Электронная библиотека диссертаций и авторефератов России
dslib.net
Библиотека диссертаций
Навигация
Каталог диссертаций России
Англоязычные диссертации
Диссертации бесплатно
Предстоящие защиты
Рецензии на автореферат
Отчисления авторам
Мой кабинет
Заказы: забрать, оплатить
Мой личный счет
Мой профиль
Мой авторский профиль
Подписки на рассылки



расширенный поиск

Применение бетулина для повышения поствакцинального иммунитета против ньюкаслской болезни и инфекционного бронхита кур у цыплят-бройлеров Задорожная, Марина Валерьевна

Применение бетулина для повышения поствакцинального иммунитета против ньюкаслской болезни и инфекционного бронхита кур у цыплят-бройлеров
<
Применение бетулина для повышения поствакцинального иммунитета против ньюкаслской болезни и инфекционного бронхита кур у цыплят-бройлеров Применение бетулина для повышения поствакцинального иммунитета против ньюкаслской болезни и инфекционного бронхита кур у цыплят-бройлеров Применение бетулина для повышения поствакцинального иммунитета против ньюкаслской болезни и инфекционного бронхита кур у цыплят-бройлеров Применение бетулина для повышения поствакцинального иммунитета против ньюкаслской болезни и инфекционного бронхита кур у цыплят-бройлеров Применение бетулина для повышения поствакцинального иммунитета против ньюкаслской болезни и инфекционного бронхита кур у цыплят-бройлеров Применение бетулина для повышения поствакцинального иммунитета против ньюкаслской болезни и инфекционного бронхита кур у цыплят-бройлеров Применение бетулина для повышения поствакцинального иммунитета против ньюкаслской болезни и инфекционного бронхита кур у цыплят-бройлеров Применение бетулина для повышения поствакцинального иммунитета против ньюкаслской болезни и инфекционного бронхита кур у цыплят-бройлеров Применение бетулина для повышения поствакцинального иммунитета против ньюкаслской болезни и инфекционного бронхита кур у цыплят-бройлеров Применение бетулина для повышения поствакцинального иммунитета против ньюкаслской болезни и инфекционного бронхита кур у цыплят-бройлеров Применение бетулина для повышения поствакцинального иммунитета против ньюкаслской болезни и инфекционного бронхита кур у цыплят-бройлеров Применение бетулина для повышения поствакцинального иммунитета против ньюкаслской болезни и инфекционного бронхита кур у цыплят-бройлеров Применение бетулина для повышения поствакцинального иммунитета против ньюкаслской болезни и инфекционного бронхита кур у цыплят-бройлеров Применение бетулина для повышения поствакцинального иммунитета против ньюкаслской болезни и инфекционного бронхита кур у цыплят-бройлеров Применение бетулина для повышения поствакцинального иммунитета против ньюкаслской болезни и инфекционного бронхита кур у цыплят-бройлеров
>

Диссертация - 480 руб., доставка 10 минут, круглосуточно, без выходных и праздников

Автореферат - бесплатно, доставка 10 минут, круглосуточно, без выходных и праздников

Задорожная, Марина Валерьевна. Применение бетулина для повышения поствакцинального иммунитета против ньюкаслской болезни и инфекционного бронхита кур у цыплят-бройлеров : диссертация ... кандидата ветеринарных наук : 06.02.02 / Задорожная Марина Валерьевна; [Место защиты: Ом. гос. аграр. ун-т им. П.А. Столыпина].- Омск, 2013.- 152 с.: ил. РГБ ОД, 61 13-16/29

Содержание к диссертации

Введение

1. Обзор литературы 9

1.1. Иммунитет, иммунная система птиц 9

1.2. Методы изучения иммунологического статуса птиц 13

1.3. Иммунодефициты и способы коррекции иммунной системы птиц 18

1.4. Эпизоотическая ситуация в России по Ныокаслской болезни и инфекционному бронхиту кур 20

1.5. Иммупомодуляторы 24

1.5.1. Применение иммуномодуляторов в птицеводстве при вакцинациях 30

1.6. Бетулин - биологически активное вещество природного происхождения 32

1.7. Заключение 36

2.Собственные исследования 40

2.1. Материалы и методы исследования 40

2.2. Эпизоотическая ситуация по Ныокаслской болезни и инфекционному бронхиту кур на птицефабриках Омской области и регламент вакцинации против данных болезней 43

