Электронная библиотека диссертаций и авторефератов России
dslib.net
Библиотека диссертаций
Навигация
Каталог диссертаций России
Англоязычные диссертации
Диссертации бесплатно
Предстоящие защиты
Рецензии на автореферат
Отчисления авторам
Мой кабинет
Заказы: забрать, оплатить
Мой личный счет
Мой профиль
Мой авторский профиль
Подписки на рассылки



расширенный поиск

Иммуногенные и реактогенные свойства ассоциированной трехвалентной вакцины против инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3, вирусной диареи - болезни слизистых крупного рогатого скота Ревякина, Елена Михайловна

Иммуногенные и реактогенные свойства ассоциированной трехвалентной вакцины против инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3, вирусной диареи - болезни слизистых крупного рогатого скота
<
Иммуногенные и реактогенные свойства ассоциированной трехвалентной вакцины против инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3, вирусной диареи - болезни слизистых крупного рогатого скота Иммуногенные и реактогенные свойства ассоциированной трехвалентной вакцины против инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3, вирусной диареи - болезни слизистых крупного рогатого скота Иммуногенные и реактогенные свойства ассоциированной трехвалентной вакцины против инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3, вирусной диареи - болезни слизистых крупного рогатого скота Иммуногенные и реактогенные свойства ассоциированной трехвалентной вакцины против инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3, вирусной диареи - болезни слизистых крупного рогатого скота Иммуногенные и реактогенные свойства ассоциированной трехвалентной вакцины против инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3, вирусной диареи - болезни слизистых крупного рогатого скота Иммуногенные и реактогенные свойства ассоциированной трехвалентной вакцины против инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3, вирусной диареи - болезни слизистых крупного рогатого скота Иммуногенные и реактогенные свойства ассоциированной трехвалентной вакцины против инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3, вирусной диареи - болезни слизистых крупного рогатого скота Иммуногенные и реактогенные свойства ассоциированной трехвалентной вакцины против инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3, вирусной диареи - болезни слизистых крупного рогатого скота Иммуногенные и реактогенные свойства ассоциированной трехвалентной вакцины против инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3, вирусной диареи - болезни слизистых крупного рогатого скота Иммуногенные и реактогенные свойства ассоциированной трехвалентной вакцины против инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3, вирусной диареи - болезни слизистых крупного рогатого скота Иммуногенные и реактогенные свойства ассоциированной трехвалентной вакцины против инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3, вирусной диареи - болезни слизистых крупного рогатого скота Иммуногенные и реактогенные свойства ассоциированной трехвалентной вакцины против инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3, вирусной диареи - болезни слизистых крупного рогатого скота Иммуногенные и реактогенные свойства ассоциированной трехвалентной вакцины против инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3, вирусной диареи - болезни слизистых крупного рогатого скота Иммуногенные и реактогенные свойства ассоциированной трехвалентной вакцины против инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3, вирусной диареи - болезни слизистых крупного рогатого скота Иммуногенные и реактогенные свойства ассоциированной трехвалентной вакцины против инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3, вирусной диареи - болезни слизистых крупного рогатого скота
>

Диссертация - 480 руб., доставка 10 минут, круглосуточно, без выходных и праздников

Автореферат - бесплатно, доставка 10 минут, круглосуточно, без выходных и праздников

Ревякина, Елена Михайловна. Иммуногенные и реактогенные свойства ассоциированной трехвалентной вакцины против инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3, вирусной диареи - болезни слизистых крупного рогатого скота : диссертация ... кандидата ветеринарных наук : 16.00.03.- Москва, 1998.- 128 с.: ил. РГБ ОД, 61 99-16/6-7

Содержание к диссертации

Введение

2. Обзор литературы 7

2.1. Краплю сведения об одфекцдошюм рішотрахйиге крупного рогатого «кеча 7

2.1.1 Признаки при ввфекцишшом ршкирахеюсе крупного рогатого скота 8

2.1.2. Возбудитель инфекционного ринотрахента крупного рогатого скот 9

2.1.3 Иммунитетпри инфещионвом ринтрахеите крухтоге рогатого сюга 10

3.2. Краткие сведения о .вирусной деарен - болезни: едхюистше крупного роидатао екота 11

2.2.1. Возбудитель вирусной диареи крупного рогатого скота 12

2.3. Краткие сведения о парагршше-3 круишго рогатого «ота 15

2.3.1. Кяиндоеские вразвахи щш иарааришю-З хрупкого рогатого скоїв 16

2.3.2. Возбудимая» парагрипш-3 крупного рогатого сила

2.3.3. Иммунитет при шрадриппе-З крупного рогатого скот IS

2.4. Специфическая профилактика инфекционного рянотрахеяпц вкруетюй дерен, нарагашиа-З крупного ;рогашго скота

