Введение к работе
Актуальность таїш. Желудочно-кишечные заболевания занимают особое место среди инфекционных болезней молодняка крупного рогатого скота. В болызшютво случаев в этиология массовых заболеваний позороаденшх телят ведущую роль играют Е.Коли и кишечные вирусы, в том числе ротавіфуо.
Для лечения ротавирусной инфекции, которая способна наносить больной экономический урон животноводству, применялись солевые растворы электролитов, глюкоза, аминокислоты, каолин, пектин, иммунная сыворотка, плазм* и иптеферон, а также антибиотики. Но эффективность перечисленных препаратов оказалась незначительной, поэтому во многих отрадах мира были разработаны оредотва специфической профилактики /как живая, так и инактизироваяная вакцины/. Из имеющихся вакцин ' значительное место отводится инактивированным препаратам, применяемым для иммуникации коров в расчете на создание коло-отрального иммунитета у новорожденных телят.
Кафедра микробиологии и вирусологии и лаборатория вирусологии ветеринарного факультета УСХА являются одним из ведущих подразделений в Советском Союзе в области изучения ротавирусной инфекция крупного рогатого скота. В настоящее время исследования находятся на этапе создания новой эмульгированной формолваяцины против ротавируса с испольв раннем местного изолята.
При конструировании новой антивирусной ткци'ш, я rot! чисчр против ротавируса, определенно биологически свойстн такого препараті лпл'іотея сеоьмл актушнюг, гидачий - тая как ітротчиорпизоотиче'ікая гффектярпооть применяемых вакцин зави-
оиї от способности отих препаратов индуцировать поствак-циіінїій иммунитет у привитых.
цель и задачи исследовании. Целью работы являлось изу-HQiuiQ и разработка лабораторного метода контроля эмульгированной формолвакцшш против ротавируса крупного рогатого скота на тшуно генную активность, а такхе полноту инактиват ции, стерильность и реактогенность. Для достижения поставленной цели предусиатривалось решение следующих задач.
-
Разработка и совершенствование метода контроля инак-тивированных вакцин против ротавируса крупного рогатого скота на стерильность, вирулентность и реактогенность.
-
Изучение иимуно генное ти экспериментальных образцов вакцин против ротавирусной инфекции крупного рогатого скота путей разработки лабораторного метода определения ВДдо на лабораторных животных,
-
Определение оптимальной дозы адьюванта и установле-. іше прививисидозы вакцины для крупного рогатого скота.
Научная новизна работы состоит в том, что наші впервые разработан метод определения имыуногенных свойств змульгированноГі формолвакцшш против ротавируса крупного рогатого скота и даны экспериментальные доказательства пригодности исследуемых образцов препарата к использовании для прививки животных,
установлено, что экспериментальные образцы препарата были стерильными. Экспериментально доказаны их безвредность, умеренная реактогенность для лабораторных животных и Kpj того рогатого скота, а токсичность для культуры клеток МДО.Ч.
Впервыо разработан лабораторний метод определения ШГЦП
па лабораторних животных, позволивши!! оптимизировать прививную дозу для крупного рогатого скота. Високая воспрсигго;;и-меть результатов, полученных в опитах, позволяет считать пригодный данный метод для практического использования. Изучение соотношения адьюзвпта с антигенами в вакцино показало, что оно должно находиться в пределах in. Выяснено-, что с помощью МА мокно обнаружить антитела к ротавирусу в сиворотко крови привитых бычков на 5-й день послз имнунизацзи, а с помощью РН и РСК - на 10-й день.
Теоретическая значимость и пр&ктичоскад ценность работа,. Па основании проведенных исследований установлено, что мотгао использовать чувствительную культуру клеток и лабораторных зивотішх /морские свинки, белые крысы и белые мвши/ для определения биологической активности эмульгированной формолвак- дины против ротавпруса кругшого рогатого скота. їїинуногеиївя доза препарата для крупного рогатого скота составляет 25 5Щг0 по результатам проверки на морских свинках и белых масах и 20 ПМДглі па белых крысах. Показано, что после введения такой дозы вакцины животным,максимально напряхеженный иммунитет отмечается с 25 по 40 день. Подтверждением этому являются возрастание и снижение титра виру сне йтралнзующих антител в сыворотках привитых животных.
Параллельное выявление поствакцкнних антчтел в сыворотках крови с помощью реакции нейтрализации /PFT/, им^уноіерменя-пого еітли?а /ША/ и связыгания компакента/ГСК/ показлло до" -таточяо впеокул эффекшвлоеть эти;: мптодог, сіролагичсопіт- исследований. Япецифи'пюсть ГН позголлет ''-vpnvo исис/'К'Оп.-'ть че .іт.чл обні-.руг'зі'ия піфуоноі!тр'іляз;;г!',их ,лпгигг>л" ч :'>оп).:>;-чусу „ а
чувствительность ИФА дает возможность обнаружить антитела к ротавіфусу в ранней стадии их появления в сыворотках крови, поэтому во многих лабораториях она нашла широкое применение, особенно, для определения иммуногенных свойств антиротавирусных вакцин.
Апробация работы, материалы диссертации доложены на , конференции аспирантов и преподавателей ветеринарного факультета украинской сельскохозяйственной академии, г.Киев, 1988 и 1989 гг.; на Всесоюзной конференции по борьбе с бесплодием и профилактика инфекционных заболеваний молодняка, г.Харьков, 1988 г., а также на расширенном заседании кафедр эпизоотологии, микробиологии и вирусологии /октябрь, 1990 г./
Публикации.Основіше положения диссертации опубликованы в трех научных работах.
Объем и структура работ». Диссертационная работа изложена на 149 страницах машинописного текста, иллюстрирована ІЙ таблицами, 5 рисунками, 12 снимками, состоит из введения, обзора литературы, собственных исследований, обсуждения материалов, выводов и практических предложений. Список литературы включает в себя 268 источника, в том числе 257 работ зарубеиних авторов.