2.3. Характеристика испытуемого препарата Бетулина 46

2.4. Изучение острой токсичности Бетулина

2.4.1. Изучение острой токсичности опытного образца препарата Бетулина на белых мышах и кроликах 49

2.4.2. Изучение острой токсичности опытного образца препарата Бетулина на цыплятах-бройлерах 2.5. Изучение влияния различных доз Бетулина на формирование поствакциналыюго противовирусного иммунитета цыплят-бройлеров 59

2.6. Изучение схем применения Бетулина для повышения поствакциналыюго противовирусного иммунитета цыплят-бройлеров 80

2.7. Испытание наиболее эффективной схемы применения Бетулина в производственных условиях для повышения поствакцинального противовирусного иммунитета цыплят-бройлеров 101

2.8. Экономическое обоснование эффективности схемы применения Бетулина в птицеводческих хозяйствах для повышения поствакцинального

противовирусного иммунитета цыплят-бройлеров 115

3. Обсуждение результатов 118

Выводы 124

Практические предложения 126

Список литературы

Введение к работе

Актуальность темы. Устойчивое благополучие промышленного птицеводства в значительной степени обеспечивается эффективной специфической профилактикой инфекционных болезней. В настоящее время для этого широко используют живые и инактивированные вакцины.

Несмотря на огромный научный и практический опыт профилактики и борьбы с Ньюкаслской болезнью (НБ) и инфекционным бронхитом кур (ИБК), они были и остаются одними из наиболее значимых инфекций в птицеводстве, которые регистрируются во многих странах мира и наносят значительный ущерб. Применение на птицефабриках РФ действующего регламента вакцинации против данных болезней не создает полноценного иммунитета у птицы, так как она подвержена воздействию многочисленных стресс-факторов, сопровождающихся нарушениями иммунореактивности (иммунодефициты), которые развиваются как в результате генетических изменений при созревании клеток иммунной системы, так и при вирусных, бактериальных, паразитарных болезнях, нарушениях условий кормления и содержания, воздействием микотоксинов, лекарственных и химических средств.

Все перечисленные факторы негативно влияют на формирование поствакцинального иммунитета, способствуют циркуляции полевых штаммов возбудителей, повышая их вирулентность и появление среди них новых вариантов, что и приводит к вспышке заболеваний (Виноходов В.В., 1965; Лим Т.Е., 2004; Чудак Р.А., 2004; Дмитриева М.Е., 2009; Занько М.А., 2011).

Для укрепления и стимуляции иммунной системы применяют различные иммуномодуляторы и биологически активные вещества, возвращающие иммунную систему к нормальному уровню как из иммунодефицитного, так и перенапряженного состояния. Особенно возрос интерес ученых и практиков к препаратам природного происхождения. Одним из таких препаратов является бетулин. (Кислицын А.Н., 1994; Воробьева Л.В., 1998; Ведерников Д.Н., 2000; Wachberger P.R. 2002).

В ветеринарии положительные результаты были получены при применении бетулина на мышах, крупном рогатом скоте, собаках, телятах и свиньях (Щегловитова О.Н., 2007; Голдырев А.А., 2007; Земляницина И.Ю., 2011; Алексеева И.Г., 2011). В отечественной и зарубежной литературе отсутствуют данные по влиянию бетулина на организм птиц.

В связи с этим весьма актуальным является более глубокое изучение бетулина, определение его оптимальных доз, кратности введения и периодов использования для профилактики иммунодефицита, повышения эффективности иммунизации и снижения поствакцинальных осложнений при профилактике вирусных болезней птиц.

Цель исследований. Разработать эффективную схему применения Бетулина для повышения поствакцинального иммунитета против Ньюкаслской болезни и инфекционного бронхита кур у цыплят-бройлеров.

Задачи исследований.

1. Изучить эпизоотическую ситуацию по Ньюкаслской болезни и инфекционному бронхиту кур на птицефабриках Омской области и регламент вакцинации против данных болезней.

2. Изучить токсичность Бетулина и влияние его различных доз на формирование иммунитета у цыплят-бройлеров, вакцинированных против Ньюкаслской болезни и инфекционного бронхита кур.