3. Собственные исследований 31

3.1. Материалы и методы. 31

З.Ї.1, Вирус 31

3.1.2. Культура кяекж 32

3 3.1.4. Серологические реакции 33

3.1.5. Статистическая обработаа реэультатов 34

3.2. Результаты исследований 35

3.2.1 . Изучение эпизоотической ситуации по массовым респираторным заболеваниям телят в Тульской области

3.2.2. Оценка иммунного статуса у животных, используемых в производсжвенно - конгролируемых опытах

3.2.3. Изучение реактогенностн вирусвающны "Тривак" в производственно - контролируемых опытах

3.2.3Л.Реактогенностъвирусващивы"Триваг дяя стельных коров 43

3.2.3.2. Реакгогенностъ вирусвакцины "Тривак" в опытах на телятах 2-3 дневного возраста

3.2.3.3. Реактогенность вирусвакцины "Тривак" в опытах на телятах 13-15 дневного возраста

3.2.4. Г моральный ответ у животных, иммунизированных вакциной "Тривак" 45

3.2.4.1. Иммунный отвег животных к вирусу ИРТ после лрививки "Тривак" 46

3.2.4.2. Сочеганное применение ингерфероногена и вирусвакцины "Тривак" 52

3.2.4.3. Имуунный ответ животных к вирусудиареипосле прививки "Тривак" 59

3.2.4.4. Иммунный ответ животных к вирусу парагршша-З после прививки "Тривак 71

3.2.5. Эпизоотическая эффективность верусвакцивы "Тривак" 83

4. Обсуждение 90

5. Выводы 101

6. Список литературы

Введение к работе

Актуальность темы

Инфекционные болезни молодняка крупного рогатого скота с преимущественным поражением респираторного и желудочно-кишечного тракта широко распространены в животноводческих хозяйствах и наносят им значительный экономический ущерб.

Часто вспышки массовых заболеваний вызываются вирусами инфекционного ринотрахеита (ИРТ), парагриппа-3 (ПГ-3), вирусной диареи-болезни слизистых (ВД-БС) к другими. Во многих случаях имеют место смешанные вирусные инфекции или осложненные вторичной бактериальной микрофлорой, которые характеризуются особенно тяжелым течением и представляют серьезную проблему для ветеринарных врачей в плане их диагностики, лечения и профилактики.

Многочисленными исследованиями показано, что в предотвращении инфекции, а также в предупреждении рецидивов и уменьшении их продолжительности существенную роль играет специфическая профилактика.

Неблагополучие большинства животноводческих хозяйств по массовым респираторным инфекциям телят обуславливает необходимость применения мер для стабилизации эпизоотической ситуации в хозяйствах. В связи с этим вопрос создания новых высокоэффективных средств борьбы с вирусными заболеваниями очень актуален.

Цель и задачи исследования Целью исследования являлось изучение эффективности ассоциированной трехвалентной вакцины против инфекцион-

ного ринотрахеита, парагриппа-3, вирусной диареи-болезни слизистых, разработанной в лаборатории вирусологии ВИЭВ, в условиях хозяйств, неблагополучных по массовым респираторным болезням телят.

В связи с этим были поставлены следующие задачи: 1.Выяснить роль вирусов инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3, диареи в этиологии респираторных инфекций молодняка крупного рогатого скота в животноводческих хозяйствах Тульской области.

2.Провести оценку реактогенных и иммуногенных свойств ассоциированной трехвалентной вакцины Тривак против инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3,вирусной диареи крупного рогатого скота в условиях проиводственно-контролируемого опыта.

3.Разработать рабочую схему иммунизации против ИРТ, ПГ-3, ВД-БС телят и коров в хозяйствах, неблагополучных по респираторным заболеваниям.

4.Проверить возможность использования в качестве «протектанта», способного снять возможную повьшенную реакцию на прививку вирусвакцины , препарата «Байферон».

Научная новизна

В условиях естественного эпизоотического процесса, при наличии активной циркуляции возбудителей, изучена динамика иммунного ответа у телят и коров на аттенуиро-ванные штаммы вирусов ИРТ, ПГ-3, ВД-БС при одновременном введении в виде ассоциированной вакцины.

