Введение к работе
Актуальность работы
Рак молочной железы (РМЖ) занимает первое место в структуре онкологических заболеваний у женщин Ежегодно в мире этот диагноз ставят более, чем у 1 млн пациенток, из которых 400 тысяч умирает в первый год В России в 2004 г зарегистрировано 408 399 женщин раком этой локализации, что составило 17,6% от всех онкологических больных (Чиссов В И, 2004) Наиболее высокие показатели характерны для крупных регионов России Так, в Санкт-Петербурге в 2004 г на учете состояло 22500 женщин с РМЖ (Мирабишвили В М , 2004), в республике Татарстан за 2004 год было выявлено 1072 новых случаев РМЖ (Губайдуллин ХМ, Исмагилов А X , Гимранов А М, Куртасанов Р С , 2004)
Показано, что одним из факторов, ухудшающих прогноз с точки зрения выживаемости этой категории больных является повышенная активность онкогена HER2 (Волченко Н Н, Завалишина Л Э, Шимберева И Б , Франк Г А , 1998, Piccart-Gebhart М, Procter М , Lichmitser М , 2005) Однако остается неясным механизм, благодаря которому, данное негативное влияние осуществляется Большинство авторов утверждают, что сверхэкспрессия HER2 приводит к активации пролиферации и быстрой прогрессии опухоли (Durbecq V , Desmed С , Paesmans М et al, 2004, Pinto A E, Andre S , Laranjeira С , Soares J, 2005) Это осуществляется за счет формирования гомо -гетеродимеров HER2, которые в результате трансфосфорилирования запускают киназные пути, приводящие к активации клеточной пролиферации, ингибированию апоптоза, клеточной диссоциации
Другие исследователи полагают, что сверхэкспрессия HER2 ведет к повышенному синтезу p21/wafl (Yu D , Jmg T, Lm В et al, 1998, Yang W, Klos K, Yang Y et al, 2002), в половине случаев сопровождается делецией гена топоизомеразы-П-а и некоторым другим явлениям, что ведет к подавлению пролиферации (Hams L, Tang С , Yang С et al, 1998, Jarvmen ТА., Tanner M, Rantanen V et al, 2000, Sorhe T , 2004) Кроме того, сверхэкспрессия HER2 также приводит к подавлению синтеза молекул адгезии (Е-кадгерина) и
интегринов, что повышает метастатическую способность опухолевой клетки (Baeckstrom D , Lu P-J, Taylor-Papadimitnou J, 2000)
Таким образом, в настоящее время имеются противоречивые данные о влиянии HER2 на пролиферацию клеток РМЖ и поведение опухоли
Цель и задачи работы
Изучение влияния экспрессии HER2 на молекулярные параметры некоторых форм РМЖ
Для достижения данной цели решались следующие задачи
Исследовать уровень экспрессии HER2, эстрогеновых и прогестероновых рецепторов в клетках РМЖ
Определить наиболее достоверный маркер для оценки опухолевой пролиферации
Оценить уровень пролиферации в клетках РМЖ для выявления различных по предиктивному и прогностическому значению групп с последующим сравнительным анализом пролиферации при различном уровне экспрессии HER2 и эстрогеновых рецепторов
Проанализировать амплификацию гена ITER2 при его сверхэкспрессии, а также экспрессию ряда молекул клеточного цикла и молекул адгезии, которые могут оказывать влияние на уровень пролиферации раковых клеток
Разработать и апробировать методику определения экспрессии топоизомеразы-П-а и p21/wafl в клетках РМЖ как молекул-предикторов эффективности антрациклинов и таксанов.
Исследовать особенности влияния HER2 на поведение опухолевых клеток в раке Педжета молочной железы
Научная новизна
В работе получены новые данные о влиянии сверхэкспрессии HER2 на поведение РМЖ Было показано, что подобное влияние оказывается на количественном, а не на качественном уровне
Впервые был применен метод сравнительной количественной иммуногистохимии, которой основан на знании ключевых параметров клеточного цикла и участии каждого из исследованных маркеров в нем При различной экспрессии данных молекул в фазах клеточного цикла, после их сопоставления между собой мы делали вывод об активности каждого из маркеров, повышенной или пониженной их экспрессии
Впервые, при сверхэкспрессии HER2 выявлена ядерная реакция, на p21/wafl, что доказало супрессорную активность в условиях стимуляции пролиферации гетеро- и гомо - димерами HER2
Был выявлен ряд случаев рака Педжета молочной железы без сверхэкспрессии HER2 Это свидетельствует об отсутствии классического пути патогенеза в этих опухолях, для которого характерен хемотаксис раковых клеток за счет гетеродимеров HER2
Практическая значимость
В данной работе было оценено влияние сверхэкспрессии HER2
на поведение опухоли Было показано, что HER2 оказывает влияние
на течение заболевания количественным образом Разработана новая
высокоточная методика сравнительной количественной
иммуногистохимии, позволяющая оценивать данное влияние, что даст возможность лучше прогнозировать клиническое течение РМЖ
Получены данные о невозможности широкого использования иммуногистохимической реакции на PCNA и топоизомеразу-П-а для достоверной оценки пролиферации опухолевых клеток
Разработана платформа для последующего внедрения в
рутинную практику определения маркеров эффективности
химиотерапии перед ее назначением Топоизомераза-П-а - мишень
антрациклинов, p21/wafl - маркер для применения таксанов При
помощи методики сравнительной количественной
иммуногистохимии можно определять состояние экспрессии данных маркеров, активность p21/wafl Это позволит подходить к лечению больных РМЖ индивидуально, используя знания о предполагаемом ответе конкретной опухоли на назначаемую химиотерапию Методика позволяет определять маркеры на архивном материале и отличается относительно невысокой стоимостью
Приведены конкретные примеры использования данной методики в 23 наблюдениях РМЖ для оценки экспрессии каждого из маркеров, сравнения их между собой и клиническая интерпретация результатов в каждом случае
Апробация работы
Результаты исследования были представлены в докладах на
III Съезде онкологов и радиологов СНГ (Минск, Беларусь, 2004),
Научной и образовательной конференции ESMO (Европейское общество медицинской онкологии) - ESEC (Будапешт, Венгрия, 2005),
Всемерном противораковом конгрессе (ЛСС (Международное общество против рака) Вашингтон, США, 2006,
31-ом Конгрессе ESMO (Стамбул, Турция, 2006),
X Российском онкологическом конгрессе (Москва, Россия, 2006), где получено второе место на Всероссийском конкурсе молодых ученых на лучшую онкологическую работу 2006 года,
6 5-ом Международном симпозиуме по таргетной терапии рака
(Амстердам, Нидерланды, 2007),
Всероссийской конференции по фундаментальной онкологии (Санкт-Петербург, Россия, 2007),
XII Всероссийской научно-практической конференции «Молодые ученые в медицине» (Казань, Россия, 2007), где был получен диплом I степени
Публикации
Материалы диссертации отражены в 23 опубликованных работах, в том числе в 4 за рубежом
Структура и объем диссертации
