Введение к работе
Актуальность проблемы. В общей структуре заболеваний системы крови велик удельный вес наследственных гемолитических анемий, в частности fi-талассемни. Тяжесть основного заболевания, вторичные грозные осложнения, обусловленные в виде развития гемосидероза органов и тканей привлекают внимание специалистов к проблеме J1 - талассемин и побуждают их разрабатывать новые подходы к диагностике и лечению этого заболевания.
Некоторые новые перспективы, в частности, в диагностике и контроле проводимого лечения открывают возможность использования в качестве диагностических тестов анализ сывороточных металлопротеидов - гаптоглобина и гемопексина, являющихся чувствительными маркерами гемолитического состояния.
Как известно, одним из грозных осложнений J3 - талассемин являются гемосцдероз органов и тканей организма, который развивается у больных на фоне интенсивной трансфузионной терапии. Основным лечением при этом является хелаторная терапия с применением комплексов, обладающих сродством к железу, в частности, десферриоксамина В (десферала). Однако, десферал, являясь полиспецифичным хелатором металлов в организме, при его применении может вызвать мобилизацию и выведение из организма других, кроме железа, металлов, играющих важную роль в метаболических процессах в организме, в частности, меди, цинка и др. (Shiliro С, Russo А.,1987; Hyman СВ., Gonick Н. С. et al., 1989). Поэтому, комплексное исследование наряду с процессами обмена меди в организме на фоне десфералотерапии приобретает важное диагностическое и прогностическое значение для купирования возникающих нарушений в обмене этих жизненно важных биометаллов. В доступной нам литературе углубленных исследований в данном аспекте проблемы мы не встретили.
Наконец, важное научно-практическое значение приобретают исследования в направлении поиска новых высокоспецифичных синтетических или биологических хелаторов железа в организме.
Все вышеизложенное, в значительной степени, определяет актуальность и целесообразность проведения данного исследования.
Цель работы - изучение купрумкинетики в популяции детей С ]} -талассемией; исследование обмена гаптоглобина и гемопексина как маркеров гемолитического состояния у этих детей; на основании этого необходимо было разработать и предложить для практического здравоохранения ряд новых подходов к диагностике, мониторингу и лечению./? - талассемин у детей.
Задачи исследования:
1. Разработать и апробировать в клинико-диагностической практике иммунохимические методы анализа гаптоглобина и гемопексина в сыворотке крови.
2. Выявить показатели содержания гаптоглобина и гемопексина в
сыворотке крови в популяции детей cfi - талассемией, а также аналогичные показатели
популяции детей с аутоиммунной гемолитической анемией, железодефицитной анемией и у
здоровых детей.
-
Провести комплексное изучение купрумкинетики в популяции детей cfi -талассемией на фоне десфералотерапии.
-
Провести заместительную купрумтерапию сульфатом меди у детей с fi -талассемией после десфералотерапии и оценить ее эффективность.
-
Приготовить биоспецифический аффинный сорбент на основе апотрансферрии-сефарозы для удаления избытка железа из биологических жидкостей и апробировать данный сорбент in vitro на сыворотках крови больных cfi -талассемией.
Основные положения выносимые на защиту:
-
Разработаны иммунохимические методы анализа гаптоглобина и гемопексина в сыворотке крови, являющихся чувствительными маркерами гемолитического состояния, показана диагностическая и прогностическая значимость данных белков.
-
Применение десферала при лечении гемохроматоза у больных./? -талассемией обусловливает феномен купрумурии.
-
Разработан способ лечения детей cfi - талассемией, заключающийся в восстановительной купрумтерапии до нормализации статуса меди в кровотоке.
-
Разработан аффинный сорбент для удаления избытка железа в биологических жидкостях, основанный на апотрансферрин-сефарозе.
Научная новизна. Впервые для оценки тяжести гемолитического
состояния, а также для мониторинга эффективности проводимого лечения у детей с fi -
талассемией разработаны и предложены иммунохимические методы анализа
сывороточных белков - гаптоглобина и гемопексина, показана их высокая диагностическая и прогностическая значимость, как маркеров гемолитического состояния.
Впервые в детской популяции больных fi - талассемией, получающих хелаторную терапию по поводу гемохроматоза, проведено комплексное исследование ферро- и купрумкинетики, впервые показан феномен купрумурии при десфералотерапии у детей cfi - талассемией и количественно определен рефлюкс меди с мочой.
Впервые показан положительный эффект применения медьсодержащего препарата (сульфата меди) для нормализации статуса меди в кровотоке детей с fi -талассемией, получавших хелаторную терапию, на основании чего разработан и предложен для клинической практики способ лечения больных с fi - талассемией.
Практическая значимость. Для клинико-диагностической практики предложены иммунохимические методы анализа гаптоглобина и гемопексина, являющиеся
5 надежными маркерами гемолитического состояния в организме у детей. Так как точность и экономичность иммунохимических методов во многом зависит от специфичности и активности антисывороток против соответствующих белков, нами разработан и запатентован способ получения высокоактивной антисыворотки против трансферрина и гемопексина (Положительное решение ГПЭ по заявке № ІНДР 9400925.1 от 18.10.94г.), позволяющий получать высокотитражные антисыворотки, в частности, против гемопексина.
На основе комплексного изучения купрумкинетики у детей с JS -талассемией при лечении десфералом разработан способ лечения больных/? - талассемией.
Внедрение в практику. Результаты исследований внедрены в практику работы детской гематологической клиники НИИГ и ПК Мз РУз.
Апробация. Материал диссертации доложен 28 сентября 1995 года на Ученом Совете НИИГ и ПК Мз РУз. Работа получила положительную оценку и рекомендована к публичной защите. Основные положения диссертационной работы также доложены на обществе гематологов и трансфузиологов г. Ташкента (1991 г., 1993 г., 1994 г.).
Публикации. По материалам диссертации опубликовано 8 научных работ, из них одна - методические рекомендации и одна заявка на получение патента (приоритет от 18.10.94г., за № I НДР 9400925.1).
Структура и объем диссертации. Работа состоит из введения, обзора литературы, трех глав собственных исследований, выводов, рекомендаций для практики, указателя литературы. Текстовая часть работы изложена на 135 страницах машинописного текста. Диссертация иллюстрирована 8 рисунками и 13 таблицами.
Указатель литературы включает 204 источника, из них 91 отечественных и 113 иностранных авторов.