Установлено, что при оптимальном соотношении доз вак-

цинных вирусов обеспечивается формирование сбалансированного иммунного ответа ко всем трем возбудителям, при этом отсутствуют отрицательные явления негенетического взаимодействия вирусов (интерференция, экзальтация, конкуренция антигенов). Показано, что глубоко аттенуирован-ный вирус ИРТ - интерфероноген («Баиферон») при его аппликации на слизистую оболочку верхних дыхательных путей не оказывает отрицательного воздействия на формирование иммунитета у телят ни к одному вакцинному штамму после прививки им вакцины.

Практическая значимость

В производственно-контролируемых опытах изучена ре-актогенность и иммуногенная активность ассоциированной вакцины против основных возбудителей массовых респираторных болезней крупного рогатого скота: инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3, вирусной диареи-болезни слизистых .

Установлено, что вакцина слабореактогенна и иммуно-генна для стельных коров и новорожденных телят.

Разработана рабочая схема вакцинации в хозяйствах с острым течением инфекции и наличием естественного иммунного фона к указанным возбудителям, отрицательно влияю- . щим на формирование активного поствакцинального иммунитета.

Установлено, что глубокоаттенуированный штамм вируса ИРТ («Баиферон») может быть использован в качестве имму-нопротектанта при вакцинации новорожденных телят трехва-

лентной вакциной.

Материалы диссертации использованы для разработки нормативно-технической документации на промьшшенное производство вакцины.

Публикация результатов исследований

По теме диссертации опубликованы две научные статьи.

Апробация работы

Основные материалы диссертации доложены и обсуждены на совещании сотрудников отдела вирусологии ВИЭВ, Ученом совете ВИЭВ, научной конференции, посвященной 100-летию ВИЭВ.

Объем и структура диссертации

Материалы диссертации изложены на 12 8 страницах машинописного текста и состоят из следующих разделов: введение, обзор литературы, собственные исследования, обсуждение результатов, выводы, список литературы, приложение. Список литературы содержит 18 9 источников, 62 отечественных и 127 зарубежных Работа иллюстрирована 14 таблицами и 10 рисунками.

Иммунитетпри инфещионвом ринтрахеите крухтоге рогатого сюга

Вирус инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота относится к роду Varicellovirus подсемейства AlpЬaherpesvirinae семейства Herpesviridae и имеет типичную морфологию вирусной частицы, характерную для данного -семейства (45). Его вирион состоит из четырех структурных элементов: сердцевины, содержащей линейную двухцепочечную молекулу ДНК, икосадельтаэдрического кансида, состоящего из 162 капсомеров, техумента, асимметрично расположенного вокруг капсида элек-тронноплотного, волокнистого материала, наружной трехслойной мембраны, имеющей на поверхности многочисленные пешомеры.

Вирус инфекционного ринотрахента довольно устойчив и сохраняет свою активность при -70 С не мене 7 мес., при 4 С - 30 дней, при 37 С остается инфекционным в течение 4 дней. При 56 С полная инактивация вируса наступает через 25 мин., ври 22 С через 20 дней (Ш).

Вирус чувствителен к действию хлороформа, эфира, трипсина, формалина, бензола, фреона (106, 174, ПО). Вирус инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота сохраняет свою активность при рН от 5 до 9.

ИммунныЙ ответ крупного рогатого скота ира введении в организм вирусного антигена сопровождается формированием гуморального (нммуноглобулины IgG, IgA, IgM. IgD, IgB), клеточного СГ-лимфопиты: Tx, Тс,Тк)и секреторного (местная устойчивость респираторных органов слагается из (лрукяурно-физиолошческих, неспецифических и специфических факторов местного иммунитета) (59).

В крови переболевших и вакцинированных животных обнаруживают вирус-нейтрализующие (54, 27, 122, 131, 138), комплементфиксирующие, щэеципширующие (99, 152,39) антитела, а также антитела, выявляемые в реакции торможения гемаггдютинации и в реакции непрямой гемагглютинации (5,44,48,86,186).

Слецифические антитела в сыворотке крови животаык появляются через 8-14 дней после инфицирования (52,99,44,48,153,155), достигают максимального уровня к 28-30 дню.

Сведения о продолжигельности иммунитета при инфекционном ринотрахеиге различные. Введение аттенуированного вируса ИРТ создает у жнвотных невосприимчивость к заражению в течение трех лет (137). По некоторым данным животные, перебояевшие респираторной формой инфекционного ринотрахеита, повторно не заболевали. Миотие авторы считают, что прочный иммунитет при данном заболевании составляет 6-18 месяцев. (136, 144, 168,13). B.Moretti et al. (144) отмечают, что снижение титра антител ироисходиг после 10-ти месяцев. T.Z.Chow (83) обнаруживал антитела в сыворотке крови переболевших телок в течение 5,5 лет. Вирус инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота обладает интерфе-роногенными свойствами. Спустя 5 часов после введения вируса интерферон обнаруживают в носовых секретах и выявляют его до 8-х суток, причем его титр выше, чем в крови (64,187,177).