3. Разработать рациональные схемы применения Бетулина для повышения поствакцинального иммунитета цыплят-бройлеров привитых против Ньюкаслской болезни и инфекционного бронхита кур, а также гематологические, серологические, иммунологические и биохимические методы контроля их эффективности.

4. Испытать в производственных условиях на цыплятах-бройлерах эффективную схему применения Бетулина для повышения поствакцинального иммунитета и дать ей экономическое обоснование.

Научная новизна. Впервые на цыплятах-бройлерах изучены токсические и иммуностимулирующие свойства Бетулина, доказана его способность повышать естественную и специфическую резистентность, стимулировать функцию органов кроветворения и обмен веществ, повышать продуктивность цыплят-бройлеров. На основании результатов исследований разработана эффективная, экономически обоснованная схема применения Бетулина для повышения клеточных и гуморальных факторов поствакцинального иммунитета у цыплят-бройлеров привитых против Ньюкаслской болезни и инфекционного бронхита кур.

Теоретическая и практическая значимость работы.

Материалы диссертации вносят определенный вклад в изучение новых экологичных биологически активных веществ растительного происхождения для повышения общей резистентности организма и иммунитета у птиц. Ветеринарной практике предложена схема применения Бетулина для повышения поствакцинального иммунитета у цыплят-бройлеров привитых против Ньюкаслской болезни и инфекционного бронхита кур.

Использование предлагаемых лабораторных методов диагностики позволяет контролировать эпизоотическую ситуацию и иммунодефицитные состояния птиц по данным инфекциям.

Апробация работы. Основные положения диссертационной работы доложены на: IV Международной научной конференции молодых ученых, посвященной 40-летию СО Россельхозакадемии «Новейшие направления развития аграрной науки в работах молодых ученых» (22-23 апреля 2010 г., пос. Краснообск НСО); Международной научно-практической конференции «Современные проблемы диагностики, лечения и профилактики болезней животных и птиц» (20-21 мая 2010 г., г. Екатеринбург. ГНУ Уральский научно-исследовательский ветеринарный институт Российской академии сельскохозяйственных наук); ХI Украинской конференции по птицеводству с международным участием «Актуальные проблемы современного птицеводства» (Харьков, 2010); ХV научной конференции профессорско-преподавательского состава и аспирантов «Научные инновации – аграрному производству» (ФГОУ ВПО ОмГАУ, 2010, Омск); Х международной научной – практической конференции, посвященной памяти выдающегося организатора сибирской ветеринарной науки Алексея Викторовича Копырина «Теоретические и прикладные аспекты диагностики болезней животных» (ГНУ ВНИИБТЖ Россельхозакадемии, Омск, 21-23 сентября 2010); ученых советах ГНУ Сиб НИИП Россельхозакадемии (Морозовка, 2009-2011); IХ региональной научно-практической конференции молодых ученых вузов Сибирского федерального округа «Инновации молодых ученых аграрных вузов-агропромышленному комплексу сибирского региона» (ОмГАУ, 2-3 июня, Омск, 2011); международной научно-практической конференции «Новые подходы к решению актуальных ветеринарно-санитарных и зоотехнических проблем в птицеводстве на современном этапе» (7-8 июня 2011, Омск); Международной научно-практической конференции, посвященной 90-летию СибНИВИ-ВНИИБТЖ «Инфекционная патология животных» (22-24 ноября 2011, Омск); XVII Международной конференции «Инновационные разработки и их освоение в промышленном птицеводстве» (ВНАП, 2012 ).

Публикации результатов исследований. По теме диссертации опубликовано 13 печатных работ, в том числе 3 в ведущих рецензируемых журналах рекомендованных ВАК Минобразования и науки РФ.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 146 страницах компьютерного текста и состоит из введения, обзора литературы, собственных исследований, обсуждения результатов, выводов, практических предложений и приложения. Список использованной литературы включает 193 наименования, в том числе 33 иностранных авторов. Работа иллюстрирована 36 таблицами и 23 рисунками.

Методы изучения иммунологического статуса птиц

Среди методов, дающих возможность объективной оценки интерьериых качеств и оценки состояния здоровья и течения патологического процесса в организме, видное место отводится исследованию крови и ее сыворотки [3, 125J.

