации
По теме диссертации опубликовано 11 научных работ, из них - 6 в реферируемых журналах ВАК. Структура и объём диссертации.
Диссертация изложена на 103 страницах машинопечатного текста и состоит из введения, обзора литературы, глав материалов и методов, результатов собственных исследований, обсуждения данных и выводов.
Диссертационное исследование выполнено с использованием оборудования ЦКП «Биотехнологический центр исследования экспрессии генома» ФГБУ РНЦРХТ, при финансовой поддержке Минобрнауки России в рамках государственного контракта №16.552.11.7021.