Колоетральные антитела, поступающие с молозивом новорожденным телятам, обуславливают иммунитет у последних, при чем, как правило, титр гуморальных антител у них выше, чем у матерей (32). Уровень антител сохраняется высоким до 30 дней, значительно снижается к 60 дням. По некоторым данным колоетральные антитела существуют в организме до 4-5 месяцев (70).

Вирусная диарея - болезнь слизистих оболочек крупного рогатого скота характеризуется широким спектром клинических признаков, зависящих от форм течения инфекции, которая определяется биологическими свойствами возбудителя (7,10,15,34,159,156).

Впервые вирусная диарея как самостоятельное, заболевание было установлено Огафсоном и его сотрудниками в CHIAJ штате Нью-Йорк в 1946 году ври вспышках острой, часто со смертельным исходом, болезни крупного рогатого скота, характеризующейся диареей и эрозивными поражениями пищеварительного тракта (184,10,106,110,73).

Вирус диареи среди крупного рогатого скота является обычно встречающимся патогеном в бояьшинсгве стран, так как, за малым исключением, животные переносят инфекцию в течение первых лет жизни, о чем свидетельствуют ретроспективво выявляемые к возбудителю гуморальные вируснейтрализующие антитела у 50-90% обследованного поголовья (183, 163,159,184,154,108,76,112).

Возникает данное заболевание во все сезоны года, но чаще в осенние и весенние месяцы с поражением, в основном, телят от 4-6 - мес. возраста до 2-х дет. Однако заболевают и новорожденные телята, заражение их может происходигь еще в неонатальннй период (169,33).

Главным источвиком в распространении вирусной диареи являются персистентяо инфицированные животные (84,156,176). Больные и переболевшие также служат источником инфекции (78). Передача заболевания возможна вакцинами, контаминированными вирудентным штаммом вируса диареи через фегальвую сыворотку, используемую для выращивания культуры клеток или друтим пугем (143),

Возбудимая» парагрипш-3 крупного рогатого сила

А.Г. Шинщик и другие, применяя сухую культураяькую ассоїщщювяивую вакцину против парагригша-3 я мифжщоишно рияотрахеита, при первичном штраназадыюм ее введений отмечали у животных угнетенное состояние в течение 3-5 дней, затем телята приходили ЇЇ нормальное состояние. После повторной ваяюпіации, которую осуществляли иодкожно иг через 14 дней после первой., у часта животных наблюдали отказ от корма, угнетенное состояние, учащенное дыхание, повышение температуры до 41-42 С, обильное слюнотечение, манежные якиженшг 11а 3-5 СУТЖН такие животное с ппогоесситтотпим истшпениєм выбоя-ковмвались.

Подобная реакция животных на введение ваетршы вызвала, необходамость изу-чения э.пизоотапвсжой обстановки в данном хозяйстве.

В результате ироведеншзК исследований установлено, что 78,6 - 90,1% животных положительно реагарукэтг на вирує шрвіртша-З, 3,7-7,3% - на вирус гафекциояшго ринотра-хеит Тигр антител ж вирусу параіриппа-3 был 1:2 -1:5)2, к вирусу іжфетщтонного ринотра-хеита-1:2- 1:16. Случаи юзникновекта заболеваний телят после вммунизациа с вышеуказанной клиникой относили на счет нрсгвоцарующего фактора - наслоение живой тжщвш на латент-иое течение инфекции. АТЛЫттщш с соавторами изменили возраст шждршацив: жшздтаых. Стали прививать телят в возрасте 3-5 дней,. Вакцину вводили также первый раз ишраяазальяо, через 14 дней повторно подкожно. Проведя анализ применения сухой хультуралыюй ассопиированной вакщты против трагришш-3 и шфжционнот риншрахенга, установили, то в нвбяагопияучных- но - 26 -респираторным заболеваниям хозяйствах данный препарат ярофидактарует вшоусные болезни телят, иммуншщюваиных в 2-7 суточном возрасте (60). Ш. Told et al. ввели атгенуированный штамм ввруса ИРТ КРС, который репродуцируется на слизистой оболочке верхних дыхалельных путей крупного рогатого скота и при интраназальном введении индуцирует у телят образование гуморальных, секреторных антител и ивтерферона. На 10-й день после вакцинации тигр антител у телят был 1:2,8 - 1:3,8, на 14 день -1:35,6 -1:44,4, на 21 день -1:36,4 -1:47,2.