Еще в недалеком прошлом исследованиями крови, главным образом, при кровепаразитарных заболеваниях, занимался узкий круг специалистов. Причинами недостаточного использования гематологических исследований в ветеринарной практике являлись, с одной стороны, недостаточная разработка методов исследования крови применительно к птице, с другой - отсутствие данных по составу крови у разных видов птиц и взаимосвязь между составом крови и интерьериыми качествами сельскохозяйственной птицы и состоянием течения патологического процесса в организме.

За последние 30 лет исследователи оставили далеко позади период исканий взаимосвязи между составом крови и состоянием организма; накопленный материал в учении о крови позволяет шире использовать эти данные в практике птицеводства. Кровь - разновидность соединительной ткани, составляющая вместе с лимфой и тканевой жидкостью внутреннюю среду организма. Кровь и органы, в которых происходит образование и разрушение кровяных телец (костный мозг, печень, отчасти лимфоидные органы), объединяют в единую систему крови, деятельность которой регулируется иейрогуморальными механизмами. Несмотря на непрерывное поступление в кровь и выведение из нее различных веществ, химический состав плазмы достаточно постоянный. Все случайные колебания в составе плазмы в здоровом организме быстро выравниваются [3, 23, 74].

Поддерживая относительное постоянство своего состава, кровь осуществляет стабилизацию (гомеостаз) внутренней среды, что необходимо для нормальной жизнедеятельности клеток и тканей. Наряду с нервной системой кровь обеспечивает функциональное единство всех частей и осуществляет взаимосвязь различных анатомических структур организма [37].

Сохраняя постоянство состава, кровь, тем не менее, является достаточно лабильной системой, быстро отражающей происходящее в организме изменения, как в норме, так и в патологии. Поэтому в практической ветеринарии широко используют гематологические анализы [37].

Морфологические, биохимические и иммунные свойства крови являются результатом длительной биологической эволюции. Она представляет собой стройную и относительно устойчивую физико-химическую организацию. Омывая все клетки организма, кровь дает возможность им потреблять кислород, питательные вещества и защищаться от патогенных микроорганизмов. Кроме того, кровь переносит продукты метаболизма, освобождая их от всевозможных шлаков и вредных веществ. Поэтому в крови, как в зеркале, отражаются все изменения, происходящие в организме [14].

С давних пор, используя каплю крови, как незаменимый источник информации, ученые получали сведения о процессах, протекающих в организме, значительно полнее, чем при других методах исследования. Следовательно, по изменению состава крови можно судить о межуточном обмене организма, его защитных реакциях и о многих других показателях жизненно важных для птиц.

Для правильного суждения о качественном изменении крови необходимо обращать внимание на совокупность изменения красной и белой крови. Чем больше будет изменен обмен веществ в организме, тем сильнее и глубже будут изменения в крови [72].

Через кровь осуществляется гуморальная регуляция деятельности органов и систем организма. Гуморальными агентами служат поступающие в кровь гормоны, медиаторы, электролиты, клеточные метаболиты и другие продукты обмена веществ. Она также выполняет защитную функцию, предохраняя организм от действия вирусов, микробов и их токсинов, и других чужеродных организму веществ. Эта функция осуществляется за счет бактерицидных свойств плазмы, фагоцитарной активности лейкоцитов, а также за счет деятельности иммунокомпетентных клеток - лимфоцитов, ответственных за тканевой и клеточный иммунитеты птиц. Повышение сопротивляемости инфекциям достигается благодаря уничтожению болезнетворных микроорганизмов клеточными элементами крови, образованию в организме особых веществ - антител, обладающих противобактерийными свойствами, и антитоксинов, которые противодействуют ядовитым веществам, выделяемым бактериями. В результате создается невосприимчивость организма (иммунитет) к вредно действующим факторам среды [47].

С учетом наличия гуморального и клеточного факторов иммунитета были разработаны и предложены различные методы их изучения и определения иммунологической реактивности организма. Все гуморальные факторы иммунитета (антитела, пропердин, лизоцим и др) имеют белковую природу. Для определения свойств и количества антител часто пользуются различными серологическими методами, основанными на реакции антиген - антитело. К ним относятся реакции агглютинации, преципитации, связывания комплемента и другие, со всевозможными макро- и микромодификациями [2, 39, 48, 49].

Открытие Т- и В-систем иммунитета, поддерживающих постоянство внутренней среды организма, разработка методов идентификации иммунокомпетентных клеток, определение их количества и функциональной активности позволяют более объективно оценить иммунный статус.

