Введение к работе
Актуальность темы. Bordetella bronchiseptica – инфекционный агент, вызывающий бордетеллез домашних животных.
Бордетеллез - высококонтагиозное, инфекционное заболевание мелких домашних животных, характеризующееся общим недомоганием, развитием острого воспалительного процесса слизистой оболочки респираторного тракта, сухим, болезненным кашлем, рвотой, прогрессирующим исхуданием и гибелью животных (Lopez, 1952; Pittman, 1984; Deeb et al., 1990; Dugal et al., 1991). Первые сообщения об ассоциации бордетеллеза с другими болезнями собак были сделаны в начале ХХ века, значительный процесс в понимании болезни наблюдается в последние десятилетия (Molina Gonzalez, 2006).
В нашей стране указанная болезнь не изучена, диагностируется как патология невыясненной этиологии, и методы лабораторной диагностики бордетеллеза домашних животных не разработаны.
Для разработки бактериологических схем и методов идентификации возбудителя возникает необходимость создания селективно-диагностической среды, тест-системы, конструирование антигенного биопрепарата для антигенного типирования бактерий вида B. bronchiseptica. Создание системы бактериологической диагностики бордетеллёза, включающей комплекс бактериологических и антигенных тестов, позволит своевременно и качественно выявлять и идентифицировать микробный агент и, следовательно, эффективно назначать лечебно-профилактические мероприятия.
Работа является частью комплексных исследований кафедры микробиологии, вирусологии, эпизоотологии и ветеринарно-санитарной экспертизы Федерального государственного бюджетного образовательного учреждения высшего профессионального образования «Ульяновская государственная сельскохозяйственная академия» (номер Государственной регистрации 0120.01157936).
Цель и задачи исследования. Цель – разработка антигенного биопрепарата и тест-системы для бактериологической идентификации бактерий вида B.bronchiseptica выделенных у домашних животных.
Исходя из цели исследования, были поставлены следующие задачи:
-
Исследовать биологические свойства характерные для B. bronchiseptica, и на основе полученных результатов предложить для решения поставленной цели микробиологические тесты.
-
Создать антигенный биопрепарат для типирования бактерий вида B.bronchiseptica по антигенному составу.
-
Сконструировать селективно-диагностическую среду для выделения и первоначального типирования бактерий B. bronchiseptica по культуральным и биохимическим свойствам.
-
Разработать схему выделения и идентификации указанной бактерии от домашних животных.
-
Разработать нормативно-техническую документацию:
- на схему выделения, дифференциации и идентификации B. bronchiseptica;
- на изготовление антигенного биопрепарата.
Научная новизна. Впервые создан биопрепарат для антигенного типирования микроорганизма B. bronchiseptica. Впервые разработана схема выделения и тест-система идентификации бактерий B. bronchiseptica от домашних животных.
Практическая значимость работы. Изучены биологические свойства (ферментативная активность, восприимчивость к красителям, культуральные свойства, устойчивость к химическим и физическим свойствам), на основании которых предложены для ветеринарной практики микробиологические тесты для типирования бактерий вида B. bronchiseptica. Разработан биопрепарат для антигенного типирования и идентификации бактерии вида B. bronchiseptica.
Созданы и апробированы селективно-диагностическая среда УГСХА BBR 57 и оптимальная схема выделения бактерий вида B. bronchiseptica, позволяющие выделить и идентифицировать данные бактерии из клинического материала.
Материалы диссертации включены в разработанную и утверждённую научно-техническую документацию:
- «Методические рекомендации по выделению и идентификации B.bronchiseptica» (Ульяновск, 2011);
- «Методические рекомендации по изготовлению биопрепарата для идентификации B. bronchiseptica» (Ульяновск, 2011);
Результаты диссертационной работы используются в учебном процессе при чтении лекций по дисциплинам “Биотехнология”, “Частная микробиология”, “Болезни мелких домашних животных”, для студентов факультета ветеринарной медицины, биотехнологического факультета Ульяновской ГСХА, а также при выполнении тем научно-исследовательских работ на кафедре микробиологии, вирусологии, эпизоотологии и ветеринарно-санитарной экспертизы Ульяновской ГСХА.
Основные положения, выносимые на защиту:
-
Биологические свойства B. bronchiseptica: ферментативная активность, восприимчивость к красителям, культуральные свойства, устойчивость к химическим и физическим воздействиям, положены в основу микробиологических тест для типирования бактерий вида B. bronchiseptica.
-
Разработанный биопрепарат, позволяет типировать по комплексному антигенному составу бактерии вида B. bronchiseptica.
-
Селективно-диагностическая среда УГСХА BBR 57, предназначенная для выделения и первоначального типирования бактерий вида B.bronchiseptica по культуральным и биохимическим свойствам.
-
Оптимальная схема выделения бактерий вида B. bronchiseptica от животных, позволяющая выделить и типировать бактерии данного вида за 120 часов.
Апробация работы. Основные положения диссертационной работы доложены и опубликованы на Международной научно-практической конференции «Актуальные проблемы ветеринарной медицины», посвященной 60-летию факультета ветеринарной медицины Ульяновской ГСХА (Ульяновск, 2003); на научно-практической конференции молодых ученых Приволжского федерального округа «Роль молодых ученых в реализации национального проекта «Развитие АПК» (Саратов, 2007); на Международной научно-практической конференции «Роль молодых ученых в реализации национального проекта «Развитие АПК» (Москва, 2007), Международной научно-практической конференции посвященной пятидесятилетию ФГУ ВНИИЗЖ «Достижения молодых ученых в ветеринарную практику» (Владимир, 2008г); на Международной научно-практической конференции «Актуальные вопросы аграрной науки и образования» (Ульяновск, 2008); конференции молодых ученых, посвященной памяти члена-корреспондента РАСХН Вишнякова И.Ф. 70-летию со дня рождения «Актуальные проблемы инфекционной патологии ветеринарной медицины (Покров, 2009); Всероссийской научно-практической конференции с международным участием «Молекулярная диагностика – 2010». (Москва, 2010).
Публикации. По теме диссертации опубликовано 16 работ, 3 из которых – в рецензируемых журналах, рекомендованных ВАК РФ.
Структура и объем работы. Диссертация изложена на 176 страницах печатного текста, содержит 12 таблиц, 77 рисунков, состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследований, собственных исследований, обсуждения результатов исследований, выводов и практических предложений. Список использованной литературы включает 247 источников из них 233 иностранных. В приложениях представлены документы, подтверждающие достоверность результатов работы, её научную и практическую значимость.