Через трое суток после иммунизапии привитые животные были устойчивы к контрольному заражению.

Применение вакцины в производственных условиях показало ее безвредщость для стельных коров. На, 28 день после вакцинации 50% иммувизированных животных имели антитела к вирусу ИРТ в тигре 1:12,18% -1:32 -1:48,14% -1:16,9% -1:24,9% -1:6 (180,181).

В. Lagovic испытывал лиофилизированную вакцину из атхенуврованного штамма вируса инфекционного ринотрахеита, при интраназальном применении которой наблюдали образование интерферона через 48-72 часа, гуморальные антитела в тигре 1:25,41. При внутримышечном. введении вакцины уровень туморальных антител составил 1:18 (126).

I.R. Kolar et al. изучали иммуногенные свойства поливалентной вакцины против инфекционного ринотрахеита, вирусной диареи, тршгршша-З крупного рогатого скота. Титр гуморальных антител к этим вирусам по индексу нейтрализации у иммунизированных животных составил 2,5,1,3,3,2 log2, после ревакцинации - 2,8,2,9,3,5 log2 соответственно. Высокий уровень антител в крови сохранялся на протяжении 120 суток (125). S. Marcus et al. проводили исследования в молочных стадах, вакцинированных против ИРТ, ВД-БС, ПГ-3 вакциной "Triangle". До ващшшщш 83% животных не имели антител к вирусу ИРТ, 10% - в татре 1:8, 7% - 1:4. К вирусу ВД-БС 22% коров были серонегатив-ны, 75% имели тигр антител 1:8,3% -1:2-1:4. К шрафиппу-3 все животные имели антитела в тигре 1:80. Через месяц после ревакцинации тигр антител к вирусу ИРТ 1 :8 имеяи 75% коров, 20% -1:4,5% -1:2.

К вирусу ВД-БС у 94% животных были выявлены гуморальные антитела в тигре 1:8-1:16, у6%-в титре 1:4. Через 20 месяцев после иммунизации все коровы были серонегативны к вирусу ВД-БС, 8% имели антитела к вирусу ИРТ в титре 1:8 и 35% - 1:4, остальные животные антител не имели (134). D.D. Маш et al. исследовали эффективность аэрозольной, интраназальной, внутримышечной вакцинации против инфекционного ринотрахеита, парагршша-З крупного рогатого скота.

Вакцина модифицированная живая, применяемая интраназально, обеспечивала 100%-ный иммунный ответ у животных к вирусу ИРТ и 80%-ный - к вирусу ПГ-З. Все живот-ные были устойчивы к контрольному заражению.

Та же вакцина при аэрозольной иммувлзации защищала только 40% телят от заражения, вызывая образованне 1уморальных антител к вирусу ИРТ у 20% животных, к вирусу ПГ-З у 60-80%.

Температурочз встаительная вакцина, вводимая интравазально, защищала 100% телят от контрольного заражения, вызывая иммунный ответ к вирусу ИРТ у 40% животных и к вирус5 ПГ-З у 20%.

Применяя внутримышечво вакцину прогив инфекоионного ринотрахеита, пара-гршша-З, получили 60%-ный иммунный ответ к вирусу ИРТ и 20%-ный к вирусу ПГ-З, при этом 80% телят на контрольное заражение не реагировали.

Наиболее эффективны оказались ивтравазальная и внутримышечная вакцинации. При аэрозольной иммунизации несошветствие между достаточным иммунным отвегом к вирусу ПГ-З и слабым к вирусу ИРТ происходит, по-видимому, в связи с различием структурных и других характеристик этих вирусов (133).

Модифицированная живая вирусвакцина против инфекционного ринотрахеша, и парагршша-3 крупного рогатого скота, применяемая совместно с ивтерлейкином-2, вызывала образование гуморальных антигел к вирусу ИРТ, выявляемых в реакции нейтрализации, через 14 дней после иммунизации в титре 1,46, на 21 день -1,64, на 28 день - 2,65 (158).

Тривакцину состоящую из смеси аттенуированных штаммов вирусов инфекционного ринотрахеита, парагриппа-З, вирусной диареи применяли на телятах 3-5 недельного и 3-4 месячного возраста. Изучали эффективность аэрозольного метода вакцинации.