Для характеристики иммунологического состояния организма в инфекционном процессе или в поствакцинальный период широко пользуются биохимическими тестами, характеризующими течение обменных процессов. Очевидно, что иммунологическая реактивность будет в первую очередь зависеть от состояния белкового обмена и соотношения белковых фракций в сыворотке крови. Этим и объясняется столь широкое использование метода электрофореза для изучения белкового спектра сыворотки крови при проведении различных иммунологических исследований [35, 61, 78, 142].

К выше изложенному следует добавить, что от состояния обмена веществ зависит активность лимфоидно-макрофагальпой системы, выполняющей определенную функцию в иммунитете. Учитывая, что в процессе эволюции функции организма, направленные на сохранение гомеостаза, постоянно совершенствовались и усложнялись, пройдя путь от иеспецифического фагоцитоза. Вместе с тем определение иммунологической реактивности организма только по динамике образования антител и изменениям обмена веществ страдает очевидной однородностью. Проведение серологических и биохимических исследований в данном случае необходимо сочетать с гематологическими и иммуноморфологическими тестами для учета клеточных факторов иммунитета. Они могут служить критерием оценки как естественной резистентности, так и иммунологической реактивности животного [12, 109, 154J.

Эпизоотическая ситуация в России по Ныокаслской болезни и инфекционному бронхиту кур

Прогресс ветеринарной фармакологии обеспечивается постоянным поиском и созданием новых высокоэффективных и безопасных препаратов. Современные экологические условия, увеличение интенсивности воздействия химико-физических и биологических факторов, нарушения технологии содержания, кормления, а также чрезмерное применение лекарственных препаратов и вакцин создают предпосылки к росту патологий иммунной системы, обмена веществ, желудочно-кишечного тракта, печени, снижению общей резистентности организма и как следствие снижение производственных показателей. Все это требует применения препаратов, позволяющих проводить коррекцию таких состояний, ослабить негативное влияние неблагополучных факторов, повышать естественную и специфическую резистентность.

В настоящее время в ветеринарии возрос интерес исследователей к использованию веществ растительного происхождения, применяемых в качестве биологически активных добавок и лекарственных средств. Одним из которых является Бетулин.

На первом этапе наших исследований изучали острую токсичность опытного образца препарата Бетулина ООО «След» (Пермь) и предназначенного для повышения поствакципалыюго противовирусного иммунитета цыплят-бройлеров. Бетулин представляет собой мелкодисперсный кристаллический порошок с содержанием бетулина не ниже 70%. Препарат давали птице с кормом. Для применения его на птице, требовалось проведение комплекса испытаний по программе утвержденной Государственным Фармакологическим комитетом России, которая, в частности, предусматривает изучение острой токсичности препарата не менее чем на трех видах экспериментальных животных.

Исследования по острой токсичности препарата Бетулин было проведено на белых лабораторных мышах, кроликах и цыплятах-бройлерах при пероралыюм введении.

Работа проводилась согласно «Методическим рекомендациям по изучению общетоксического действия фармакологических веществ», утвержденных Минздравом России, 1997г., в лаборатории ГНУ СибЫИИП Ро ссел ьхозакадем и и.

При определении острой токсичности препарата было установлено, что принудительное вскармливание опытного образца препарата в максимальной дозе 9000 мг/кг массы тела не вызвало гибели лабораторных мышей из опытной группы. Все исследуемые животные имели нормальные поведенческие реакции, хороший аппетит, здоровый внешний вид, отсутствие гиперсаливации. Отмечавшаяся некоторая заторможенность и снижение потребления корма в первые сутки после введения препарата, как в опытной, так и в контрольной группах, связаны, по-видимому, со стрессовым эффектом процедуры многократного пероралыюго введения больших объемов Бетулипа. В дальнейшем, за период наблюдения по общему состоянию и поведению опытная группа не отличалась от контрольной.

Живая масса тела мышей (самцы и самки) в группах приведена в таблице 2.4.1.1. Из таблицы видно, что на второй день исследования отмечалась некоторая потеря массы тела у мышей в опытной и контрольной группах, что связано со стрессовым фактором, обусловленным помещением животных в обстановку исследований. В дальнейшем отмечали повышение средней живой массы, как у самок, так и у самцов в обеих группах. Анализ данных не выявил каких-либо различий по живой массе тела между опытной и контрольной группами.