Выраженную вакцинвую реакцию, сопровождающуюся выработкой вируснейтра-лизующих антител к вирусам ИРТ и ПГ-З отмечали только у серонегативных животных. Уровень антител достигал максимума через 3-5 недель после иммунизации: секреторные антитела к вирусам ИРТ и ПГ-3 имели титр 2,5 log2 и 4,0 log2, гуморальные -4,3 log2 и 8.92 log2 соответственно.

Тигр гуморальных антител и вирусу ВД-БС за период наблюдения оставался неизменным, а титр вируснейтрализующих антител в носовых секретах резко снижался.

Кішнжо-зшізоотологическими, вирусологическими и серологическими данными подтверждена невосприимчивость аэрозольно вакцинированных животных к контакгному заражению уже в первые дни после вакцинации (2).

При активной специфической профилактике вирусной диареи - болезни сяизистыК крупного рогатого скота широкое распространевие получили вирусвакцины из цито-патогенных аттевуированных штаммов Oregon C24V, NADL, WRL and Singer.

Изучение эпизоотической ситуации по массовым респираторным заболеваниям телят в Тульской области

Коровам в количестве 20 голов со сроком стельности 5,5-6,5 месяцев вакцину объеме 0,2 см в области нижней трети шеи За период наблюдения у всех подопытных животных отсутствовали клинически выраженные признаки повышенной реакции на введение препарата. Температура была в лределах нормы, не обнаруживав истечений из глаз, носа, влагалища, слизистые оболочки без изменений (бледно-розового цвета, не отечные). Вторую прививку вакцины проводжай на 14 день после первой. Вакцину также прививали внутрикожно в объеме 0,2 см в области нижней трети шеи. Все коровы осгавались здоровыми, не имели каких-либо отклонений от физиологической нормы. 3.2.3.2. Реакгогеііносг ь вирус-вакцины ТривакЧв опытах на телятах 2-3 днев ного возраста телятам, матери которых за 2,5-3,5 месяца до отела были иммунизированы ви руеващиной "Тривак ВИЭВ", в возрасте 2-3 дней прививали вакцину, которую согласно наставления вводили внутрикожно по 0,2 смд в область нижней трети шеи. Реакцию на введение данного препарата отмечали у трех телят. У них наблюдали повышение температуры до 40 С, слезотечение, конъюктива была пшеремирована, отечна. Признаки исчезли через три дня без ветеринарного вмешательства.

На второе введение вакцины, проведенное через 14 дней после первого, телята не реагировали. Температура тела у всех животных была в пределах нормы, слизистые оболочки без изменений, истечений из глаз, носа, влагалища не наблюдали.

Десять телят 13-15-дневного возраста иммунизировали вирусваюжной внутрикож но JS о&шсти НМЖН0ІЇ трести шеи в объеме 0 2 см . Все животные клинически не реагировали на введение препарата. Температуру тела у всех телят зареіистрировали в пределах нормы, истечений из глаз, носа, влагалища не наблюдали, слизистые оболочки были бледно-розового цвета, бе» изменений.

Через 14 дней провели ревакцишцюо. Вакцину привили внутрикожно в область нижней трети шеи в объеме 0,2 см . Телята на повторное введение препарата клинически не реагировали, состояние их было удовлетворительное. Проведенные исследования показали безвредность вируовакцины "Тривак ВИЭВ" дня коров и телят. Поствакцивальная реакция у телят 2-3-дневного возраста не превышает принятые для вирусвакцнн показатели.

Fastier et al. считают, что поствакцинальная реакция у молодняка крупного рогатого скота является необходимой для иммунологической стимуляции организма и формирования напряженного иммунитета (96,97).

Исходя из оценки состояния иммунного статуса у коров и телят в хозяйстве, можно было предполагать неоднозначную реакцию на введение трехвалентной вакцины. В связи с этим с целью снижения отрицательной реакции у телят было проверено протектявное защитное действие предварительной интраназальной иммунизации животных препаратом Байферон (производства фирмы Байер). 20 телят в возрасте 3-5 дней, за 10 дней до прививки вирусвак-цшш "Тривак ВКЭВ", обработали интерфероногеном (Байфероном), который распыляли ин трашзально, по 1 см в каждый носовой ход. Наблюдения за общим состоянием телят, ежедневной температурой тела показали, что предварительная обработка животных ннтерфероно-теном способствует более блатояриятному проявлению поствакцишльных реакций.