По окончанию исследования (через 14 дней) мыши всех экспериментальных групп были подвергнуты эвтаназии передозировкой эфира. Шерсть мышей, имела опрятный вид, была блестящей, без очагов облысения. Кожа и подкожная клетчатка не изменены, раздражения, отечности не наблюдалось. При осмотре грудной и брюшной полостей нарушений в расположении внутренних органов не отмечали. Подчелюстные лимфатические узлы и слюнные железы имели овальную или округлую форму, однородный розоватый или желтоватый цвет и умеренную плотность.

Щитовидная железа плотно прилегала к гортани, имела обычные размеры и плотность, розовато-красноватый цвет. Тимус имел треугольную форму, беловатый цвет и умеренно плотную консистенцию.

Величина и форма сердца не изменены. Мышца сердца - красно-коричневая, плотная. Поверхность легких и ее ткань на разрезе имели однородную бледно-розовую окраску. Слизистая оболочка внелегочных бронхов была гладкой, блестящей, бледно-розовой. Желудок имел обычную форму и размеры, просвет был заполнен плотным пищевым содержимым. Слизистая желудка была бледно-розовой, блестящей, складчатой. Слизистая тонкой и толстой кишки была блестящей, гладкой, отечности и гиперемии не регистрировали.

Величина и форма печени без изменений. Капсула печени была тонкой, прозрачной. Ткань печени имела коричневатый цвет и умеренно плотную консистенцию.

Поджелудочная железа была бледно-розовой, дольчатой, не увеличена.

Величина и форма почек не отличались от контроля, капсула легко снималась. Поверхность органа была гладкой, однородной коричневато-сероватой окраски. На разрезе почек отчетливо различались корковое и мозговое вещество. Форма, размеры и плотность надпочечников, яичников или яичек без видимых изменений. Селезенка имела темно-вишневый цвет, гладкую поверхность и плотноватую консистенцию.

Оболочки головного мозга были тонкими, прозрачными. Вещество головного мозга имело умеренную плотность. Расширения желудочков мозга не наблюдалось. Относительная масса органов мышей представлена в таблице 2.4.1.2. Статистически достоверного изменения относительной массы каких-либо органов у самцов и самок мышей не отмечали.

Таким образом, через две недели после острого введения максимальной дозы 9000 мг/кг массы тела испытуемого препарата пережившие интоксикацию мыши не отличались по изучаемым показателям от животных контрольной группы.

Характеристика испытуемого препарата Бетулина

Использование Бетулина повышает функциональную работу печени, стимулирует синтез альбумина. Наилучшие результаты получены при применении его в дозе 120 мг/кг массы и периоде 1-14 (4 группа) и 1-21 (6 группа) дней.

Общее количество глобулинов (рис. 14) в возрасте 7 дней в опытных группах было выше контроля на 0,2-5,2 г/л. Наиболее высокий уровень наблюдается в 6 группе, который на 5,2 г/л превышал контроль (доза 120 мг/кг). В 14 дней отмечали увеличение глобулинов во всех опытных группах на 1,5-4,8 г/л по сравнению с контролем. В группах, где Бетулин применяли 1-14 дней (3, 4, 5 и 6) в этом возрасте отмечали повышение глобулинов на 2,8-4,8 г/л по сравнению с контролем. При этом высокие показатели глобулинов были в 4 и 6 группах, которые на 4,0 и 4,8 г/л соответственно превышали контроль.

В 21 день показатель глобулинов во всех опытных группах был на 0,7-4,2 г/л выше контроля, при наиболее высоком в 6 группе 23,2 г/л, где доза была 120 мг/кг и период применения 1-21 день. При дальнейших исследованиях регистрировали как повышение, так снижение глобулинов, достоверной разницы с контролем не выявлено.

В возрасте 14 дней количество а, р, у - глобулинов в опытных группах было выше контроля (рис. 15).