Уровень 1уморальных антител у телжг и коров после иммунизации определяли в реакциях нейтрализации и торможения темапгшотинации. Исследовали пробы сыворотки кровй, взятой в разные сроки: в момент вакцинации и ревакцинации, через 10, 20 даей после ревакцинации ш через 60 дней после первого введения вакцины. Двадцать коров со сроком стельности 5,5-6,5 месяцев двукратно, с интервалом 14 дней, иммунизировали вирусвакциной "Тривак ВИЭВ" ввутрикожно в области нижней трети шеи в обьеме ОД см . До вакцившщи в сыворотке крови всех двадцати животных выявили вируенейгра-лшующие атитела к вирусу ИРТ в тигре, среднем по группе 3,93±0,44 log2. Одна корова имела антитела в титре 1:4, три коровы - 1.68 дае коровы- 1:8 одаа корова- 1:12 1 шесть ко-ров -1:16, одаа корова -1:24,3 , шесть коров - 1:32.

В момент ревакпивации уровень гуморальных антител существепно не изменился и составил 4,0+0,44 log2. Родившихся от этих коров телят использовали в последующих производственных опытах с целью изучения особенностей иммунного ответа на прививку трехвалентной вакцины. Для этого десяти новорожденным телятам в первые 2-3 дня жизни привили вакцину внутрикожво в объеме 0,2 см , через 14 дней провели ревакцинацию тем же препаратом в той же дозе Оставшихся десять т лят вврусмщиной не иммунизировали, они служили контролем. У животных обеих трупп получади пробы сыворотки крови, которые затем исследовали в реакции нейтрализации на наличие антител к вирусу ИРТ. В момент шкцинации у животных обеих групп, подопытной и контрольной, наблюдали относитедьно высокий уровень колоетрального иммунигета, который составил соответсгвенно 3,075± 0,916 и 2,877± 1,209 log2. Эш данные отражены в таблице 7.

Из табл.5 видно, что п ред прививкой вирусвакцины половина телят подопытной группы имела антитела в титре 1:8-1:16, один теленок - 1:32 и остальные телята - 1:2,8-1:4. У двух телят контрольной группы вируснейтралтз ющЕК антител не обнаружили, у остальных животных титр антител находился примерно на том же уровне, что и у подопытных телят (1:4-1:32).

Через 14 дней, на момент ревакцинации, в подопытной труппе отмечали серокон-версшо, титр антител увеличился на 1,195 log2, составив 4,27 + 0,7 fog2. Наименьший тигр антител 1:8 отмечали только у двух телят, больше 50% животных имели антитела, превышающие титр 1:16, максимальный титр составил 1:64. В контрольной группе наблюдали снижение уровня вирусиейтралшующж антигел, он уменьпшлся на 0,44 log2 и составил 2,437 ± 1,24 log2. У трех телят антител не обнаружили, у четырех телят выявили вируснейтршгазую щие антитела в тигре 1:8, у остальных трех телят -1:12,1,1:16,1:27,3. Через 10 и 20 дней после ревакілінации у животных подопытной группы отмечали дальнейшее увеличение титра гуморальных антител, в то же время в контрольной группе наблюдали ею снижение. Через 10 дней после ревакцинации средний титр внруснейтрализую-щих антител в подопытной группе был на уровне 4 J48±0,836 og2, превысив исходный та 1,67.3 log ». У трех телят отмечали максимальяый титр антител 1:64 , у одного теленка 1:44,6, по 20% животных имели антитела в титре 1:8,1:16,1: 32. В контрольной группе животных средний тигр антител составил 2,396±1,45 log2. У трех телят антител не выявили, у трех телят в низком титре 1:2-1:8 , у остальных животных -обнаружили вируснейгрализующие антитела на уровне 1:16-1;32.

Иммунный отвег животных к вирусу ИРТ после лрививки "Тривак"

Через два месяцев после первого введения вакцины выявили антитела на уровне, примерно таком же, как и через 20 дней после второй прививки. У телят контрольной группы в момент ревакцинации я через 1С) дней после нее отаечали снижение уровня вирус-иейгралтующих аігаггел, на последующих стадиях наблюдения были зарегастрврованы его незначительные колебания.

Животных 13-15-даевного возраста, обработанных в первые дни жизни интерферонггеном (Байфероном), иммунизировали внутрикожно вирусвакпиной "Тривак ВІОЕГ, через 14 дней провели ревакцинацию. Десять телят, которым так же распыляли интраназально Байферон не вакцинировали, они служили контролем.

В сыворотке крови телят обеих групп до иммунизации обнаружили незначительный уровень вируснейтрализуюіїсих автигел, эти данные отражены в табл.10,031,06 log2 у животных подопытной грушш, 0,9±1,08 log2 - контрольной. У двух подопытных телят выявили антитела в титре 1:8, 1:16, у трех коптролъных -1:4 1:8 ,1:16. У остальных животных антител не обнаружили. Эти данные отражены в табл.9.