Наибольшие показатели глобулинов отмечали в 4 и 6 группах, где доза препарата была 120 мг/кг массы и период - 1-14 дней. Количество а -глобулинов в 4 и 6 группах на 1,3 и 1,4 г/л соответственно превышало контроль. Содержание р - глобулинов в этих же группах было выше контроля на 0,9 и 1,2 г/л. Наибольшую разницу отмечали по количеству у - глобулинов, содержание которых в 4 и 6 группах в 5,5 и 4,5 раз соответственно превышало контроль. Максимальное количество было в 4 группе, где доза применяемого препарата

Использование Бетулина в период 1-14 дней, в дозе 120 мг/кг повышает количество а, Р, у - глобулинов в сыворотки крови у цыплят опытных групп. Наибольшую разницу с контролем отмечали по содержанию у - глобулинов, которое в 5,5 раз превышала контроль, что свидетельствует об интенсивном процессе антителообразования после иммунизации у цыплят 4 группы.

Результаты иммунологических исследований представлены в таблице 2.6.6. Количество В-лимфоцитов в возрасте 14 дней у цыплят опытных групп выше контроля на 3-28%, что свидетельствует о стимулирующем действии на них Бетулина и проявляется в повышенном синтезе антител, активации

Через две недели после вакцинации, в возрасте 21 день, когда процесс антителообразования наиболее интенсивен, у цыплят опытных групп количество В-лимфоцитов превышало контроль на 10-35%. Максимальное количество их отмечали в 4 группе, где доза Бетулина была 120 мг/кг и период применения препарата составил 1-14 дней, при достоверной разнице с контролем. В 28 дней количество В-лимфоцитов снизилось во всех группах, однако в опытных группах их количество превышало контроль на 7-24%, при наиболее высоком уровне в 4 (Р 0,05) и 6 (Р 0,05) группах.

Таким образом, в опыте по иммунизации цыплят вакцинами против МБ и ИБК в сочетании с Бетулином установлено достоверное увеличение В-лимфоцитов по сравнению с использованием вакцин без Бетулина. Эффект стимуляции В-лимфоцитов зависит от дозы и периода применения препарата, что согласуется с результатами биохимических и серологических исследований. Наилучшие результаты получены в 4 группе, где доза Бетулина была 120 мг/кг массы и период применения 1-14 дней. В 5 и 6 группах при дозе препарата 60 и 120 мг/кг соответственно и периоде применения 1-21 день показатели В-лимфоцитов были на уровне или несколько ниже в сравнении с 3 и 4 группами, где Бетулии применяли в тех же дозах 1-14 дней. В связи с чем нет необходимости применять препарат еще 7 дней, так как дальнейшее увеличение периода его применения, в сроки отдаленные от вакцинации, не оказывает стимулирующего действия на выработку антител. Использование препарата первые 7 дней, до вакцинации, у цыплят 1 и 2 групп привело к увеличению количества В-лимфоцитов по сравнению с контролем, но достоверной разницы не выявлено.

Испытание наиболее эффективной схемы применения Бетулина в производственных условиях для повышения поствакцинального противовирусного иммунитета цыплят-бройлеров

Неоспоримо, что для получения высокой продуктивности и снижения общей заболеваемости наиболее эффективным способом является специфическая профилактика, но её проведение па фоне слабой иммунной системы приводит к гипоэргической реакции на вакцинацию или её отсутствию. Возникающие поствакцинальные осложнения бактериальной флорой создают условия для циркуляции полевых штаммов па вакцинированном поголовье. Низкоиммунная птица неадекватно реагирует на вакцинацию, не может адаптироваться к изменениям условий содержания, кормления, к любым стрессовым ситуациям и не способна дать генетически заложенной продуктивности. Иммунной слабости сопутствуют снижение продуктивности, циркуляция инфекционных болезней, протекающих в латентной или ассоциированной форме, вспышки болезней вызываемых условно патогенной микрофлорой. В частности снижение иммунного статуса птицы приводит к проявлению колибактериоза [55]. Организм здоровой птицы за счет естественной резистентности может противостоять инфицированию Е. Coli, но на фойе иммунной слабости для борьбы с латентной бактериальной флорой (прежде всего с Е. Coli) в первые дни выращивания птицы и после проведения вакцинаций используется широкий ассортимент антибактериальных средств, позволяющих временно снижать микробный прессинг. Но эти препараты не улучшают состояние иммунной системы, а скорее наоборот.

Большинство из современных лекарственных средств предлагаемых ветеринарным фармацевтическим рынком являются синтетическими и нередко вызывают осложнения, включая усугубление иммуиодепрессивпых состояний. Синтетические лекарственные средства кумулируются в организме, загрязняют сырье, продукты питания и окружающую среду [10]. Данное обстоятельство вынуждает искать и внедрять в ветеринарную практику препараты природного происхождения, которые лишены указанных недостатков, и позволяют применять их как в отдельности, так и в комплексе с другими средствами. Большую перспективу в этом плане имеют растшельные средства, препараты, полученные из органов и тканей животных, хитинового покрова ракообразных и др. [105, 137, 139]. Большинство из этих препаратов имеет ряд преимуществ перед синтетическими препаратами: многоплановость влияния на организм, низкая токсичность, активация функций нейроэндокришюй системы, стимуляция процессов регенерации, ослабление действия стресс-факторов, иммуномодулирующее действие, повышение иммунного ответа при вакцинации, снижение кратности применения химиотерапевтических средств и повышение их лечебного действия [132]. Иммуностимулирующее действие на птиц препаратов растительного происхождения изучено недостаючно. Наиболее полно в этом плане исследованы свойства элеутерококка колючего [59, 91, 106], женьшеня, лимоника китайского, радиолы розовой, эхинацеи пурпурной [107, 112, 122, 152, 156].

Иммуностимулирующие свойства Бетулина изучались на цыплячах-бройлерах вакцинированных против Ныокаслской болезни (ПБ) и инфекционного бронхита кур (ИБК), возбудители которых и их вакцинные штаммы являются иммунодепрессантами [24].

В отечественной и зарубежной литературе, в отношении токсичности Бетулина сообщается, что препарат не является токсичным, не проявляет аллергенных свойств, не обладает эмбриолетальным и тератогенным действием и не влияет на развитие плацент. Применение Бетулина на протяжении 30 суток не выявило каких-либо токсикологических эффектов [32, 58, 68, 75, 90]. Указанные выше данные по токсичности Бетулина, согласуются с нашими результатами. Исследование острой токсичности на белых мышах показало, что испытуемый Бетулин по параметрам острой токсичности относится к нетоксичному веществу. Значения ЛД50 Бетулина для белых мышей обоего пола при пероралыюм введении находятся заведомо выше 9000 мг/кг массы тела, что в десятки раз больше максимальной суточной дозы. Результаты опыта на кроликах показали, что Бетулин вводимый животным в желудок в объеме 30 мл, не оказал токсического действия на их организм. Максимальная доза опытного образца препарата Бетулин составила 2500 мг/кг массы, что в 250 раз превышало максимальную суточную дозу. В опытах па цыплятах ЛД50 установить не удалось, так как пероральное введение Бетулина в дозе 9600 мг/кг массы тела 14-ти дневным цыплятам не приводило к гибели птицы, не оказывало каких-либо существенных нарушений общего состояния, поведения, не вызывало изменений в показателей крови, не приводило к патологическим изменениям внутренних органов.

Иммуностимулирующая доза и схема применения Бетулина для повышения напряженности поствакциналыюго противовирусного иммуинитета при вакцинациях против вирусов МБ и ИБК определены в опытах на цыплятах-бройлерах. Исследования показали, что при вакцинациях цыплят, Бетулин повышает естественную резистентность и иммунный ответ. За период исследований у цыплят отмечали повышение бактерицидной активности сыворотки крови (БАСК) на 3-12%, что свидетельствует о стимулирующем влияние Бетулина на неспецифическую резистентность цыплят-бройлеров. Стимулирующее влияние на клеточный иммунитет выразилось в повышении общего количества Т-лимфоцитов на 31,6% (Р 0,01) в основном за счет Т-хелперов, увеличивая их па 25,8% (Р 0,001). А так же увеличением на 28,5%) количества В-лимфоцитов (клеток гуморального иммунитета) при вакцинации против вирусов МБ и ИБК. Таким образом, у цыплят стимулировался иммунный ответ повышалось количество иммунной птицы против Ныокаслской болезни на 20%о, инфекционного бронхита кур на 27%). Средний титр антител (ИБК) повышался на 1252 (Р 0,01), фагоцитарная активность нейтрофилов крови в 1,1-1,3 раза.

Похожие диссертации на Применение бетулина для повышения поствакцинального иммунитета против ньюкаслской болезни и инфекционного бронхита кур у цыплят-бройлеров