Во время ретщинации у телят подопытной группы наблюдали сероконверсию, тагр антител yвеличилcя на 2,87 log2, составляя 3,57±1,0 log2. У шести телят выявили анти - 65 -гела в тигре 1:16-1:32, у трех- 1:8 ,1:9,4,1:11,2, у одного теленка антител не обнаружили. В труппе контрольных животных вируснейтрализующие антитела имели только два теленка в низком титре 1:4.

Через 10 дней после ревакцинации в группе подопытных телят уровень гуморальных аотител составлял 4,04±0,83 iog2, превышая исходный на 3,34 log2. Наименьший титр был выявлен у одного теленка, у 60% животных титр антител превышал 1:16, максимальное значение 1:64 было зарегистрировано у одного теленка. В группе контрольных телят средний тигр антител составил 1,1±1,04 fog?. Антитела были обнаружены у четырех хеляг т титре 1:4 -1:13,6. Уровень вируснейгрализующих антител увеличился на 0,2 log2.

Через 20 дней после реващинации у животных подопытной группы наблюдали максимальный зровень гуморальных антител, который составил 4,43-+0,62 log2, превышая первоначальный на 3,73 log2. 80% телят имели антитела в титре выше 1:16, два теленка -1:8,

Через два месяца после иммунизации телят уровень антител составил 4,43±0,62 log2, максимальными титр 1.64 наблюдали у одного теленка, минимальный 1:8 ,1:12,1 у даух телят, у остальных -1:16 -1:37,5. У животных контрольной группы средний тигр антител соответствовал первоначальиому 5ровню 0,9±1,38 log2. Антитела были выявлеиы только у двух телят в высоком тигре 1:16,1:37,5. Б , ряс. 6 доказано, что у телят после еоче/ганшго нрименения Байферова и Трявак ВИЭВ" наблюдали сероконверешо ж вирусу диареи через 14 дней после прививки вируевакцшш на 2,87 log2,4epes 24 дня на 3,34 log2 через 34 и 60 дней на 3,73 tog2 В группе жошрольных животных во время срока ваблюдения отмечали невысский уровень вирускейграяшующих антител (ОД 0,4,1,1, 1Д, 0,9 log2).

Двадцать коров со сроком стельности 5,5-6,5 месяцев іммунизировапи двукратно, с готрвалом 14 дней, вирусвакциной. Во время вакцинации и ревакцинации у коров подучили пробы сыворотки крови, которые исследовали в реакции торможения гемагглютинапии, определяя уровень гуморального иммунного ответа к вирусу парагргаша-3. Проведенные исследования показали, что коровы в момент первого и второго введения вакцины имели оданаковый татр антгемаптэтшиноВ, который составил 5,9±0Э37 logj.

Исследования продолжили с телятами, которые родились у иммунизированных коров. В возрасте 2-3 дней десяти из них тривипи вирусвавтщну. Через 14 дней провели ревакцинацию. Десять телят не вакцинировали, они служили контролем. В пробах съгворотки крови, полуденных от телят обеих групп в разные сроки исследования (до иммзтаизапии, во время ревакцинации, после ревакцинации через 10,20 дней, через 60 дней после первого введения препарата) определяли титр гуморалькых актитемагглютинирующих антител.

До иммунизации у телят выявили довольно значитедьный уровень антител к вирусу I7Г-3, который составил в группе шдошлтных телят 6,3±0,34 log2, контрольвых

В табл. 11 приведены титры антагемсігглготининов, выявлевные у каждого животного. Семь телят подопытной трунта,і и шесть контрольной имели антитела в титре 1:64, три теленка подопытной и четыре контрольной -1:128. Через 14 дней после прививки вирусващшы, в момент ревакцинации, средний титр антител у телят подопытной группы имел значение 7,2±0,72 log2? превышая первоначальный на 0; Hog2.

Наивысший титр 1:512, был зарегастрирован у одного теленка, по 20% животных имели антитела в титре 1:256, 1:128, 1:64. В жонтршьной труппе животных отмечали снижение уровня туморальных антител. Средний по группе титр антител уменьшился на 1,3 Iog7 и сосгавил 5Д±0,52 log2. Ангаими, выявленные у телят контрольной группы, не превышали тяф 1:64, у 50% животных обнаружили титр антител 1:32,у 2096-1:16, у 3096-1:64.

Похожие диссертации на Иммуногенные и реактогенные свойства ассоциированной трехвалентной вакцины против инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3, вирусной диареи - болезни слизистых крупного рогатого скота